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Infezioni del
Sistema Nervoso:
diagnostica microbiologica
Giovanni Di Bonaventura, PhD
Università “G. d’Annunzio”
Chieti-Pescara

Sistema nervoso
Organizzazione
• Sistema Nervoso Centrale (SNC): encefalo e
midollo spinale
• Sistema Nervoso Periferico (SNP): nervi periferici
• Fisiologicamente sterile:
– assenza di flora “autoctona”
• Difese naturali del SN:
– cranio e vertebre
– cellule di microglia e macrofagi
– presenza di una Barriera Emato-Encefalica (BEE) e
della Barriera Emato-fluido cerebrospinale (BECS)
che impediscono l’accesso cerebrale/meningeo a:
• microrganismi
• farmaci (es. antibiotici)
• sistema immune

Sistema Nervoso
Infezioni
• Infezioni del SNC:
– Meningiti (acute o croniche)
– Encefaliti (acute o croniche)
– Ascessi cerebrali
• Infezioni del SNP:
– Tetano
– Sindrome Guillian-Barrè
– Botulismo

Meningi
Struttura ed organizzazione
• 3 membrane connettivali
(nell’insieme costituiscono la barriera
emato-encefalica) a rivestimento del
cervello e della colonna vertebrale:
– Dura madre
• doppio strato: il primo a contatto con il
periostio; l’altro, a contatto con le
meningi (decorre attraverso il foramen
magnum, copre CN’s)
– Aracnoide
• tesa a ponte sopra i solchi cerebrali
• granulazioni aracnoidali che si
proiettano nei seni venosi, (dove il
liquor diffonde verso il torrente
ematico)
• spazio subaracnoidale occupato dal
liquor cefalo-rachidiano
– Pia madre
• delicata, altamente vascolarizzata
• a contatto con il cervello e la colonna
vertebrale

Meningi
Spazi meningei
Con il rachide, le meningi delimitano tre spazi:
vertebra < spazio EPIDURALE < dura madre
dura madre < spazio SUBDURALE < aracnoide
aracnoide < spazio SUBARACNOIDALE < pia madre (contiene il liquor; sede
specifica di esordio della meningite)
Ciascuno di questi spazi è sede di infezioni distinte

I villi estremamente vascolarizzati della
pia madre si proiettano in 4 ventricoli
all’interno dell’encefalo e sono rivestiti
da cellule epiteliali ependimali.
Queste proiezioni, note come plessi
coronoidei, sono i siti nei quali la
componente fluida del sangue è
modificata attraverso secrezione e
assorbimento di certi soluti e
convogliata all’interno dei ventricoli
sotto forma di liquido
cefalorachidiano (LCR) o liquor
(adulti: 400-600 ml/die; volume totale:
40-60 ml nei neonati e 100-160 ml negli
adulti).
Il liquor circola nei ventricoli e nello
spazio subaracnoidale, attorno
all’encefalo ed alla corda spinale e
ritorna al sistema circolatorio sanguigno
attraverso i villi subaracnoidali che
proiettano nel seno sagittale superiore
nella volta interna del cranio.

Meningite:
definizione e tipologia
Definizione
La meningite è definita come l’infiammazione delle meningi: pachimeningite
(dura madre), leptomeningite (pia madre, aracnoide). Se severa, può evolvere in
encefalite, stato infiammatorio del cervello. Può essere causata da agenti infettivi,
metastasi, agenti chimici e/o farmaci.
Tipologia
FULMINANTE: evoluzione rapida (coma, shock), quasi sempre irreversibile.
ACUTA: esordio e sviluppo nel corso di ore o di pochi giorni.
SUBACUTA: decorso lento e insidioso, con segni meningei sfumati (solitamente
causata da bacillo tubercolare oppure da miceti).
RICORRENTE: ripetuti episodi anche a distanza che sono espressione
generalmente di un difetto dell'ospite, o dell'anatomia locale oppure delle difese
antibatteriche immunologiche (trauma cranico, pazienti HIV+, ecc).
DECAPITATA: forma il cui decorso è attenuato per il precoce intervento con
terapia antibiotica (N. meningitidis; alta frequenza di falsi negativi al colturale).

