Triglycerides - L - Gdsrl.com

Triglycerides - L
REF SA4815 00 - 6x45 ml
INTENDED USE
AMS Triglycerides - L is intended for the enzymatic colorimetric
quantitative in vitro determination of triglycerides in human serum and
plasma using the AMS Sat-450 Chemistry System.
SUMMARY
Triglycerides determination is used for the diagnosis and monitoring of
lipidic dysfunction for the evaluation risk of the atherosclerotic disease.
Recent studies have demonstrated that high levels of triglycerides,
accompanied to an increase of low density lipoproteins (LDL), constitute
a particular elevated risk for "coronary heart disease" (CHD). High
triglycerides concentrations are present in several kidney, liver and
pancreas diseases.
METHOD PRINCIPLE
Glycerol, released from triglycerides after hydrolysis with
lipoproteinlipase, is transformed by glycerolkinase into glycerol-3phosphate
which is oxidized by glycerolphaphate oxidase into
dihydroxyacetone phosphate and hydrogen peroxide. In presence of
peroxidase, the hydrogen peroxide oxidizes the chromogen ESPT (4aminophenazone/N-ethyl-methylanilin-propan-sulphonate
sodic) to
form purple quinoneimine whose colour intensity, measured at 550 nm,
is proportional to the concentration of triglycerides in the sample.
LPL
Triglycerides
Glycerol + Fatty acids
Glycerol + ATP
Glycerol-3-phosphate + O2
2 H2O2 + Amminoantipirine
+ ESPT
COMPOSITION
GK
GPO
POD
Glycerol-3-phosphate + ADP
Dihydroxyacetone phosphate
+ H2O2
Quinoneimine + HCl + 4 H2O
Reagent 1
Good Buffer pH 7.2 50 mmol/l
ESPT 4 mmol/l
ATP 2 mmol/l
Mg ++
2 mmol/l
Lipoproteinlipase (LPL) ≥ 1 kU/l
Glycerol kinase (GK) ≥ 0.4 kU/l
Glycerolphosphate oxidase (GPO) ≥ 1.5 kU/l
4-Amminoantipirine 0.5 mmol/l
Peroxidase (POD) >1 kU/l
NaN3 < 0.095 g/l
Preparation
The reagent is ready to use.
Storage and stability
Store at 2-8 °C. Do not freeze the reagents! The reagents are stable up
to the expiry date stated on the label when kept in closed vial.
On board stability: 30 days
SAMPLES
Serum, heparin or EDTA plasma. Samples may be stored for 7 days at
2-8°C or 12 months at -20 °C.
Specimen collection / Preanalytical factors
It is recommended that specimen collection should be carried out in
accordance with NCCLS protocol H11-A3.
INSTRUMENT TEST PROCEDURE
For the assay procedure refer to the Application Manual and to the
instrument Operator Manual.
CALIBRATION
Use GD-Cal (REF GD8577 00). See calibrator insert sheet for lot specific
concentration and traceability.
Recalibrate the instrument every 30 days or when a new lot or new
bottle of reagent is used.
QUALITY CONTROL
It is recommended to use controls with known triglycerides
concentration. Check that the values obtained are within the reference
range provided.
Normal and abnormal controls such as GD-Norm (REF GD8580 00) and
GD-Path (REF GD8582 00) are recommended.
Refer to Westgard et al. (3) for identification and resolution of out of
control situations.
CALCULATION OF RESULTS
Refer to the Application Manual and to the instrument Operator Manual.
Conversion factor
Triglycerides [mg/dl] x 0,01129 = Triglycerides [mmol/l].
REFERENCE INTERVALS (1)
Serum:
Males/Females: 50 - 175 mg/dl 0,56 - 1,98 mmol/l
Each laboratory should establish reference ranges for its own patients
population.
PERFORMANCE CHARACTERISTICS
Precision
Representative data from studies using CLSI protocol NCCLS EP5-A2
are summarized below.
Control Level 1 Level 2
Number of Observations N 60 60
Number of Runs N 20 20
Mean mg/dl 163 301
Within Run %CV 1,7 1,7
Total %CV 3,4 3,4
Linearity
The linearity range, established using CLSI protocol NCCLS EP6-A is
4 - 841 mg/dl (0,05 - 9,49 mmol/l).
