Diluizioni Spesso quando si preparano soluzioni ... - Emidio Albertini

Diluizioni
Spesso quando si preparano soluzioni in laboratorio è conveniente preparare una soluzione madre
o stock più concentrata e diluirla al momento dell'uso.
- In questo modo non sarà necessario pesare ogni volta la polvere, ma basterà diluire
opportunamente lo stock per ottenere la concentrazione voluta. La concentrazione dello stock può
essere indicata nel suo valore assoluto (es. 2.5 M) oppure in modo relativo alla concentrazione
d'uso, indicando quante volte lo stock è più concentrato della concentrazione d'uso. Ad es. 5X
(leggi: "5 per") vuol dire che lo stock è 5 volte più concentrato del necessario. Per arrivare alla
concentrazione corretta (1X) si dovrà diluire 5 volte, o 1:5.
Ad esempio, se una soluzione viene utilizzata a 1mM e si parte da uno stock 10mM, si può dire che
lo stock è 10X, cioè è 10 volte più concentrato. Lo stock andrà quindi diluito 1:10. Questo vuol dire
prendere 1 parte della soluzione di partenza e per 10 parti di volume finale, ovvero 1 parte di
iniziale più 9 di solvente (NON 1 parte di stock + 10 di solvente!!!).
Diluizioni seriali (scalari): sono diluizioni fatte in serie, si parte da una soluzione iniziale e la si
diluisce poi da questa si prende una parte e la si diluisce ulteriormente, e così via fino a formare una
serie di diluizioni. Ad es. posso fare diluizioni seriali 1:10, 1:5, 1:2...
Quando le diluizioni seriali vengono fatte diluendo sempre una parte della soluzione precedente in 2
parti di soluzione totale (1 parte di soluzione + 1 parte di solvente) vengono dette diluizioni al
raddoppio.
Esempi:
diluizione seriale 1:10
N° Diluizione
1 Indiluita
2 1:10 preparata facendo una diluizione 1:10 dalla provetta 1
3 1:100 preparata facendo una diluizione 1:10 dalla provetta 2
4 1:1000 preparata facendo una diluizione 1:10 dalla provetta 3
5 1:10000 preparata facendo una diluizione 1:10 dalla provetta 4
6 1:100000 preparata facendo una diluizione 1:10 dalla provetta 5
Una formula comunemente usata è la seguente:
Vi x Ci = Vf x Cf
con :
Vi = volume iniziale
Ci = concentrazione iniziale
Vf = volume finale
Cf = concentrazione finale
In questo caso, conoscendo tre dei quattro parametri, è possibile ricavare il quarto.
Ad esempio, vogliamo ottenere 100 ml di una soluzione 50 mM a partire da una soluzione stock
1M. Quanto stock dobbiamo usare?
Conosciamo Ci = 1M = 1000 mM, Cf = 50 mM e Vf = 100 ml

Notare che è importante utilizzare unità di misura coerenti. Ad esempio si devono esprimere i valori o tutti in l o tutti in
ml.
Troviamo Vi = Vf * Cf / Ci = 100 * 50 / 1000 = 5 ml
Dovremo quindi prendere 5 ml di stock e portarli a 100 ml di volume finale aggiungendo 95 ml di
H2O (o dell'opportuno solvente).
E' possibile applicare questa formula anche nel caso in cui le concentrazioni siano espresse in altro
modo, ad es. X (per), N (normale) o anche %v o %m.
Abbiamo una madre di NaCl 2M e 1 ml di un'altra soluzione, la concentrazione finale di NaCl nella
soluzione finale deve essere 0.5M. La concentrazione finale è 1/4 della concentrazione iniziale:
procedendo normalmente, si prenderebbero 250 ul e si userebbe l'acqua per diluirli fino ad arrivare
ad 1 ml. Mettendo però 250 ul in una provetta che già contiene 1 ml di soluzione si arriva al volume
finale di 1.25 ml, con la conseguenza che la concentrazione finale di NaCl in soluzione non sarebbe
0.5M ma 0.4M (infatti 250ul * 2M / 1250ul = 0.4M)