Meningite
patogenesi
I microrganismi debbono superare la barriera morfo-funzionale (emato-liquorale,
emato-encefalica, meningo-encefalica) posta a protezione di LCR e SNC:
– via ematogena (batteriemia, viremia): la più frequente
– per contiguità:
• da focolai infettivi parameningei (otiti, sinusiti, mastoiditi, ascessi cerebrali) attraverso la
lamina cribrosa etmoidea, la guaina olfattoria, plessi corioidei, i vasi ematici/linfatici;
• comunicazioni anomale post-chirurgiche e traumatiche fra gli spazi subaracnoidali e siti
colonizzati (naso e seni paranasali, secondaria a frattura della base cranica);
• drenaggio di LCR;
– per contagio diretto: rachicentesi, ferite penetranti, traumi cerebrali aperti, fratture,
interventi neurochirurgici
Site all’interfaccia tra circolo sistemico e parenchima cerebrale, le leptomeningi - ed in
particolare gli spazi di Virchow-Robin - rappresentano il principale sito di
ingresso dei microrganismi.
Il liquor è veicolo di diffusione dell’infezione che, se non contrastata, si estende al
parenchima cerebrale (meningo-encefaliti).
Le forme PRIMARIE, si sviluppano in assenza di infezioni extra-cerebrali.
Nelle forme SECONDARIE, l’infezione diffonde per contiguità dai foci infettivi
parameningei, o per metastasi da foci situati a distanza (tifo, polmonite,tubercolosi).

Photomicrograph (original magnification, x20; hematoxylin-eosin stain) of a
coronal section through the anterior perforated substance shows two arteries
(straight arrows) with surrounding VR spaces (curved arrows).

Meningite batterica: patogenesi
Fimbrie (pili)
Capsula
Proteasi vs IgA
(pneumococco)
Endocitosi (menigococco)
Rottura tight-junctions epitelio
colonnare (H. influenzae)
Recettori specifici (H.
influenzae, N. meningitidis)
Fimbrie (pili)
Associazione con
monociti
Capsula
Epitelio mucosale
IgA seceretorie
Attività ciliare
Abs anti-capsulari
Complemento
Abs specifici
BEE
ridotti livelli di fagociti e IgG
ridotta attività opsonizzante

Meningite batterica: patogenesi

Meningite
eziologia
• Le meningiti batteriche vengono indicate con il termine “meningiti
purulente” (a liquor purulento)
• Le meningiti non batteriche, ad esempio quelle virali, vengono
indicate come “meningiti asettiche” (a liquor trasparente)
– Il liquor risulta trasparente anche in caso di infezione da M. tuberculosis, Funghi,
Leptospira
• La causa più frequente di meningite è una infezione virale che
generalmente si risolve in assenza di trattamento.
• Le meningiti batteriche sono meno frequenti ed estremamente più
gravi (vs virali); possono causare exitus o danno cerebrale anche in
presenza di trattamento.
• Altri agenti eziologici: parassiti, Chlamydia spp, Mycoplasma spp,
Spirochete, Rickettsiae.

Meningite batterica
epidemiologia
Incidenza: 1 milione di casi/anno (mondo); 3-12 casi/100.000 persone/anno (Italia)
Mortalità: 5% negli adolescenti, 25% nei neonati e negli adulti
Fattori di rischio: età, gravidanza, ambienti comunitari, immunocompromissione
Trattamento disponibile: terapia antibiotica (“mirata” vs l’agente eziologico)
Reservoir: uomo
Eziologia: dipendente dall’età del paziente; tuttavia, le meningiti pneumococciche sono le più
comuni (6.000 casi/anno) ed associate al più alto tasso di mortalità (20-30%):
1. neonati (< 1 mese):
bacilli Gram-negativi (E. coli K1) (50-60%)
streptococchi gruppo B (Streptococcus agalactiae) (20-40%)
Listeria monocytogenes (2-10%)
2. bambini e ragazzi fino a 15 anni:
Neisseria meningitidis (25-40%; max incidenza nel 1°anno di vita)
Streptococcus pneumoniae (10-20%)
Haemophilus influenzae tipo b (25-40%; in declino, per vaccinazione)
3. adulti (anziani, immunocompromessi):
Streptococcus pneumoniae (30-50%)
Neisseria meningitidis (10-35%) (causa principale di fenomeni epidemici)
Staphylococcus aureus (5-15%)
bacilli Gram-negativi (anziani) (1-10%)
Meningite da anaerobi: associata a foci contigui di infezione (otite, sinusite, faringite, ascesso
cerebrale, tumori testa/collo, interventi chirurgici o ferite infette, post-trauma, post-operatorio
neurochirurgico).

