Diapositiva 1 - Medicina e Chirurgia - Università degli Studi di Firenze

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In questa fase lo studio è stato focalizzato sulla sequenza stessa del promotore: la rilevazione di mutazioni puntiformi o piccoli delezioni in tale regione, infatti, potrebbe spiegare l’aumentata espressione della proteina nei tumori. A tal scopo sono stati sottoposti ad analisi DHPLC campioni di tumore del colon e neuroblastomi (questi ultimi esprimono, come è noto dalla letteratura altissimi livelli di LMW-PTP). La tecnica DHPLC (Denaturing High Performance Liquid Chromatography) permette di discriminare all’interno di prodotti eterogenei di PCR, molecole di DNA eteroduplex rispetto alle molecole omoduplex: questo si verifica in condizioni di parziale denaturazione delle molecole e sotto stretto controllo della temperatura.
Estrazione del DNA dai campioni tumorali di colon e da neuroblastomi Amplificazione in PCR di tre frammenti del promotore Analisi DHPLC dei prodotti di PCR Valutazione dei cromatogrammi
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