universita' degli studi di milano - Alessandro Guerini Rocco

umano, hanno mostrato che il 17β-estradiolo contrasta l’induzione della
sintesi dell’IL-6 da parte del TNFα [73]. L’effetto del TNFα sulla
trascrizione dell’IL-6 è mediato da NF-κB, che riconosce specifici siti di
legame sul promotore dell’IL-6. Per comprendere il meccanismo
molecolare d’azione dell’E2 è stato effettuato un EMSA (Electrophoretic
Mobility Shift Assays) su estratti nucleari di HeLa, MCF-7 e Saos2.
Come sonda è stata utilizzata la regione -80/-60, contenente siti di legame
per NF-κB del promotore dell’IL-6, in presenza o in assenza di oligo
competitori. Effettuando l’EMSA, aggiungendo hER tradotti in vitro, si è
visto che ER inibisce il legame al promotore dell’IL-6, soprattutto di c-
Rel e in maniera minore di RelA (p65).
Il 17β-estradiolo diminuisce anche la produzione, indotta da IL-1, della
chemochina MCP-1 (Monocyte Chemoattractant Protein-1), in cellule
MCF-7 [77]. L’effetto è dose dipendente, in un intervallo di
concentrazione di E2 da 10 -12 a 10 -9 M. Un’azione inibitoria analoga, ma
con potenza inferiore è svolta dagli xenoestrogeni (XE), un gruppo di
composti chimici che legano il recettore degli estrogeni e mimano
l’azione dell’E2. Fanno parte degli xenoestrogeni composti molto lipofili
come il bisfenolo A (BPA) e il nonilfenolo (NP). Nel promotore di
MCP-1 sono presenti due siti di legame di NF-κB: A1 e A2. Mutazioni in
queste regioni determinano la perdita della responsività a IL-1. Tramite
EMSA si è dimostrato che l’aumento di MCP-1 indotto da IL-1 è dovuto
al legame di NF-κB al promotore di MCP-1 e che le subunità di NF-κB
coinvolte sono p50/p65 e p50/c-Rel. Sempre tramite EMSA si è
dimostrato che sia l’E2 che gli xenoestrogeni inibiscono il legame di
p50/p65 (e in modo minore di p50/c-Rel) ai siti di legame per NF-κB sul
promotore di MCP-1, in maniera dose dipendente.
Recentemente è stato dimostrato che E2 diminuisce la trascrizione del
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