Minimum Detection Limit
The minimum detection limit for the assay, established using CLSI
protocol NCCLS EP17-A, is 4 mg/dl (0,05 mmol/l).
Method Comparison
Correlation studies were performed using CLSI protocol NCCLS EP9-A2.
Serum results from this assay on Sat-450 were compared with those
from a commercially available analogous system. Results were as
follows: N = 60, y = 0,915x + 4,64 mg/dl, r = 0,998.
AMS S.p.A. – Registered Office and Plant Diagnostics Manufacturing
Via E. Barsanti 17/A | 00012 Guidonia (Rome) – Italy Via Galileo Galilei, 38 | Seggiano di Pioltello (MI) - Italy
Ph. +39 0774 354441 | Fax +39 0774 578035 Ph. +39 02 929189.1 | Fax +39 02 929189.39
www.ams-analyzers.com | info@ams-analyzers.com www.gdsrl.com | infodiagnostics@ams-analyzers.com
Limitations / Interfering Substances
No interferences have been observed from the following substances up
to the below reported concentration:
Bilirubin > 40 mg/dl
Hemoglobin > 250 mg/dl
Ascorbic acid > 6 mg/dl
For a comprehensive review of interfering substances, refer to the
publication by Young (2) .
PRECAUTIONS AND WARNINGS
The reagents contain inactive components such as preservatives
(Sodium azide or others), surfactants etc. The total concentration of
these components is lower than the limits reported by 67/548/EEC and
88/379/EEC directives about classification, packaging and labelling of
dangerous substances. However, the reagents should be handled with
caution, avoiding swallowing and contact with skin, eyes and mucous
membranes. The use of laboratory reagents according to good
laboratory practice is recommended.
Waste Management
Please refer to local legal requirements.
BIBLIOGRAPHY
1. Besozzi M, De Angelis G., Franzini C: Espressione dei risultati nel
laboratorio di chimica clinica. Società Italiana di Biochimica Clinica
(SIBioC).
2. Young D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, AACC
Press, Washington, D.C., 1990.
3. Westgard J., and Barry P., Cost- Effective Quality Control: Managing
the Quality and Productivity of Analytical Processes, AACC Press,
Washington, D.C., 1986.
4. Rifai N, Bachorik PS, Albers JJ. Lipids, lipoproteins and
apolipoproteins. In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook
of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W.B Saunders Company;
1999. p. 809-61.
5. Cole TG, Klotzsch SG, McNamara J: Measurement of triglyceride
concentration. In: Rifai N, Warnick GR, Dominiczak MH, eds.
Handbook of lipoprotein testing. Washington: AACC Press, 1997.
p.115-26.
6. Recommendation of the Second Joint Task Force of European and
other Societies on Coronary Prevention. Prevention of coronary heart
disease in clinical practice. Eur Heart J 1998; 19: 1434-503.
7. Chitto G, Fabi A, Franzini C, Galletta G, Leonardi A, Marelli M, Morelli
AM: Variabilità biologica intra-individuo: rassegna della letteratura,
contributo sperimentale e considerazioni critiche. Biochimica Clinica,
1994; 18, 10:673.
8. NCCLS Document, “Procedures for the collection of arterial blood
specimens”, Approved Standard, 3rd Ed. (1999).
9. EU-Dir 1999/11 Commission Directive of 8 March 1999 adapting to
technical progress the principles of good laboratory practice as
specified in Council Directive 87/18/EEC…NCCLS Document,
“Procedures for the collection of arterial blood specimens”, Approved
Standard, 3rd Ed. (1999).
Met. SA481500.0 Eng
Ed. 09/2012

Trigliceridi - L
REF SA4815 00 - 6x45 ml
USO
Il kit AMS Trigliceridi - L viene impiegato per la determinazione
enzimatica colorimetrica quantitativa in vitro dei trigliceridi nel siero e
plasma umano con sistema AMS Sat-450.
