Scheda Tecnica HEPY STOOL CARD - Biolife

Biolife Italiana S.r.l. Scheda Tecnica
N°19VT82000 I- 0 04/2005 Pagina 1 di 3
HEPY STOOL CARD
Test rapido su card per la determinazione dell’antigene
Helicobacter pylori su campione fecale
INTRODUZIONE
HePy Stool Card è un test immunocromatografico di screening per la rilevazione dell’antigene batterico di Helicobacter
pylori nelle feci. Helicobacter pylori (noto anche come Campylobacter pylori) è un batterio con morfologia a spirale,
flagellato, Gram negativo, che infetta la mucosa gastrica e causa varie malattie gastrointestinali, coma la dispepsia non
ulcerosa, ulcere duodenali e gastriche, gastriti attive e può aumentare il rischio di adenocarcinoma allo stomaco, tanto da
essere classificato come agente carcinogeno di tipo I. Sono diversi i ceppi di H. pylori isolati: tra questi il ceppo che esprime
l’antigene CagA è fortemente immunogeno, quindi clinicamente importante in quanto associato al fattore citotossico. Da
dati di letteratura si è visto che nei soggetti infettati che presentano anticorpi contro il prodotto del gene CagA, il rischio di
cancro gastrico non cardiale è cinque volte maggiore del gruppo di soggetti infettati da un ceppo batterico CagA negativo. La
presenza del gene stesso favorisce la persistenza dell’infezione, l’ulcerazione e inoltre la proteina associata al gene, la tossina
vacuolizzante VacA, è frequentemente causa di forti infiltrazioni polimorfonucleate nella mucosa gastrica. Questo antigene
associato ad altri, come CagII, CagC, inoltre sembra innescare un’immediata risposta infiammatoria che può favorire
ulcerazioni (ulcera peptica), allergie alimentari, ed una riduzione nell’efficacia della terapia. Per la diagnosi di infezioni da
parte di questo batterio sono attualmente disponibili varie metodiche di tipo invasivo e non. Le metodiche invasive
richiedono l’esecuzione di una endoscopia della mucosa dello stomaco, con successivo test istologico, colturale e dell’ureasi,
tecniche queste con costi e tempi elevati. In alternativa, sono disponibili metodi non invasivi quali il Breath Test, che però
risulta essere complesso e poco selettivo nella risposta, oppure i classici metodi in ELISA ed in immunoblotting.
PRINCIPIO DEL TEST
HePy Stool Card è un metodo immunocromatografico assolutamente non invasivo, semplice da eseguire, rapido e molto
preciso nel risultato. Il metodo prevede l’utilizzo di anticorpi specifici per l’H. pylori fissati ad una membrana cromatografia.
L’eventuale presenza di H. pylori nelle feci determina la formazione di un ponte capace di legare il secondo anticorpo
coniugato con oro colloidale. Alla membrana è fissato anche un anticorpo generico capace di legare il secondo anticorpo
coniugato, confermando o meno la buona riuscita del test.
CAMPIONI
Feci. Stabilità 2 giorni a +4°C.
COMPOSIZIONE DEI REATTIVI
Card: membrana sensibilizzata con anticorpi specifici per H. pylori contenente un secondo
anticorpo monoclonale coniugato con oro colloidale.
Liquido di estrazione: soluzione fortemente ipotonica.
I reattivi possono essere conservati a +6°C - +35°C.
CONTENUTO DELLE CONFEZIONI
COD. 19VT82000 COD. 19VT82001
Membrane Test 10 pezzi 50 pezzi
Liquido di Estrazione 10 pezzi 50 pezzi
Gocciolatori 10 pezzi 50 pezzi
Metodica 1 pezzo 1 pezzo
RACCOLTA DEL CAMPIONE
Trasportare il campione in un contenitore a tenuta d’aria e conservarlo a temperature di +2°C - +8°C fino al momento del
test. Eseguire prima possibile il test sul campione, anche se si può attendere fino a 72 ore se conservato a +2°C - +8°C
prima del test. Se il test non può essere eseguito entro il lasso di tempo suddetto, congelare immediatamente i campioni al
momento in cui si ricevono e conservarli nel congelatore (≤ -20°C) fino al momento del test. I campioni possono essere
congelati e scongelati due volte.
Nota
Feci contenute in terreni di trasporto, su tamponi o miscelati con conservanti non sono indicate per l’analisi.
Miscelare bene le feci prima di prelevare il campione fecale.
Feci Liquide o Semi-Solide
Usando una pipetta di trasferimento (inclusa nel kit) per ogni campione fecale, prelevare una quantità di feci dal campione
stesso. Dispensare 6-7 gocce di ogni campione fecale nei singoli flaconi di liquido di estrazione del campione. Agitare
delicatamente, quindi agitare su vortex per 15 secondi.
