LA CITOFLUORIMETRIA Campioni:
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<strong>LA</strong> <strong>CITOFLUORIMETRIA</strong><br />
NEL<strong>LA</strong> DIAGNOSTICA DELLE MA<strong>LA</strong>TTIE<br />
EMATOLOGICHE<br />
Marcatori:<br />
la nomenclatura CD<br />
Si considera membro di un Cluster differentiation<br />
un Marcatore di superficie che:<br />
• identifica un particolare tipo cellulare o un<br />
certo stadio differenziativo<br />
• ha una struttura biochimica definita<br />
• è riconosciuto da un gruppo di MoAb diversi<br />
• Sangue periferico<br />
• Sangue midollare<br />
• Liquido pleurico<br />
• ascitico<br />
<strong>Campioni</strong>:<br />
• pericardico<br />
• Sospensione cellulare da tessuto<br />
1
CD7<br />
CD2<br />
CD5<br />
CD3<br />
CD1<br />
CD4<br />
CD8<br />
TdT<br />
TCR<br />
Marcatori T-lineage<br />
CD34<br />
CD13<br />
CD33<br />
CD117<br />
CD11b<br />
CD16<br />
CD66b<br />
CD66c<br />
CD15<br />
TdT<br />
CD79a<br />
CD19<br />
CD10<br />
CD20<br />
CD22<br />
Cu<br />
SmIg<br />
Marcatori B-lineage<br />
Marcatori granulocitopoiesi<br />
2
Marcatori monocitopoiesi<br />
CD34<br />
CD13<br />
CD33<br />
CD14<br />
CD11b<br />
CD16<br />
CD66b<br />
CD66c<br />
CD15<br />
• Leucemie Acute<br />
• Mieloblastica<br />
• Linfoblastica<br />
Malattie onco-ematologiche:<br />
classificazione<br />
• Sindromi Mieloproliferative Croniche<br />
• Leucemia Mieloide Cronica<br />
• Trombocitemia essenziale<br />
• Policitemia Vera<br />
• Metaplasia Mieloide con Mielofibrosi<br />
• Mielodisplasie<br />
• Sindromi Linfoproliferative Croniche:<br />
• Leucemia Linfatica Cronica<br />
• Linfomi di Hodgkin e non-Hodgkin<br />
• Mieloma Multiplo<br />
CD34<br />
CD45<br />
CD33<br />
CD71<br />
CD105<br />
CD36<br />
GPA<br />
Marcatori eritrocitopoiesi<br />
Leucemie acute<br />
• Malattie neoplastiche solitamente acquisite<br />
• Coinvolgimento della cellula staminale emopoietica o dei<br />
suoi progenitori immaturi<br />
• Proliferazione clonale di elementi cellulari immaturi nel<br />
midollo osseo o, più raramente, in sedi extramidollari<br />
• Alterata differenziazione e proliferazione degli stessi e<br />
delle linee cellulari derivanti<br />
• Andamento acuto<br />
3
• Criteri morfologici<br />
• “ citochimici<br />
• “ immunofenotipici<br />
• “ citogenetici<br />
Classificazione<br />
Morfologia … leucemia acuta<br />
mieloide<br />
Morfologia … midollo normale<br />
AML: Citofluorimetria<br />
4
AML: Citofluorimetria<br />
5
Gating<br />
CD 45<br />
ANTIGENE PAN LEUCOCITARIO, ovvero<br />
ESPRESSO CON CARATTERISTICA<br />
INTENSITA’ SU LEUCICITI PERIFERICI<br />
MA ESPRESSO IN MODO ANOMALO<br />
SU CELLULE B<strong>LA</strong>STICHE<br />
ALL-T<br />
Cellule<br />
immatur<br />
e<br />
Linfociti Monociti<br />
Eritrociti<br />
Espressione CD45<br />
Granulociti<br />
maturi<br />
Granulociti<br />
immaturi<br />
ALL-T<br />
CD1a, CD2, CD3, cyCD3, CD4, CD5, CD7, CD8, TdT ,(CD34)<br />
6
ALL-B, common<br />
ALL-B, B matura<br />
ALL-B, common<br />
CD10, CD19, CD20, CD22, CD24, CD34, DR, IgM,<br />
cyIgM, Kappa, lambda, TdT, (CD15)<br />
ALL-B, B matura<br />
CD10, CD19, CD20, CD22, CD24, CD34, DR, IgM,<br />
cyIgM, Kappa, lambda, TdT<br />
7
Differenziazione linfocitaria<br />
Leucemia Linfatica Cronica<br />
• Espansione di piccoli linfociti apparentemente maturi<br />
• Accumulo nel sangue periferico, midollo osseo,<br />
organi linfatici e, più raramente, extralinfatici<br />
• Forma di leucemia di più frequente osservazione nei<br />
paesi occidentali<br />
(10-15 casi/ 100.000 abitanti /anno)<br />
Morfologia su SVP Morfologia su BM<br />
8
CLL: citofluorimetria<br />
Kappa light chain restriction<br />
CD5, CD23 positive B cells<br />
9
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