SOMMARIO
La determinazione dei trigliceridi è utilizzata nella diagnosi e nel
monitoraggio delle disfunzioni lipidiche per la valutazione dei rischi di
malattia aterosclerotica. Studi recenti hanno dimostrato che alte
concentrazioni di trigliceridi, combinate con un aumento delle
lipoproteine a bassa densità (LDL) costituiscono un rischio
particolarmente elevato per la malattia coronarica (“coronary heart
disease”, CHD). Alti livelli di trigliceridi sono presenti anche in varie
malattie del fegato, dei reni e del pancreas.
PRINCIPIO
Il glicerolo, ottenuto dall’idrolisi dei trigliceridi da parte della
lipoproteinlipasi, è trasformato dalla glicerochinasi in glicerolo-3-fosfato
il quale è ossidato dalla glicerolo-3-fosfato-ossidasi in diidrossiacetone
fosfato e perossido d’idrogeno. In presenza della perossidasi il
perossido d’idrogeno ossida il cromogeno ESPT (4-aminofenazone/Netil-metilanilin-propan-solfonato
sodico) formando il composto rosso
chinonimina la cui intensità di colore, misurata spettrofotometricamente
a 550 nm, è proporzionale alla concentrazione dei trigliceridi presenti
nel campione.
LPL
Trigliceridi
Glicerolo + Acidi grassi
Glicerolo + ATP
Glicerolo-3-fosfato + O2
2 H2O2 + Amminoantipirina
+ ESPT
COMPOSIZIONE
GK
GPO
POD
Glicerolo-3-fosfato + ADP
Diidrossiacetone fosfato +
H2O2
Chinonimina + HCl + 4 H2O
Reagente 1
Tampone di Good pH 7.2 50 mmol/l
ESPT 4 mmol/l
ATP 2 mmol/l
Mg ++
2 mmol/l
Lipoproteinlipasi (LPL) ≥ 1 kU/l
Glicerochinasi (GK) ≥ 0.4 kU/l
Glicerolo-fostato-ossidasi (GPO) ≥ 1.5 kU/l
4-Amminoantipirina 0.5 mmol/l
Perossidasi (POD) >1 kU/l
NaN3 < 0.095 g/l
Preparazione
Il reagente è pronto all’uso.
Conservazione e Stabilità
Conservare a 2-8 °C. Non congelare i reattivi! I reattivi sono stabili fino
alla data di scadenza riportata in etichetta, se conservati in flacone
chiuso.
Stabilità a bordo dello strumento: 30 giorni
CAMPIONI
Siero, Plasma EDTA o eparina: I campioni possono essere conservati
per 7 giorni a 2-8°C o 12 mesi a -20 °C.
Raccolta dei Campioni / Fattori Preanalitici
Si raccomanda di effettuare la raccolta dei campioni in conformità al
Protocollo NCCLS H11-A3.
PROCEDURA DI ANALISI
Per la procedura di analisi fare riferimento all’Application Manual e al
Manuale dell’Operatore dello strumento.
CALIBRAZIONE
Utilizzare GD-Cal (REF GD8577 00). Riferirsi all’inserto del calibratore
per la concentrazione specifica del lotto e la tracciabilità.
Ricalibrare lo strumento ogni 30 giorni o quando viene utilizzato un
nuovo lotto o una nuova bottiglia di reagente.
CONTROLLO DI QUALITA’
Si raccomanda l’uso di controlli a titolo noto di trigliceridi. Verificare che
il valore ottenuto sia all’interno degli intervalli di accettabilità forniti. Si
consiglia l’uso di controlli Normale e Patologico come GD-Norm (REF
GD8580 00) e GD-Path (REF GD8582 00).
Far riferimento a Westgard et al. (3) per l’identificazione e la risoluzione
di problematiche legate ai controlli fuori dai limiti.
CALCOLO DEI RISULTATI
Riferirsi all’Application Manual e al Manuale dell’Operatore dello
strumento.
Fattori di Conversione
Trigliceridi [mg/dl] x 0,01129 = Trigliceridi [mmol/l].
INTERVALLO DI RIFERIMENTO (1)
Siero:
Uomini/Donne: 50 - 175 mg/dl 0,56 - 1,98 mmol/l
Si raccomanda ad ogni laboratorio di stabilire i propri valori normali in
funzione della popolazione su cui opera.