A
B
C F
D
E
Principali agenti eziologici di
meningite batterica:
A. Escherichia coli K1
B. Streptococcus agalactiae
C. Listeria monocytogenes
D. Neisseria meningitidis
E. Haemophilus influenzae
F. Streptococcus pneumoniae

Meningiti virali (“asettiche”)
• Decorso meno grave della meningite batterica: benigno a
risoluzione spontanea
• Sindrome caratterizzata da comparsa acuta di sintomi
meningei (febbre, cefalea, fotofobia) ma senza rigidità nucale
• La meningite asettica può avere varia eziologia, sebbene più
frequentemente causata da un agente virale:
– M. tuberculosis
– Funghi
– Leptospira
• Aspetto del liquor: trasparente, mai purulento
• Cellularità del liquor: pleiocitosi (inizialmente mista neutrofilomononucleare,
quindi linfomonocitica)

Meningite virale
epidemiologia
Incidenza: 1 milione di casi/anno (mondo); 5-35 casi/100.000 persone/anno (Italia)
Mortalità: decorso meno grave della meningite batterica: benigno a risoluzione
spontanea
Fattori di rischio: età, gravidanza, ambienti comunitari, immunocompromissione
Trasmissione: principalmente interpersonale, ma anche vettori animati (artropodi) per
Arbovirus.
Incubazione: Variabile: 3-6 gg (Enterovirus), 2-15 giorni (Arbovirus)
Trattamento disponibile: generalmente ad autorisoluzione.
Reservoir: uomo (Enterovirus, Adenovirus, Morbillivirus, Herpes Simplex, Varicella) o
naturale (uccelli per Arbovirus)
Eziologia: le meningiti da Enterovirus sono le più comuni (85%):
Enterovirus (Poliovirus, Coxsackievirus, Echovirus)
Herpesvirus (HSV 1/2, Varicella-zoster, Epstein Barr, ytomegalovirus).
Togavirus (Eastern equine, Western equine, Venezuelan equine; St. Louis,
Powasson, California, West Nile)
Mixo/paramyxovirus (Influenza/parainfluenza, Parotite, Morbillo)
Miscellaneous (Adenovirus, LCM, Rabbia, HIV)

Meningite virale
epidemiologia
Gli Enterovirus rappresentano la forma più frequente di
meningite asettica stagionale

Meningite virale: patogenesi
Sede
intracellulare
Colonizzazione
mucosa nasale
viremia
nervi
olfattivi
BEE
Sopravvivenza
nel SNC
• Fattori virali:
– Dimensione inoculo
– Virulenza del
microrganismo
– Neurotropismo
(rabbia, HSV tipo I)

Infezioni del SNC
Meningite: diagnosi clinica
Insieme di segni/sintomi presenti indipendentemente dalla
natura eziologica dell’infezione:

Infezioni del SNC
Meningite: diagnosi di laboratorio
• Il sistema nervoso attua strategie atte a limitare l’infiammazione, perché i suoi
effetti potrebbero essere più deleteri dell’agente patogeno che l’ha innescata.
• Le infezioni del SNC, la meningite in particolar modo, rappresentano una vera
emergenza medica. Debbono quindi essere:
– riconosciute tempestivamente
– correlate, possibilmente, con l’agente patogeno
– trattate immediatamente sulla base della eziologia
• Il maggior contributo alla diagnosi eziologica è sicuramente dato dallo
studio microbiologico del LCR. L’esame microbiologico si basa sulla ricerca
diretta dell’agente infettivo (esame microscopico, ricerca di antigeni
batterici/fungini, amplificazione genica), sugli esami colturali del liquor che
vanno di norma associati alla contemporanea esecuzione dell’emocoltura ed
alla ricerca della risposta anticorpale antimicrobica.
• Il sospetto di meningite richiede quindi il prelievo di LCR mediante esecuzione
della puntura lombare, anche in presenza di sintomatologia sfumata.
• L’analisi di base del LCR si effettua in urgenza ed il laboratorio svolge
un ruolo fondamentale.

