01990R2676-20050813 - EUR-Lex

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▼M8
2.3. Modo di operare
2.3.1. Preparazione del campione di vino o di mosto
Prelevare un volume di vino o di mosto e diluirlo a 100 ml in un
matraccio tarato con la soluzione di acido acetico al 56 % (2.1.4), in
modo da ottenere una soluzione la cui concentrazione in acido Lascorbico
sia compresa fra 0 e 60 mg/l. Agitare per omogeneizzare il
contenuto del matraccio tarato. Aggiungere 2 g di carbone attivo
(2.1.6) e lasciare a contatto per 15 minuti agitando di tanto in tanto.
Filtrare su carta da filtro ordinaria eliminando i primi millilitri di
filtrato. In due matracci tarati da 100 ml introdurre, in uno, 5 ml
della soluzione mista di acido barico e di acetato di sodio (2.1.3)
(testimone), nell'altro, 5 ml della soluzione di acetato di sodio (2.1.2)
(campione). Lasciare a contatto per 15 minuti agitando di tanto in
tanto, e completare a 100 ml con acqua distillata.
Prelevare 2 ml del contenuto di ciascun matraccio, aggiungere 5 ml di
soluzione di ortofenilendiammina (2.1.1), agitare; lasciare sviluppare la
reazione per 30 minuti in assenza di luce ed effettuare quindi la misura
allo spettrofluorimetro.
2.3.2. Curva di taratura
In tre matracci tarati da 100 ml porre rispettivamente 2, 4, 6 ml della
soluzione di riferimento di acido L-ascorbico (2.1.5), completare a 100
ml con la soluzione di acido acetico (2.1.4), agitando per omogeneizzare.
Le soluzioni di riferimento preparate contengono rispettivamente
2-4-6 mg/100 ml.
Aggiungere 2 g di carbone attivo (2.1.6) in ciascuno dei matracci e
lasciare a contatto per 15 minuti agitando di tanto in tanto. Filtrare su
carta da filtro ordinaria eliminando i primi millilitri. Introdurre rispettivamente
5 ml di ciascuno dei filtrati raccolti nei tre matracci da 100 ml
(prima serie), ripetere l'operazione con un seconda serie di tre matracci
tarati. Aggiungere in ciascuno dei matracci della prima serie (corrispondenti
al testimone) 5 ml di soluzione mista di acido borico e
acetato di sodio (2.1.3) e in ciascun matraccio della seconda serie 5
ml di soluzione di acetato di sodio (2.1.2).
Lasciare a contatto per 15 minuti agitando di tanto in tanto, e
completare a 100 ml con acqua distillata. Prelevare 2 ml del
2.3.3.
contenuto di ciascuno dei matracci, aggiungere 5 ml di soluzione di
ortofenilendiammina (2.1.1), agitare, lasciare sviluppare la reazione
per 30 minuti in assenza di luce ed effettuare quindi la misura allo
spettrofluorimetro.
Determinazione fluorimetrica
Regolare per ciascuna soluzione della curva di taratura e per la
soluzione del dosaggio lo zero della scala delle misure sul bianco
corrispondente. Effettuare quindi la misurazione dell'intensità della
fluorescenza per ogni soluzione della serie a titolo noto e della serie
del campione per il dosaggio.
Tracciare la curva di taratura; essa deve risultare lineare e passare per
l'origine degli assi. Riportare su tale retta il valore relativo al dosaggio
e sottrarre il tenore C in acido L-ascorbico + acido deidroascorbico
della soluzione analizzata.
2.3.4. Espressione dei risultati
La concentrazione del vino in acido L-ascorbico + acido deidroascorbico
espressa in milligrammi per litro sarà:
C ∙ F
F = fattore di diluizione.
1990R2676 — IT — 13.08.2005 — 011.001 — 124