universita' degli studi di milano - Alessandro Guerini Rocco

8. Effetto del 17β-estradiolo sulla localizzazione
citoplasmatica di p65 in cellule non macrofagiche
Anche se il suo ruolo principale è nelle cellule del sistema immunitario,
NF-κB è un fattore di trascrizione espresso in modo ubiquitario. Per
questo abbiamo deciso di valutare se l'estrogeno inibisse la traslocazione
di p65 anche in cellule non infiammatorie.
A tale scopo abbiamo condotto un'immunocitochimica su MCF-7,
SK-ER3 ed SK-N-BE. Le cellule MCF-7 sono derivate da un carcinoma
mammario umano positivo per ERα e sono spesso usate per studiare gli
effetti degli estrogeni; le SK-ER3 sono cellule di neuroblastoma
transfettate stabilmente con ERα e sono state generate nel nostro
laboratorio per studiare l'azione del 17β-estradiolo, le SK-N-BE sono il
loro controllo negativo, in quanto non esprimono gli ER.
Ogni tipo cellulare è stato trattato con lo stimolo che produceva
l'attivazione di p65. Infatti abbiamo osservato che LPS non attiva NF-κB
nelle MCF-7, nelle SK-N-BE e nelle SK-ER3, perché queste cellule non
hanno il recettore per l'LPS. Quindi abbiamo usato il TNFα, stimolo che
porta all'attivazione di NF-κB in vari tipi cellulari.
Come si vede dalle figure 9 e 10 in nessuno di questi tipi cellulari un
pretrattamento di 10 minuti con 17β-estradiolo 10 -9 M è stato in grado di
prevenire la traslocazione nucleare di p65 (Figura 9 e 10).
L'azione dell'estrogeno è perciò limitata alle cellule che prendono parte
alla risposta infiammatoria.
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