Analisi del liquor cefalorachidiano
Percorsi pre-analitici
• LCR è un materiale biologico molto prezioso: il prelievo, l’utilizzo
e la sua conservazione debbono essere previamente ed
accuratamente concordati tra il Clinico ed il Laboratorio per fare in
modo che le procedure analitiche abbiano inizio immediatamente
dopo il prelievo del campione.
• La raccolta andrebbe effettuata, quando possibile, prima dell’inizio
della terapia antibiotica poiché essa:
– modifica il significato diagnostico di varie tecniche
– interferisce con l’isolamento colturale: false negatività
In caso contrario, bisogna avvertire il Laboratorio affinchè si
possano mettere in atto procedimenti in grado di minimizzare gli
effetti inibitori sui microrganismi (resine che rimuovono gli antibiotici,
aumento dei volumi colturali e di liquor per diluire l’effetto inibente)
• E’ necessario segnalare la sede di prelievo (lombare,
ventricolare, cistico), poiché i valori di riferimento sono, di norma,
attribuiti al liquor lombare.

Prelievo di LCR
puntura lombare (rachicentesi)
• Operare in asepsi: accurata disinfezione della
cute nella regione di prelievo
• Il paziente viene invitato a sdraiarsi su un fianco
incurvandosi in avanti per separare i processi
spinosi delle vertebre lombari
• Inserimento ago nel canale spinale generalmente
tra L3-L4, ma anche L4-L5 o L5-S1
• Il liquor può anche essere ottenuto dal ventricolo,
cisterna o fontanelle, o dal drenaggio di riserva
• Prelievo LCR (pressione > 600 mm Hg:
fuoriuscita “spontanea”)

Diagnosi di meningite
... in assenza di LCR
La puntura lombare non è esente da rischi: la complicanza più temuta è
‘l’incuneamento’, che si verifica quando le tonsille cerebellari erniano attraverso
il foramen magnum del cranio, comprimendo le strutture cerebrali vitali del
peduncolo. Ciò accade più facilmente in presenza di lesioni cerebrali espanse o
di pressione intracranica aumentata.
Pertanto i pazienti con sospetto clinico di pressione intracranica aumentata non
dovrebbero essere sottoposti a puntura lombare e quelli con segni neurologici di
lesioni localizzate dovrebbero essere sottoposti a TC prima di altre procedure
volte ad escludere una lesione.
Talvolta il paziente è in condizioni troppo instabili o presenta diatesi emorragica
come risultato di una sindrome settica ed in queste condizioni non può essere
sottoposto a puntura lombare.
Nei pazienti con controindicazione alla puntura lombare, si deve conseguire il
massimo impegno per definire la diagnosi microbiologica con ogni altra
modalità:
Urine (antigeni batterici)
Markers infiammatori sierici: aumentatati livelli di procalcitonina (>=0.5 ng/ml) e
proteina C reattiva (>=20 mg/l) depongono a favore di una eziologia batterica

Analisi del LCR
Percorsi pre-analitici: raccolta del campione
• Standardizzare il volume da prelevare:
– in generale 6 ml (2 ml/provetta), ma almeno 1 ml;
– raccolta in provette sterili con tappo a vite (siliconate, per evitare l’adesione dei
monociti alle pareti), numerando i campioni in maniera progressiva
– possibilità di confrontare diversi prelievi (intra- inter-paziente)
– volumi maggiori o campioni ripetuti per ricerca di M. tuberculosis o funghi
• Evitare la contaminazione ematica (principale causa di errore pre-analitico)
– generalmente secondaria al trauma da puntura lombare (diminuzione tracce
ematiche dal 1 o al 3 o campione)
– il 3°campione è destinato al colturale (meno sogge tto a contaminazioni cutanee)
– non processare il campione in presenza di massiccia contaminazione ematica
(presenza di inibitori di crescita batterica e/o PCR)
• Prelevare contestualmente anche campioni di sangue per:
– indagini biochimiche e sierologiche (emocromo per leucocitosi neutrofila)
– emocoltura per ricerca di funghi/batteri indicanti una sottostante infezione sistemica
• Seminare, al momento stesso del prelievo, parte del liquor in 2 flaconi
(aerobi e anaerobi) per emocoltura

