16.05.2013 Views

MOLUSKUEN LISERI-GURUINEKO EPITELIOAREN ... - Euskara

MOLUSKUEN LISERI-GURUINEKO EPITELIOAREN ... - Euskara

MOLUSKUEN LISERI-GURUINEKO EPITELIOAREN ... - Euskara

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

Zati Teorikoa<br />

1987; Endl & Gerdes, 2000), moluskuen ehunetan zelula proliferatzaileen identifikazioa<br />

nukleotidoen analogoen erabileran oinarritu da batik bat.<br />

2.2.1.- Fluxu-zitometria<br />

Teknika honetan, zelulak seinale batez markatzen dira. Seinaleak, itu-proteina bat<br />

espezifikoki ezagutzen duen antigorputzen bat zein azido nukleiko berezia ezagutzen duen<br />

zunda osagarriren bat izan daitezke. Zelulen esekidura batean zenbait zelula espezifikoki<br />

horrela markatu ondoren, laser-izpi batek zeharkatzen duen zulo batetik zelulen esekidura<br />

pasarazten da. Orduan, laser-izpiok zeluletan transmititu edo islatu egingo dira, zelulek<br />

seinalea daramatenentz arabera. Ondorioz, argia transmititu edo islatu den arabera<br />

zelulak karga elektrostatiko desberdinez hornituko dira, eta eremu elektromagnetiko<br />

batean zehar pasarazi ondoren banandu daitezke (Alberts et al., 2002). Teknika honen<br />

bitartez, zelulen kopurua eta zelula bakoitzak duen DNA kopurua ezagutu daitezke. Izan<br />

ere, aneuploidiarik ez egotekotan, G0- eta G1-fasean dauden zelulak diploideak izango<br />

dira, G2-fasean dauden zelulak tetraploideak eta S-fasean daudenek tarteko DNA-kopurua<br />

izango dute. Beraz, zelulen esekidurak erabiliz eta modelo matematiko egokiak aplikatuz,<br />

zatiketa-zinetika ere iker daiteke (Baisch et al., 1982). Zenbait kasutan, histologiarako<br />

fixatutako eta parafinan inkluditutako zeluletan ere DNA kopurua kalkula daiteke, laginak<br />

desparafinatu eta hidratatu ondoren (Hedley et al., 1983). Fluxu-zitometria, egoera<br />

patologiko desberdinak aztertzeko erabili da, eta bere bidez lortutako proliferazio-indizeek<br />

tumoreen garapenaren azterketarako ere balio prognostikoa dutela proposatu da (Joensuu<br />

et al., 1988). Fluxu-zitometriak, zelula proliferatzaileak detektatzeko bestelako tekniken<br />

aurrean daukan abantaila handienetakoa emaitzen objektibotasuna dugu. Gainera, zelulakopuru<br />

handiekin lan egin daiteke, eta interesatzen zaizkigun zelulak isolatzea<br />

ahalbidetzen du. Bestalde, beharrezkoa den ekipamendua oso garestia da, eta lagina<br />

sakabanatu eta desegituratu behar denez, zelula proliferatzaileen kokapena ehunean ez<br />

dago aztertzerik. Gainera, zelula proliferatzaileen azpipopulazioak ere galtzen dira.<br />

2.2.2- Nukleotidoen analogoen erabileran oinarrituriko teknikak<br />

3 H timidinaren ( 3 H-T) bitartezko markaketa<br />

Zelulen zinetika ehunetan zuzenean aztertzeko, 1950. hamarkadan 3H timidina<br />

tritiatuaren ( 3H-T) bitarteko markaketa, teknika estandarrena bilakatu zen. Zelula<br />

28

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!