XXII CNIE - Accademia nazionale italiana di Entomologia

Sessione VIII - Biotecnologie entomologiche
PERMEABILIZZAZIONE E CRIOCONSERVAZIONE DELLE UOVA DEL
LEPIDOTTERO PIRALIDE GALLERIA MELLONELLA (L.)*
P.F. Roversi 1 , E. Cosi 2 , M.T. Abidalla 2 , D. Battaglia 2 & B. Baccetti 3
1CRA – Centro di Ricerca per l'Agrobiologia e la Pedologia, Laboratorio di Criobiologia
e Crioconservazione, Via Lanciola 12/A, 50125 Firenze.
E-mail: elena.cosi@isza.it
2 Dipartimento di Biologia e Biotecnologie, Università della Basilicata, Potenza.
3 Professore Emerito, Università di Siena, Siena.
Negli ultimi anni si è registrato un aumento degli studi di criobiologia allo scopo non
solo di chiarire aspetti fisiologici per specie che vivono in aree con periodi freddi o in
ambienti estremi, ma anche al fine di definire protocolli per la crioconservazione di
specie a rischio di estinzione o da utilizzare in programmi di controllo biologico. In tale
contesto rivestono un’importanza non trascurabile anche le indagini per testare la
resistenza a stress termici dei differenti stadi embrionali di ospiti di sostituzione utilizzati
per allevamenti di ooparassitoidi. Tra i Lepidotteri la “Tarma degli alveari”, Galleria
mellonella (L.), il cui habitat è caratterizzato da condizioni termiche costanti, è un
modello ampiamente utilizzato per studi di fisiologia ed endocrinologia correlati a
cambiamenti di temperatura. Il Piralide è inoltre impiegato diffusamente quale ospite di
sostituzione per allevamenti di microrganismi entomopatogeni e organismi entomofagi.
Le ricerche condotte hanno evidenziato la possibilità di stoccare a temperature ultrabasse
uova di G. mellonella deposte da 24 h decorionizzate con 1,25% ipoclorito di sodio e
0.04% Tween 80, trattate con agenti crioprotettivi, immerse in azoto liquido ed infine
poste in criocongelatori a -140°C. La percentuale di sopravvivenza é risultata pari all’1,6
± 0,5 % dopo la discesa termica in azoto e si e attestata allo 0,6 ± 0,2 % dopo lo
stoccaggio nei freezer. Le larve schiuse dalle uova del lepidottero crioconservate si sono
regolarmente sviluppate, permettendo di ottenere adulti fertili. Sex-ratio, fecondità e
tempi di sviluppo della progenie non sono risultati significativamente diversi dal ceppo
di partenza, permettendo di ricostituire una colonia di laboratorio. Ulteriori modifiche
del protocollo di decorionizzazione/permeabilizzazione sono state testate su stadi
embrionali sia precoci (24h) che tardivi (