Analisi del LCR
Percorsi pre-analitici: trasporto del campione
• Inserire i campioni in un contenitore di plastica chiuso (trasporto in
“sicurezza biologica”)
• Inviare i campioni in laboratorio entro 15-30 min (max 2 h) dal
prelievo:
– ipotonicità del liquor causa la lisi dei neutrofili
– diminuzione della vitalità batterica: 32% dopo 1 h, 50% dopo 24 h
• Trasportare a temperatura ambiente, evitando la refrigerazione:
– N. meningitidis, H. influenzae, S. pneumoniae sono organismi “esigenti” che non
potrebbero sopravvivere a lunghi tempi di trasporto od a variazioni di temperatura
(microrganismi termosensibili)
– è consigliabile congelare il campione, residuo dalla esecuzione dell’esame colturale
e microscopico, per indagini successive (ricerca virus, mediante PCR)
– trasporto in contenitori privi di ossigeno per la ricerca/coltura di anaerobi (utilizzo
del flacone emocolturale per “anaerobi”)

Analisi del LCR
Fase analitica: esame chimico-fisico
L’esame chimico-fisico viene effettuato previa centrifugazione e rimozione del
surnatante, poiché le cellule - lisandosi con il tempo - libererebbero il loro
contenuto proteico in sospensione:
• [glucosio]: ↓ (ipoglicorrachia), ↑ (iperglicorrachia)
– [glucosio] liquor / [glucosio] sangue (soggetto sano = 0.45)
• [proteine]: ↓ (ipoprotidorrachia), ↑ (iperprotidorrachia)
• ↑ Proteina C-reattiva, LDH, e neopterina (infezioni batteriche)
• Conta cellulare: leucociti (mononucleati, neutrofili, etc.)
• [LDH] liquor, ↑ LDH (infezioni batteriche)
• Esame del sedimento: previa colorazione con May-Grunwald-Giemsa per lo
studio delle caratteristiche morfologiche e strutturali.

LCR: caratteri chimico-fisici e cellulari
Parametro
(valore fisiologico)
Pressione
( 1000 < 1000 < 500
> 80% 1-50% 1-50%
< 45 45-85 < 45
> 200 < 200 > 200
> 30
Gram + - -
Citologia - - +
Aspetto
(limpido)
purulento limpido limpido/smerigliato

Meningite batterica
diagnosi microbiologica

Meningite batterica vs virale
Caratteristiche macroscopiche del LCR
ASPETTO:
Limpidezza: limpido (“acqua di roccia”), opalescente, torbido
Colore: incolore, xantocromico (giallo-arancio: ricco di proteine),
eritrocromico (contaminazione, lesione subaracnoidea)
Sulla base dell’aspetto del liquor, le meningiti sono classificate in:
meningiti a liquor limpido (opalescente ma mai purulento,
smerigliato per pleiocitosi). Eziologia prevalentemente virale,
ma anche batterica o protozoaria:
↓ glicorrachia (tubercolare, Brucella, Salmonella, Leptospira,
Listeria)
↑glicorrachia (o normale): virale, Rickettsiae, Chlamydia,
Toxoplasma, Trypanosoma
meningiti a liquor torbido (purulento, fuoriesce ad alta
pressione). Indicativo di eziologia batterica:
↑ protidorrachia, ↑ neutrofili, ↓ glicorrachia): batteri,
miceti/muffe (Candida, Mucor), protozoi (Naegleria,
Acanthamoeba)

