MOLUSKUEN LISERI-GURUINEKO EPITELIOAREN ... - Euskara
MOLUSKUEN LISERI-GURUINEKO EPITELIOAREN ... - Euskara
MOLUSKUEN LISERI-GURUINEKO EPITELIOAREN ... - Euskara
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Zati Teorikoa<br />
1987; Endl & Gerdes, 2000), moluskuen ehunetan zelula proliferatzaileen identifikazioa<br />
nukleotidoen analogoen erabileran oinarritu da batik bat.<br />
2.2.1.- Fluxu-zitometria<br />
Teknika honetan, zelulak seinale batez markatzen dira. Seinaleak, itu-proteina bat<br />
espezifikoki ezagutzen duen antigorputzen bat zein azido nukleiko berezia ezagutzen duen<br />
zunda osagarriren bat izan daitezke. Zelulen esekidura batean zenbait zelula espezifikoki<br />
horrela markatu ondoren, laser-izpi batek zeharkatzen duen zulo batetik zelulen esekidura<br />
pasarazten da. Orduan, laser-izpiok zeluletan transmititu edo islatu egingo dira, zelulek<br />
seinalea daramatenentz arabera. Ondorioz, argia transmititu edo islatu den arabera<br />
zelulak karga elektrostatiko desberdinez hornituko dira, eta eremu elektromagnetiko<br />
batean zehar pasarazi ondoren banandu daitezke (Alberts et al., 2002). Teknika honen<br />
bitartez, zelulen kopurua eta zelula bakoitzak duen DNA kopurua ezagutu daitezke. Izan<br />
ere, aneuploidiarik ez egotekotan, G0- eta G1-fasean dauden zelulak diploideak izango<br />
dira, G2-fasean dauden zelulak tetraploideak eta S-fasean daudenek tarteko DNA-kopurua<br />
izango dute. Beraz, zelulen esekidurak erabiliz eta modelo matematiko egokiak aplikatuz,<br />
zatiketa-zinetika ere iker daiteke (Baisch et al., 1982). Zenbait kasutan, histologiarako<br />
fixatutako eta parafinan inkluditutako zeluletan ere DNA kopurua kalkula daiteke, laginak<br />
desparafinatu eta hidratatu ondoren (Hedley et al., 1983). Fluxu-zitometria, egoera<br />
patologiko desberdinak aztertzeko erabili da, eta bere bidez lortutako proliferazio-indizeek<br />
tumoreen garapenaren azterketarako ere balio prognostikoa dutela proposatu da (Joensuu<br />
et al., 1988). Fluxu-zitometriak, zelula proliferatzaileak detektatzeko bestelako tekniken<br />
aurrean daukan abantaila handienetakoa emaitzen objektibotasuna dugu. Gainera, zelulakopuru<br />
handiekin lan egin daiteke, eta interesatzen zaizkigun zelulak isolatzea<br />
ahalbidetzen du. Bestalde, beharrezkoa den ekipamendua oso garestia da, eta lagina<br />
sakabanatu eta desegituratu behar denez, zelula proliferatzaileen kokapena ehunean ez<br />
dago aztertzerik. Gainera, zelula proliferatzaileen azpipopulazioak ere galtzen dira.<br />
2.2.2- Nukleotidoen analogoen erabileran oinarrituriko teknikak<br />
3 H timidinaren ( 3 H-T) bitartezko markaketa<br />
Zelulen zinetika ehunetan zuzenean aztertzeko, 1950. hamarkadan 3H timidina<br />
tritiatuaren ( 3H-T) bitarteko markaketa, teknika estandarrena bilakatu zen. Zelula<br />
28