dottorato di ricerca titolo tesi - UniCA Eprints - Università degli studi ...

accolto in un becker da 100 ml, mentre il solido è stato scartato. Il filtrato è il Carbonio Organico
Estraibile (TEC).
Dal TEC sono stati prelevati 25 ml, trasferiti in provetta Falcon da centrifuga da 50 ml, e acidificati con
acido solforico (H2SO4 al 50%) fino a raggiungere un pH inferiore a 2. Il campione è stato lasciato a
riposo per 2 ore (per permettere la formazione di un precipitato costituito dagli acidi umici) e
successivamente centrifugato a 5.000 giri per 20 minuti. Dopo la centrifugazione del surnatante, ove sono
presenti gli acidi fulvici e sostanze non umiche, è stato separato dal solido rimasto sul fondo della
provetta.
Il solido è stato riportato in soluzione mediante trattamento con idrossido di sodio (NaOH 0,5 M) e
trasferito in un matraccio tarato da 25 ml e portato a volume sempre con idrossido di sodio. Tale
soluzione costituisce la frazione umica, in particolare gli Acidi Umici (HA), poi utilizzata per la
determinazione tramite titolazione volumetrica.
Il surnatante, contenente sia le sostanze non umiche, sia gli acidi fulvici è stato fatto passare nella colonna
contenente la resina acidificata con acido solforico (H2SO4 0,005 M) e raccolto in un matraccio tarato da
50 ml.
In questo modo gli acidi fulvici sono trattenuti dalla resina che, a pH acido, ha una forte affinità per i
gruppi fenolici mentre le sostanze non umiche, non presentando gruppi fenolici, passano attraverso i pori
della resina ed eluiscono prima.
In questo modo vengono purificati gli acidi fulvici dalla sostanze non umiche. Dopo aver fatto passare
tutta la soluzione, la colonna è stata eluita con acido solforico (H2SO4 0,005 M) e infine la frazione
raccolta nel matraccio tarato da 50 ml è stata portata a volume ancora con acido solforico. Quest’ultima è
la frazione delle Sostanze non Umiche (NH).
Recuperata la frazione di NH, la colonna è stata eluita con idrossido di sodio (NaOH 0,5 M) raccogliendo
l’estratto in un matraccio tarato da 50 ml, tale trattamento consente l’estrazione degli acidi fulvici
trattenuti nel precedente passaggio dalla resina, determinando la rottura dei legami idrogeno.
Dopo il recupero di questa frazione il contenuto del matraccio è stato portato a volume con idrossido di
sodio. Questa soluzione è costituita dagli Acidi Fulvici (HF).
Alla fine la resina in colonna è stata acidificata con acido solforico (H2SO4 0,005 M).
La determinazione analitica mediante titolazione volumetrica ha previsto che di tutte le frazioni ottenute,
TEC, HA, NH e HF è stato determinato il contenuto di carbonio organico (MI.P.A.F., 2000, ossidazione
per via umida “Walkley e Black”).
Polifenoli
Le sostanze polifenoliche rappresentano una componente molto importante della S.O. del suolo
(Stevenson & Fitch, 1986, McKeague et al., 1986; Stevenson, 1982); sono presenti in concentrazioni
elevate sia nel suolo (Wang & Yang, 1965; Whitehead, 1964) sia nei tessuti vegetali (Karrer, 1958), sia
nei microrganismi (Shibata et al., 1964) e anche negli effluenti di natura industriale (Semenchenko &
Kaplin, 1967).
Questi composti presentano più di un gruppo fenolico per molecola (Rubino, 2006). Nel suolo i polifenoli
si distinguono in due diverse componenti: la componente labile costituita da forme solubili e da forme
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