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E-mail: biolife@masciabrunelli.it ; sito Web: www.biolifeitaliana.it

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Prestare attenzione nel pipettare feci semi-solide. L’aggiunta di un quantitativo inferiore di feci rispetto a quanto indicato
può causare un test falsamente negativo. L’aggiunta di un quantitativo superiore di feci rispetto a quanto indicato può
generare risultati non validi a causa del flusso limitato del campione.
Feci Formate / Solide
Aprire il flacone contenente il liquido di estrazione svitando il tappo. Immergere in 3 punti diversi delle feci raccolte il
segmento del tappo con l’estremità zigrinata. Estrarre l’estremità zigrinata dalle feci, e verificare di aver raccolto una
piccola parte (6 mm circa di diametro) delle feci stesse. Riposizionare il tappo sul flacone del liquido di estrazione, così che
l’estremità zigrinata si immerga nel liquido stesso. Agitare delicatamente fino ad ottenere una sospensione omogenea.
Attendere almeno 3 minuti, per consentire al campione di omogenarsi e alle parti solide di depositarsi sul fondo del flacone.
Eventualmente ripetere l’operazione fino ad ottenere una soluzione di colore giallo scuro-marrone.
Il trasferimento di una quantità di feci troppo piccola, o la completa mancanza di miscelazione e sospensione delle feci nel
liquido di estrazione del campione può causare risultati del test falsamente negativi. Prestare attenzione a trasferire non
meno e non più della quantità indicata. Prima del test, miscelare completamente il campione su vortex. L’aggiunta di una
quantità eccessiva di campione può causare risultati non validi dovuti al flusso limitato del campione.
PROCEDIMENTO
1. Rimuovere il dispositivo dalla busta protettiva (portare il dispositivo a temperatura ambiente prima di aprire la busta per
evitare il formarsi di condensa sulla membrana). Identificare il dispositivo con i dati del paziente.
2. Agitare delicatamente il flacone contenente il campione.
3. Rompere il beccuccio del flacone di estrazione (dalla parte opposta rispetto al tappo a vite) e dispensare 3-4 gocce di
campione nel pozzetto “S” della card.
4. Leggere il risultato tra il 5° ed il 10° minuto.
INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI
Negativo
Nella finestra di lettura appare 1 sola banda colorata nella zona “C” della finestra di lettura. Questa è la banda di controllo,
che garantisce il corretto funzionamento del test.
Positivo
Appaiono 2 bande colorate: una nella zona “T”, e una nella zona “C” della finestra di lettura. L’intensità della colorazione
della banda nella zona “T” è proporzionale alla concentrazione dell’antigene nel campione.
Non Valido
Nessuna banda appare nella zona controllo. In nessun caso un campione deve essere identificato come positivo se non si ha
la formazione della banda di controllo. Se la banda di controllo non si forma, il test non è valido e deve essere ripetuto.
AVVERTENZE
• Per uso diagnostico in vitro.
• Solo per uso professionale.
• I campioni di feci possono essere potenzialmente infettivi. Devono essere stabiliti metodi appropriati per la
manipolazione e per la conservazione.
• Come per tutti i test diagnostici, una diagnosi clinica definitiva non può basarsi sul risultato di un singolo test, ma deve
essere confermata da ulteriori analisi.
• I componenti di questo I.v.D. sono sempre stati testati tra loro senza verificarne la compatibilità con componenti prodotti
da altri fabbricanti. Pur non escludendo la possibilità che i componenti in questione possano essere usati con componenti di
medesima formulazione ma prodotti da altre Aziende, non si ha un’evidenza sperimentale di tale compatibilità.
• Il dispositivo deve essere utilizzato esclusivamente da personale addestrato ad effettuare test clinici.
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Produttore: Mascia Brunelli Spa,
CONFEZIONI
HEPY ® - STOOL CARD 19VT82000 10 test
HEPY ® - STOOL CARD 19VT82001 50 test
BIBLIOGRAFIA
1. 1992 – Isolation of H. pylori from human feces (1992) – Thomas J. E., Gibson G. R., Darboe M. K., Eaver L.T.
2. 1993 – Isolation of H. pylori in feces from gastritis patients – Mapstone N. P., Lynch D. A., Lewis F. A.
3. 1993 – Identification of H. pylori in feces from gastritis patients – Mapstone N. P., Lynch D. A., Lewis F. A.
4. 1993 – Detection of vacuolating toxin of H. pylori in human fecies – Lazzi I., Pezzella C., Caprioli A.
5. 1994 – Detection from feces of H. pylori infections in patients – van Zwet A. A., Thijs J. C., Kooistra-Smid A.