Meningite batterica
diagnosi microbiologica
Aspetto:
- grado di torbidità, ed eventuale presenza di coagulo (coagulo “a ragnatela” nella
meningite tubercolare)
- colore surnatante, a seguito di centrifugazione
Esame microscopico:
– totale: leucociti (GB) + eritrociti (GR)
– differenziazione leucociti polimorfonucleati (PMN) vs leucociti mononucleati,
eseguita su conteggio > di 5x106 GB/l.
– conteggio totale GR (eseguita su due campioni, in caso di sospetta emorragia)
– Colorazione
• Gram (diplococchi Gram- : N. meningitidis; diplococchi Gram+: S. pneumoniae; coccobacilli Gram-: H.
influenzae)
• blu di metilene (morfologia)
• inchiostro di china (C. neoformans)
• Ziehl-Nielsen (micobatteri)
Esame colturale, sul sedimento, per ricerca di:
– N. meningitidis, H. influenzae,S. pneumoniae, stafilococchi,
– ricerche particolari: miceti (C. neoformans), M. tuberculosis, amebe

Meningite batterica
diagnosi microbiologica
Ricerca di antigeni batterici
Costosi e di controversa affidabilità, tali tests dovrebbero essere utilizzati su LCR SOLO in caso di
conteggi anomali di cellule (immunodeficienza con deficit GB), di esame negativo al Gram e
quando LCR e le emocolture permangono negative per oltre 48 ore (pregressa antibioticoterapia).
Il Clinico deve essere informato che sebbene una positività al lattice possa indicare la presenza di un
agente infettivo, un risultato negativo non può considerarsi “finale”.
a) Tests al lattice: consentono la diagnosi eziologia in quanto i batteri che comunemente causano
meningite presentano sulla loro superficie antigeni di natura polisaccaridica che possono essere
rilevati dal latex test. Vengono ricercati gli antigeni solubili polisaccaridici specifici di:
– Streptococcus pneumoniae;
– Haemophilus Influenzae di tipo b;
– Neisseria meningitidis (gruppi A, B, C, Y/W135);
– Esherichia coli (gruppo K1);
– Streptococcus agalactiae (streptococco beta-emolitico di gruppo B).
b) Test immunocromatografico: utile per la ricerca dell’antigene solubile di S. pneumoniae nel
liquor o nelle urine.
Amplificazione genica (PCR) su sangue e liquor: utilizzata per la ricerca diretta di batteri
(Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae, Listeria
monocytogenes ) e virus.

Meningite
diagnosi di laboratorio: ricerca diretta
Colonie di N. meningitidi su
agar cioccolato (le colonie
appaiono viola al test
dell’ossidasi)
PCR amplification of 419bp of protein
b gene of M. tuberculosis on 1.5%
agarose gel. Lane 1: 100bp DNA
marker, lane 2: Positive control, lane
3,4,5: Positive CSF samples and lane
5: Negative control.
(Sharma et al, Neurol India 2010)

Costi e tempi delle analisi liquorali
Test Tempo Costo (euro)
Glucosio

Esame LCR
refertazione
• ASPETTO: aspetto del LCR ed (eventuale) presenza di coaguli
• MICROSCOPIA
• Conteggio cellulare
– numero di GR (x10 6 per litro) e
– numero di PMN e linfociti (x 10 6 per litro), oppure
– numero di PMN e linfociti (% conteggio totale dei GB, riferito a x 106 – numero di PMN e linfociti (% conteggio totale dei GB, riferito a x 10 )
– in alcuni casi può essere opportuno fare riferimento al citocentrifugato per la
differenziazione delle cellule mononucleate e delle altre cellule
• Colorazione Gram
– descrizione del(dei) microrganismo(i) osservato(i)
– inchiostro d’India o nigrosin
– descrizione dei funghi dotati o meno di capsula
– microscopia per specie Mycobacterium e parassiti
• COLTURALE
– descrizione microrganismi isolati, oppure
– indicazione di assenza di crescita
– risultati delle prove supplementari

