MOLUSKUEN LISERI-GURUINEKO EPITELIOAREN ... - Euskara
MOLUSKUEN LISERI-GURUINEKO EPITELIOAREN ... - Euskara MOLUSKUEN LISERI-GURUINEKO EPITELIOAREN ... - Euskara
AZIL KoA-OXIDASA (AOX) JARDUERAREN NEURKETA (Small et al., 1985). 1.- Bareen liseri-guruinak TVBE indargetzailean homogenizatu eta 500 g-tan zentrifugatu, 15 minutuz eta 4ºC-tan. TVBE indargetzailea pH 7.6 (100 ml) NaHCO3 8.4 mg 0.1M EDTA 1 ml %0.1 etanol 0.1 ml %10 Triton X-100 0.1 ml H2O distilatua 100 ml 2.- Gainjalkinaren 100 µl (beharrezko diluzioan) hartu eta 1.9 ml inkubazio-mediora gehitu. Nahasketa 5 minutuz eta 25ºC-tan iluntasunean mantendu. Substratuaren (Palmitoil-KoA (Sigma P-9276) 3 mM) 10 µl gehitu, nahastu eta absorbantziaren aldaketa neurtu 502 nm-tan 3 minutuz. Inkubazio-medioa 0.5M potasio fosfato indargetzailea 2 ml DCF disoluzioa* 2 ml Errefrau peroxidasa 1200 mU/ml (Sigma P-8250) 1 ml 4 M NaN 3 (Sigma S-2002) 1 ml %10 Triton X-100 (Sigma X-100) 2 ml H 2 O distilatua 100 ml arte *1 ml egiteko: 1.3 mg diklorofluoreszeina (DCF) (Molecular Probes D-399) 100 µl dimetilformamida + 900 µl 0.01 N NaOH-an disolbatu. Potasio fosfato indargetzailea 0.5 M pH 7.4 KH2PO4 680 mg H2O distilatua 10 ml K 2 HPO 4 3H 2 O 1140 mg H 2 O distilatua 10 ml KH 2 PO 4 disoluzioa K 2 HPO 4 3H 2 O disluzioari gehitu pH 7.4 lortu arte. Substratu disoluzioa (3 mM palmitoil-KoA oxidasa) Palmitoil-KoA (Sigma, P-9276) ur distilatuan disolbatu, beharrezko kontzentrazioa lortu arte. 0.5 ml-tako alikuotetan izoztu eta gorde. 3.- AOX jardueraren neurketa honela burutu: mUnitate/ml = (Absorbantziaren aldaketa/minutu) x (erreakzio-bolumena/lagin-bolumena) x (mg proteina/ml). mUnitate/mg proteina = (mUnitate/ml) / ( mg proteina/ml) Metodologi-eranskina 235
Metodologi-eranskina 236
- Page 183 and 184: Emaitzak eta eztabaida al., 2002).
- Page 185 and 186: Emaitzak eta eztabaida aldiaren ond
- Page 187 and 188: Emaitzak eta eztabaida Liseri-zelul
- Page 189 and 190: Emaitzak eta eztabaida Runham NW, H
- Page 191 and 192: Emaitzak eta eztabaida Cell-type re
- Page 193 and 194: Emaitzak eta eztabaida Lehorreko ba
- Page 195 and 196: Emaitzak eta eztabaida kutsatugabek
- Page 197 and 198: Emaitzak eta eztabaida liseri-zelul
- Page 199 and 200: Emaitzak eta eztabaida 1. Taula: Er
- Page 201 and 202: Emaitzak eta eztabaida Bi tokietan
- Page 203 and 204: Emaitzak eta eztabaida 6. Irudia: E
- Page 205 and 206: Emaitzak eta eztabaida zelaian pair
- Page 207 and 208: Emaitzak eta eztabaida deskribatuta
- Page 209 and 210: Emaitzak eta eztabaida zelula-mota
- Page 211 and 212: Emaitzak eta eztabaida zen, Karrant
- Page 213 and 214: Emaitzak eta eztabaida osteko denbo
- Page 215 and 216: Emaitzak eta eztabaida Cajaraville
- Page 217 and 218: Emaitzak eta eztabaida Mix MC, Spar
- Page 219 and 220: Emaitzak eta eztabaida 216
- Page 221 and 222: Ondorioak eta tesia 6.- Kadmio pean
- Page 223 and 224: METODOLOGI-ERANSKINA
- Page 225 and 226: Metodologi-eranskina Harris Hematox
- Page 227 and 228: Metodologi-eranskina montatu. 228 A
- Page 229 and 230: Metodologi-eranskina 4.- Ebakiak PB
- Page 231 and 232: Metodologi-eranskina B-2) Fosfatasa
- Page 233: Metodologi-eranskina indargetzailea
Metodologi-eranskina<br />
236