6. 1994 – Identification of H. pylori in gastric specimens, gastric juice, saliva and feces – Shimada T. Ogura
7. 1995 – Analysis of expression of CagA and VacA virulence factors in 43 strains of H. pylori reveals that clinical isolates
can be divided into two major types and that CagA is not necessary for expression of the vacuolating cytotoxin – Xiang
Z., Censini S., Bayeli P. F., Telford J. L., Figura N., Rappuoli R., Covacci A.; Infect. Immun.; 63 (1): 94-8
8. 1995 – Importance in diagnosis of gastritis of detection by PCR of the CagA gene in H. pylori strains isolated from
children – Husson M. O., Gottrand F., Vachee A., Dhaenens L., De La Salle E. M., Turck D., Houcke M., Leclerc H.; J.
Clin. Microbiol.; 33 (12): 3300-3
9. 1995 – L’infezione da H. pylori nel bambino. In: Helicobacter pylori – De Giacomo C.; Il Pensiero Scientifico Editore;
24-27 (1995)
10. 1995 – Meccanismi patogenici. In: L’infezione da Helicobacter pylori in età pediatrica – De Giacomo C., Zizzoli F.,
Luinetti O., Fiocca R.; 15-24
11. 1995 – Presence of H. pylori in the oral cavita, oesophagus, stomac and feces of patients with gastritis – Namavar F.
12. 1995 – Isolation of H. pylori from feces – Salai P., West A. P., Hawkey P. M., Axon A. T.
13. 1995 – Serologic detection of infection with CagA+ H. pylori strains – Cover T. L., Glupczynski Y., Lage A. P., Burette
A., Tummuru M. K., Perez-Perez G. I., Blaser M. J.; J. Clin. Microbiol.; 33 (6): 1496-500
14. 1995 – H. pylori and atrophic gastritis: importance of the CagA status – Kuipers E. J., Perez-Perez G. I., Meuwissen S.
G., Blaser M. J.; Natl. Cancer. Inst.; 87 (23): 1777-80
15. 1996 – Detection of H. pylori in human stools – J. Microb. Meth.; 27: 73-79
16. 1996 – Identification tiping of H. pylori from children – J. Physiol. Pharmacol.
17. 1996 – L’infezione da H. pylori in pediatria. In: La malattia ulceroso peptica – De Giacomo C., Mosby-Yearbook,
Doyma Italia, Milano
18. 1996 – A newly developed PCR assay of H. pylori in gastric biopsy, saliva, and feces. Evidence of high prevalence in
saliva supports oral transmission – Li C., Ha T., Fergusson D. A. Jr, Chi Ds., Zhao R., Patel N. R., Thomas
19. 1996 – Immune response to H. pylori antigens in patients with gastric cancer by ELISA – Int. J. Cancer.
20. 1997 – International update conference on H. pylori by the American Digestive Health Foundation’s
21. 1997 – Removal from human fecal samples through use of an aqueous two-phase system detection of H. pylori – J.
Microbiol. Meth.; 28: 159-67
22. 1997 – Usefulness of H. pylori detection from feces specimens of the patients with peptic ulcer – Kurrokawa M.,
Minamide M., Nukina M., Nakanishi H., Miki K., Tomita S., Tohodo A., Haruta T.
23. 1997 – Progress in diagnosis of infections brought on by H. pylori – Chmicla M., Lawnik M.
24. 1998 – Detection of H. pylori gene by means in feces – Watanabe T., Tomita S., Kudo M., Kurokawa M.
25. 1998 – Detection of H. pylori in stool specimens by PCR and antigen immunoassay – Makristathis A., Rotter, Pasching
E., Schutze K., Wimmer M., Hirschl A. M.
26. 1998 – Evaluation 13 C-Urea breath tests and PCR of stool samples to detect H. pylori in Bangladesh Children – J. Ped.
Gastroenterol.
27. 1998 – Guidelines for the management of H. pylori infection – Colin W. Howden, MD FACG and R. H. Hunt
28. 1999 – Detection of H. pylori CagA gene by PCR in fecal samples – Russo F., Leoci C., Notarnicola M., Di Matteo G.,
Caruso M. L., Pirelli M., Caradonna M., Morandi L., Di Leo A.
29. 1999 – Detection of H. pylori DNA in fecal samples from infected individuals – William A., Gramley A.
30. 1999 – Analysis of VacA, CagA, and IS605 genotypes and those determined by PCR amplification of DNA between
repetitive sequences of H. pylori strains isolated from patients with nonulcer dyspepsia or mucosa-associated lymphoid
tissue lymphoma – van Doorn N. E., Namavar F., van Doorn L. J., Durrani Z., Kuipers E. J., Vandenbroucke-Grauls C.
M.; J. Clin. Microbiol.; 37 (7): 2348-9
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