PRESTAZIONI ANALITICHE
Precisione
Dati rappresentativi dello studio secondo il protocollo CLSI NCCLS
EP5-A2 sono sotto riportati.
Controllo Livello 1 Livello 2
Numero di Osservazioni N 60 60
Numero di Prove N 20 20
Media mg/dl 163 301
Nella Corsa %CV 1,7 1,7
Totale %CV 3,4 3,4
Linearità
L’intervallo di linearità, stabilito tramite il protocollo CLSI NCCLS EP6-A
è risultato pari a 4 - 841 mg/dl (0,05 - 9,41 mmol/l).
Limite Minimo di Rivelabilità
Il limite minimo di rilevabilità, stabilito tramite il protocollo CLSI NCCLS
EP17-A, è 4 mg/dl (0,05 mmol/l).
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Comparazione fra Metodi
Studi di correlazione sono stati effettuati secondo il protocollo CLSI
NCCLS EP9-A2. I risultati dei sieri di questo dosaggio su Sat-450 sono
stati confrontati con un sistema analogo presente in commercio. I
risultati sono stati i seguenti: N = 60, y = 0,915x + 4,64 mg/dl, r =
0,998.
Limitazioni / Sostanze Interferenti
Nessuna interferenza è stata osservata dalle seguenti sostanze fino alla
concentrazione sotto indicata:
Bilirubina > 40 mg/dl
Emoglobina > 250 mg/dl
Acido Ascorbico > 6 mg/dl
Per una panoramica completa sulle sostanze interferenti si rimanda alla
pubblicazione di Young (2) .
PRECAUZIONI E AVVERTENZE
I reagenti contengono componenti inattivi, quali i conservanti (Sodio
azide o altri), tensioattivi ecc. La concentrazione totale di questi
componenti è inferiore ai limiti riportati dalle direttive CEE 67/548/EEC
e 88/379/EEC sulla classificazione, l’imballaggio ed etichettatura delle
sostanze pericolose. Tuttavia i reagenti devono essere trattati con
cautela, evitandone l’ingestione, il contatto con la pelle, gli occhi e le
membrane mucose.
Nell’utilizzo dei reagenti di laboratorio si raccomanda di seguire le
norme di buona pratica di laboratorio.
Gestione dei Rifiuti
Attenersi alle norme locali per quanto riguarda lo smaltimento dei
reagenti.
BIBLIOGRAFIA
1. Besozzi M, De Angelis G., Franzini C: Espressione dei risultati nel laboratorio di
chimica clinica. Società Italiana di Biochimica Clinica (SIBioC).
2. Young D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, AACC Press,
Washington, D.C., 1990.
3. Westgard J., and Barry P., Cost- Effective Quality Control: Managing the Quality
and Productivity of Analytical Processes, AACC Press, Washington, D.C., 1986.
4. Rifai N, Bachorik PS, Albers JJ. Lipids, lipoproteins and apolipoproteins. In: Burtis
CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed.
Philadelphia: W.B Saunders Company; 1999. p. 809-61.
5. Cole TG, Klotzsch SG, McNamara J: Measurement of triglyceride concentration.
In: Rifai N, Warnick GR, Dominiczak MH, eds. Handbook of lipoprotein testing.
Washington: AACC Press, 1997. p.115-26.
6. Recommendation of the Second Joint Task Force of European and other Societies
on Coronary Prevention. Prevention of coronary heart disease in clinical practice.
Eur Heart J 1998; 19: 1434-503.
7. Chitto G, Fabi A, Franzini C, Galletta G, Leonardi A, Marelli M, Morelli AM:
Variabilità biologica intra-individuo: rassegna della letteratura, contributo
sperimentale e considerazioni critiche. Biochimica Clinica, 1994; 18, 10:673.
8. NCCLS Document, “Procedures for the collection of arterial blood specimens”,
Approved Standard, 3rd Ed. (1999).
9. EU-Dir 1999/11 Commission Directive of 8 March 1999 adapting to technical
progress the principles of good laboratory practice as specified in Council
Directive 87/18/EEC…NCCLS Document, “Procedures for the collection of arterial
blood specimens”, Approved Standard, 3rd Ed. (1999).
Met. SA481500.0 Ita
Ed. 09/2012