Roncelli: "Oli e grassi" - Corso di Perfezionamento

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Becker, agitatore magnetico, centrifuga, matracci da 25 ml, bilancia tecnica, cilindro da 25 ml, soluzione di Na2CO3 7,5%,soluzione di Folin Ciocalteau 1:10,miscela CH3OH/H2O80:20, spettrofotometro UV, imbuto, beuta carta, da filtro. Preparazione reattivo di Folin Ciocalteau: questo reattivo può essere trovato in commercio,altrimenti puòessere trovato nel seguente modo: sciogliere 100 g di tungstatodi sodio (Na2WO4.2H2O) e 25 g di molibdato di sodio(NaMoO4.2H2O) in 700 ml di acqua distillata. Aggiungere 50 ml di acido fosforico 85% e 100 ml di HCl 37%.Portare ad ebollizione in riflusso per 10 ore. Aggiungere poi150 g di solfato di litio (Li2SO4.H2O) poi mettere alcune goccedi bromo e portare nuovamente ad ebollizione per 15 minuti.Raffreddare e portare a 1dm3 con acqua distillata. Conservare in frigo. Principio: l’insieme dei composti fenolici viene ossidato dal reattivo diFolin Ciocalteau, costituito da una miscela di acidofosfotunstico (H3PW12O40) e acido fosfomolibdico(H3PMo12O40) che si riduce in una miscela di ossidi blu ditungsteno e molibdeno (W8O23 e Mo8O23), grazieall’ossidazione dei fenoli. La colorazione blu prodotta ha un massimo assorbimento intorno a 750 nm. Metodica di analisi: pesare circa 10 g di olio in un becker (segnare il peso esatto). Aggiungere 10 ml di miscela metanolo/acqua per estrarre i polifenoli dall’olio. Agitare per 30 minuti, aspettare 15 minuti e centrifugare. Si formano 2 fasi e con il contagocce estrarre la fase superiore e metterla in un matraccio da 25 ml. Sull’olio rimasto aggiungere ancora 10 ml di CH3OH/H2O, agitare, centrifugare e riseparare la fase superiore mettendola nello stesso matraccio da 25 ml di prima. Portare a volume con metanolo/acqua. Ghiacciare la soluzione, riportarla allo stato liquido e filtrarla per eliminare le eventuali tracce di olio rimaste. In un cilindro da 25 ml mettere 1 ml di filtrato, 10 ml di soluzione di Folin Ciocalteau 1:10 e 9 ml di soluzione al 7,5% di Na2CO3 per creare l’ambiente basico. Preparazione bianco: 10 ml di soluzione di Folin Ciocalteau 1:10,9 ml di soluzione al 7,5% di Na2CO3 e 1 ml di miscela metanolo/acqua. Lettura: aspettare 2 ore prima di eseguire la lettura a 765 nm. Calcoli: Lo strumento esprime il risultato in mg acido gallico/dm3 olio. Riportare in mg acido gallico/kg olio = (concentrazione in mg acido gallico/dm3 olio * 25)/peso olio(g) P.S. Gli standard per la retta di taratura devono essere fatti in un intervallo compreso tra 25 e 500 mg/l di acido gallico.
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