Meningite a LCR “limpido”
diagnosi microbiologica

Meningiti fungine
• Rare e di difficile diagnosi
• Cryptococcus neoformans (causa più frequente), Coccidioides immitis
(Messico, America meridionale)
• Invade il sangue e raggiunge il cervello soprattutto nell’ospite con immunità
cellulo-mediata compromessa (AIDS; immunosoppressi)
• Quadro liquorale: pleiocitosi linfocitaria, aumento quoziente albumina
• Identificazione mediante colorazione della capsula (India ink): solo per C.
neoformans
• Isolamento colturale
• E’ raccomandabile l’utilizzo di volumi maggiori di liquor (almeno 4 ml) per
l’allestimento del vetrino e per la coltura
• Ricerca di antigeni + ricerca anticorpale nel LCR per monitorare l’efficacia
della terapia:
– aumentati livelli di Abs specifici + ridotta presenza di antigeni = terapia efficace
• Ricerca di materiale genico: PCR, non ancora standardizzata

Meningite criptococcica:
sedimento liquorale colorato
con inchiostro di China
Round
capsulated
fungal organisms
Lymphocytic
infiltrate around
C. neoformans su agar sangue: colonie
didimensioni piccole/medie, con aspetto
mucoide dovuto alla produzione di una
capsula polisaccaridica.

Meningite da protozoi
• Le amebe (Naegleria, Acantameba) possono moltiplicarsi in acque
stagnanti nei Paesi tropicali (scarichi fognari).
• Se inalate, raggiungono le meningi attraverso il nervo olfattivo e la
lamina cribrosa etmoidea
• Diagnosi: osservazione microscopica per evidenziare caratteristica
motilità ameboide
Meningite amebica: sedimento liquorale
con trofozoiti di Naegleria fowleri

Meningite virale
Rhabdovirus
• Rabdovirus: virus a RNA, singolo filamento
• Infezione virale contratta dal morso di un animale
(cani, volpi, sciacalli) rabbico
• Virus migra dal sito di inoculo verso il cervello
tramite vie nervose
• Periodo di incubazione variabile (4-13 settimane
nell’uomo)
• Malattia zoonotica fatale:
febbre, confusione, ansietà, encefalti, morte

Meningite virale
Rhabdovirus: diagnosi di laboratorio
Cervello rabbico: colorazione
ematossilina-eosina. Indicati,
i Corpi del Negri.
• Campioni clinici: strisci corneali, biopsie
cerebrali, biopsie cutanee
• Ricerca di antigeni virali in IF o tramite
PCR
• Rilievo microscopico di cellule neuronali
cerebrali contenenti i corpi del Negri
(inclusioni intracitoplasmatiche)
Cervello rabbico: colorazione IF (in
alto); campione negativo (in basso)

Diagnosi microbiologica di meningite
Esami microbiologici effettuabili
Sospetto clinico Esame effetuabile Campione biologico Note
Meningite batterica Esame diretto e colturale per
batteri
Ricerca antigeni batterici mediante
test di agglutinazione
Ricerca antigene S. pneumoniae
(immunocromatografia)
Ricerca di DNA batterico mediante
PCR
Meningite fungina Esame diretto e colturale per miceti
(lieviti e muffe)
Ricerca antigeni C. neoformans
(test al lattice)
Meningite tubercolare Esame diretto e colturale per M.
tuberculosis
Ricerca di M. tuberculosis
mediante amplificazione
Liquor (almeno 1 ml)
Trasportare immediatamente
Mantenimento: RT < 2 h
Liquor (0.5-1 ml)
Trasportare immediatamente
Mantenimento: 4°C < 12 h
Liquor (0.5 ml)
Mantenimento: RT

Diagnosi microbiologica di meningite
Esami microbiologici effettuabili
Sospetto clinico Esame effettuabile Campione biologico Note
Meningite virale Ricerca DNA virus erpetici (CMV,
ENV, VZV, HSV1, HSV2)
mediante PCR
Ricerca DNA poliomavirus (JCV,
BKV) mediante PCR
Ricerca anticorpi anti-virus
neurotropi (Morbillo, Varicella,
Parotite, CMV, EBV, HSV1, HSV2)
Esame colturale per HSV1, HSV2,
CMV
Liquor (almeno 1 ml)
Mantenimento: