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BIOENERGETICA - dispa

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<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

LA <strong>BIOENERGETICA</strong> STUDIA<br />

LATRASFORMAZIONE DELLA<br />

ENERGIA DI OSSIDO-RIDUZIONE<br />

IN ENERGIA CHIMICA SOTTO<br />

FORMA DI ATP<br />

FOSFORILAZIONE<br />

OSSIDATIVA<br />

RESPIRAZIONE<br />

CELLULARE


<strong>BIOENERGETICA</strong>


<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

TRASPORTO<br />

BIOSINTESI<br />

SEGNALAZIONE<br />

MOVIMENTO


<strong>BIOENERGETICA</strong>


<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

BASSA<br />

RESPIRAZIONE<br />

ALTA<br />

RESPIRAZIONE


RESPIRAZIONE CELLULARE<br />

RIDUZIONE DI<br />

O 2 AD H 2O<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

COMPLESSI LIPOPROTEICI<br />

DELLA MEMBRANA INTERNA<br />

MITOCONDRIALE (IMM)<br />

TRASPORTATORI MOBILI DI<br />

ELETTRONI NON ASSOCIATI A<br />

COMPLESSI LIPOPROTEICI DI<br />

MEMBRANA


<strong>BIOENERGETICA</strong>


COENZIMA Q<br />

L’ UBICHINONE (CoQ) TRASFERISCE<br />

ELETTRONI DAL NADH E FADH 2 AL<br />

COMPLESSO III. E’ FORTEMENTE<br />

MOBILE PER LA SUA IDROFOBICITA’<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


CITOCROMO C<br />

IL CITOCROMO C E’ UNA<br />

PROTEINA LIBERAMENTE<br />

DIFFUSIBILE SULLA<br />

SUPERFICIE ESTERNA DELLA<br />

MEMBRANA INTERNA DEL<br />

MITOCONDRIO<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


GRUPPO EME<br />

CITOCROMI<br />

NEL GRUPPO EME DEI<br />

CITOCROMI IL FERRO<br />

MODIFICA IL SUO<br />

NUMERO DI<br />

OSSIDAZIONE<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


NADH+H + / NAD +<br />

H<br />

N<br />

Ad<br />

O<br />

C<br />

NH2<br />

NAD +<br />

(oxidized form)<br />

+ H + + 2 e -<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

IL NADH E’ UN COENZIMA DI DEIDROGENASI<br />

MA ANCHE UN SUBSTRATO DIFFUSIBILE DA<br />

UN ENZIMA ALL’ ALTRO<br />

H H<br />

O<br />

C<br />

NH2<br />

N<br />

Ad<br />

NADH<br />

(reduced form)<br />

:


FMNH 2 / FMN<br />

H 3 C<br />

IL FMNH 2 E’ UN GRUPPO PROSTETICO<br />

FORTEMENTE LEGATO ALL’ ENZIMA<br />

N<br />

O<br />

H3 C N N<br />

CH 2<br />

( CHOH) 3<br />

NH<br />

O<br />

CH 2 OPO 3 2 -<br />

Flavin mononucleotide<br />

(FMN)<br />

2 H + + 2 e -<br />

H 3 C<br />

N<br />

O<br />

H3 C N N<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

H<br />

CH 2<br />

H<br />

( CHOH) 3<br />

NH<br />

O<br />

CH 2 OPO 3 2 -<br />

Dihydroflavin mononucleotide<br />

(FMNH 2 )


FADH 2 / FAD<br />

H 3 C<br />

IL FADH 2 E’ UN GRUPPO PROSTETICO<br />

FORTEMENTE LEGATO ALL’ ENZIMA<br />

N<br />

H3 C N N O<br />

Ad<br />

FAD<br />

O<br />

NH<br />

+ 2 H + + 2 e -<br />

H 3 C<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

H<br />

N<br />

H3 C N N O<br />

Ad<br />

FADH 2<br />

O<br />

H<br />

NH


<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

PROTEINE<br />

FERRO - ZOLFO


<strong>BIOENERGETICA</strong>


<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

NELLE OSSIDO-RIDUZIONI GLI<br />

ELETTRONI PASSANO DALLE SPECIE<br />

RIDUCENTI VERSO LE OSSIDANTI.<br />

NELLA CATENA RESPIRATORIA GLI<br />

ELETTRONI SI MUOVONO DAI<br />

COMPLESSI CON POTENZIALE REDOX<br />

NEGATIVO A QUELLI CON<br />

POTENZIALE REDOX POSITIVO


COMPLESSO I<br />

NADH-UBICHINONE<br />

OSSIDO-REDUTTASI<br />

MATRICE<br />

IL COMPLESSO I<br />

TRASFERISCE ELETTRONI<br />

DAL NADH AL CoQ<br />

MEMBRANA<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


NADH+ H +<br />

NAD +<br />

COMPLESSO I<br />

FMN/FMNH 2<br />

Fe - S<br />

CoQH 2<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

CoQ


<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

IL COMPLESSO II<br />

TRASFERISCE ELETTRONI<br />

DAL SUCCINATO AL CoQ<br />

COMPLESSO II<br />

SUCCINATO DEIDROGENASI


SUCCINATO<br />

FUMARATO<br />

COMPLESSO II<br />

FAD/FADH 2<br />

Fe - S<br />

CoQH 2<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

CoQ


E<br />

COMPLESSO I<br />

COMPLESSO II<br />

TRASFERISCONO<br />

ELETTRONI AL CoQ<br />

ALTRE DEIDROGENASI<br />

FAD-DIPENDENTI<br />

TRASFERISCONO<br />

ELETTRONI DAI LORO<br />

SUBSTRATI AL CoQ<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

COMPLESSO III<br />

CITOCROMO C REDUTTASI<br />

IL COMPLESSO III RICEVE ELETTRONI<br />

DAL CoQ E LI TRASFERISCE AL<br />

CITOCROMO C


P<br />

CoQH 2<br />

CoQ<br />

2H +<br />

COMPLESSO III<br />

CITOCROMI<br />

b c1<br />

Fe - S<br />

CITOCROMO C<br />

OX<br />

CITOCROMO C<br />

RED<br />

e -


COMPLESSO IV<br />

CITOCROMO OSSIDASI<br />

SETTORE CATALITICO<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

LA CITOCROMO<br />

OSSIDASI<br />

TRASFERISCE<br />

ELETTRONI DAL<br />

CITOCROMO C ALL’ O 2<br />

CON PRODUZIONE DI<br />

H 2O


CITOCROMO C<br />

CITOCROMO C<br />

OX<br />

RED<br />

M<br />

H 2O<br />

COMPLESSO IV<br />

CITOCROMI<br />

a a 3<br />

Cu + A Cu + B<br />

2H +<br />

1/2O 2


RENDIMENTO<br />

ENERGETICO<br />

NADH + H+ + ½ O 2<br />

~3 ATP<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

H 2O + NAD +<br />

ENERGIA


RENDIMENTO<br />

ENERGETICO<br />

FADH 2 + ½ O 2<br />

~2 ATP<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

H 2O + FAD<br />

ENERGIA


H<br />

INIBITORI DELLA CATENA<br />

RESPIRATORIA<br />

HN<br />

O<br />

O<br />

C NH<br />

O<br />

CH 3<br />

N O<br />

H<br />

Amobarbital<br />

OH<br />

H<br />

N<br />

O<br />

H3 C<br />

CH 3<br />

CH 3<br />

H 3 CO<br />

O CH 3<br />

O<br />

O<br />

O<br />

Antimycin A 1<br />

OCH 3<br />

H<br />

O<br />

O<br />

O<br />

H<br />

Rotenone<br />

O CH 3<br />

O CH 3<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

CH 3<br />

H<br />

O<br />

CH 3<br />

CH 2


INIBITORI DELLA CATENA<br />

RESPIRATORIA<br />

COMPLESSO I ROTENONE<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

COMPLESSO II ACIDO MALONICO<br />

COMPLESSO III ANTIMICINA<br />

COMPLESSO IV HCN, CO


FADH 2<br />

FADH 2<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

2 ATP<br />

1 ATP<br />

0 ATP


FOSFORILAZIONE<br />

OSSIDATIVA<br />

(SLATER)<br />

IPOTESI DELL’ INTERMEDIO CHIMICO<br />

(MITCHELL)<br />

ACCOPPIAMENTO CHEMIO-OSMOTICO<br />

(BOYER)<br />

IPOTESI CONFORMAZIONALE<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


(SLATER)<br />

IPOTESI DELL’ INTERMEDIO CHIMICO<br />

X~ P + ADP X + ATP<br />

UN COMPOSTO AD ALTA ENERGIA E’<br />

GENERATO DALLE REAZIONI DI<br />

OSSIDORIDUZIONE.<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


(MITCHELL)<br />

ACCOPPIAMENTO CHEMIO-OSMOTICO<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

LE REAZIONI DI OSSIDORIDUZIONE<br />

GENERANO UN GRADIENTE PROTONICO. IL<br />

GRADIENTE PROTONICO E’ L’ENERGIA<br />

UTILIZZATA PER PRODURRE ATP.


I GRADIENTI IONICI SONO LE<br />

FORME DI CONSERVAZIONE DELLA<br />

ENERGIA IN TUTTE LE CELLULE<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


TRASPORTO DI PROTONI<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

PROTONI VENGONO<br />

TRASFERITI DALLA<br />

MATRICE ALLO SPAZIO<br />

INTERMEMBRANA


TRASPORTO DI PROTONI<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

I COMPLESSI RESPIRATORI<br />

SVOLGONO DUE FUNZIONI:<br />

CATALIZZANO REAZIONI DI<br />

OSSIDO-RIDUZIONE<br />

TRASPORTANO PROTONI<br />

IL TRASPORTO DEI PROTONI AVVIENE<br />

CONTRO GRADIENTE ED E’ QUINDI UN<br />

TRASPORTO ATTIVO


I PROTONI SONO TRASFERITI<br />

CONTRO GRADIENTE NELLO<br />

SPAZIO INTERMEMBRANA<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

BASSA<br />

RESPIRAZIONE<br />

ALTA<br />

RESPIRAZIONE


GRADIENTE<br />

ELETTROCHIMICO<br />

P SIDE:<br />

SPAZIO<br />

INTERMEMBRANA<br />

N SIDE:<br />

SPAZIO MATRICE<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


ACCOPPIAMENTO<br />

CHEMIO-OSMOTICO<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

ATP SINTETASI<br />

STRUTTURA


ATP - SINTETASI<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


IDROLISI E SINTESI DI ATP SONO<br />

CATALIZZATE DALLO STESSO ENZIMA.<br />

L’ OLIGOMICINA INIBISCE AMBEDUE LE<br />

ATTIVITA’<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


(BOYER)<br />

IPOTESI CONFORMAZIONALE<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

I PROTONI DEL GRADIENTE ELETTROCHIMICO<br />

RIENTRANO ATTRAVERSO LA ATP – SINTETASI<br />

FACENDO RUOTARE I CENTRI CATALITICI. LA<br />

ROTAZIONE PRODUCE E LIBERA ATP


<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

ATP-SINTETASI<br />

LA ATP-SINTETASI<br />

SINTETIZZA ATP<br />

MEDIANTE LA<br />

ROTAZIONE DEI SUOI<br />

CENTRI CATALITICI<br />

CHE VIENE GENERATA<br />

DAL PASSAGGIO DEI<br />

PROTONI DEL<br />

GRADIENTE<br />

ELETTROCHIMICO<br />

L<br />

A


DISACCOPPIANTI<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

PROTONOFORI<br />

I PROTONOFORI<br />

RENDONO LA MEMBRANA<br />

PERMEABILE AI PROTONI<br />

( H + ). SONO ACIDI<br />

DEBOLI CON NATURA<br />

IDROFOBICA


PROTEINE<br />

DISACCOPPIANTI<br />

PRODUZIONE DI<br />

CALORE<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong>


REGOLAZIONE<br />

ELETTRODO<br />

A OSSIGENO<br />

% O 2<br />

NADH<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

ADP + Pi<br />

T (min)


REGOLAZIONE<br />

ELETTRODO<br />

A OSSIGENO<br />

% O 2<br />

NADH<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

DISACCOPPIANTE<br />

T (min)


REGOLAZIONE<br />

ELETTRODO<br />

A OSSIGENO<br />

% O 2<br />

NADH<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

ADP + Pi<br />

OLIGOMICINA<br />

( HCN )<br />

T (min)


REGOLAZIONE<br />

ELETTRODO<br />

A OSSIGENO<br />

% O 2<br />

NADH<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

ADP + Pi<br />

HCN<br />

DISACCOPPIANTE<br />

T (min)


REGOLAZIONE<br />

ELETTRODO<br />

A OSSIGENO<br />

% O 2<br />

NADH<br />

OLIGOMICINA<br />

<strong>BIOENERGETICA</strong><br />

ADP + Pi<br />

DISACCOPPIANTE<br />

T (min)

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