universita' degli studi di milano - Alessandro Guerini Rocco

Terreni per colture cellulari
DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium) con rosso fenolo + 10%
FBS
Polvere di DMEM (Invitrogen) 13,38 g/L
NaHCO3
1,5 g/L
Glucosio 2,5 g/L
Streptomicina-penicillina 5 mL/L di un mix da 10.000 UI
Sodio piruvato 0,11 g/L
FBS 10%
Procedimento
1. Si scioglie la polvere in 900 mL di acqua distillata, mantenendo in
agitazione. Si aggiunge NaHCO3, si lascia sciogliere e quindi si
porta a pH 7,2 con HCl 1N, mantenendo sempre in agitazione.
2. Si porta a volume di 1 L con acqua bidistillata e si prelevano 105
mL di soluzione, che costituiranno il medium incompleto.
Ai restanti 895 mL, si aggiungono gli altri ingredienti.
3. Si sterilizza per filtrazione, utilizzando filtri disposable 0,22 µm
(sotto cappa sterile) e si conserva a 4°C.
MEM con rosso fenolo + 10% FBS
Polvere di MEM (Invitrogen) 9,53 g/L
NaHCO3 2,2 g/L
Streptomicina-pennicillina 5 mL/L di un mix da 10.000 UI
Sodio piruvato 0,11 g/L
Mix aminoacidi non essenziali 1%
FBS 10%
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