Roncelli: "Oli e grassi" - Corso di Perfezionamento

Becker, agitatore magnetico, centrifuga, matracci da 25 ml, bilancia tecnica, cilindro da 25 ml,
soluzione di Na2CO3 7,5%,soluzione di Folin Ciocalteau 1:10,miscela CH3OH/H2O80:20,
spettrofotometro UV, imbuto, beuta carta, da filtro.
Preparazione reattivo di Folin Ciocalteau:
questo reattivo può essere trovato in commercio,altrimenti puòessere trovato nel seguente modo:
sciogliere 100 g di tungstatodi sodio (Na2WO4.2H2O) e 25 g di molibdato di sodio(NaMoO4.2H2O) in
700 ml di acqua distillata.
Aggiungere 50 ml di acido fosforico 85% e 100 ml di HCl 37%.Portare ad ebollizione in riflusso per 10
ore. Aggiungere poi150 g di solfato di litio (Li2SO4.H2O) poi mettere alcune goccedi bromo e portare
nuovamente ad ebollizione per 15 minuti.Raffreddare e portare a 1dm3 con acqua distillata.
Conservare in frigo.
Principio:
l’insieme dei composti fenolici viene ossidato dal reattivo diFolin Ciocalteau, costituito da una miscela
di acidofosfotunstico (H3PW12O40) e acido fosfomolibdico(H3PMo12O40) che si riduce in una miscela di
ossidi blu ditungsteno e molibdeno (W8O23 e Mo8O23), grazieall’ossidazione dei fenoli. La colorazione
blu prodotta ha un massimo assorbimento intorno a 750 nm.
Metodica di analisi:
pesare circa 10 g di olio in un becker (segnare il peso esatto).
Aggiungere 10 ml di miscela metanolo/acqua per estrarre i
polifenoli dall’olio. Agitare per 30 minuti, aspettare 15 minuti e
centrifugare.
Si formano 2 fasi e con il contagocce estrarre la fase superiore e
metterla in un matraccio da 25 ml. Sull’olio rimasto aggiungere
ancora 10 ml di CH3OH/H2O, agitare, centrifugare e riseparare
la fase superiore mettendola nello stesso matraccio da 25 ml di
prima. Portare a volume con metanolo/acqua. Ghiacciare la
soluzione, riportarla allo stato liquido e filtrarla per eliminare le
eventuali tracce di olio rimaste. In un cilindro da 25 ml mettere
1 ml di filtrato, 10 ml di soluzione di Folin Ciocalteau 1:10 e 9
ml di soluzione al 7,5% di Na2CO3 per creare l’ambiente basico.
Preparazione bianco:
10 ml di soluzione di Folin Ciocalteau 1:10,9 ml di soluzione al 7,5% di Na2CO3 e 1 ml di miscela
metanolo/acqua. Lettura: aspettare 2 ore prima di eseguire la lettura a 765 nm.
Calcoli:
Lo strumento esprime il risultato in mg acido gallico/dm3 olio.
Riportare in mg acido gallico/kg olio = (concentrazione in mg acido gallico/dm3 olio * 25)/peso
olio(g) P.S.
Gli standard per la retta di taratura devono essere fatti in un intervallo compreso tra 25 e 500 mg/l di
acido gallico.