MOLUSKUEN LISERI-GURUINEKO EPITELIOAREN ... - Euskara
MOLUSKUEN LISERI-GURUINEKO EPITELIOAREN ... - Euskara
MOLUSKUEN LISERI-GURUINEKO EPITELIOAREN ... - Euskara
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Gelditze-soluzioa (100 ml)<br />
Azido azetiko glaziala 1 ml<br />
H 2 O distilatua 99 ml<br />
Fixatzailea (100 ml)<br />
Fixatzailea (Agefix B&W fixer) 10 ml<br />
H 2 O distilatua 90 ml<br />
B-2) EBAKI ULTRAFINAK<br />
3-4 µm-ko lodierako ebakiak aurretik azaldu bezala tindatu. Ondoren, tindatutako laginak<br />
berriro ere EPON erretxinan inkluditu, erretxina polimerizatu, ebaki ultrafinak eskuratu eta azetato<br />
uraniloz tindatu.<br />
IMMUNOHISTOKIMIKA<br />
A) PCNA IMMUNOHISTOKIMIKA (Marigómez et al., 1999)<br />
1.- Disekzionatutako laginak aurretik azaldu bezala prestatu.<br />
2.- Ebakiak silanizatutako portaobjektuetan itsatsi eta 60ºC-tan lehortu. Ondoren ebakiak<br />
xiloletan eta etanolezko bainutan desparafinatu eta hidratatu.<br />
Porten silanizazioa<br />
Portak ur detergentea duen ur distilatuan garbitu 30 min-ordu 1.<br />
Uretan garbitu.<br />
Portak 130ºC-tan lehortu.<br />
Portak %2 3-aminopropiltrietoxisilano (Sigma A-3648) azetonatan 5 segunduz<br />
murgildu.<br />
Azetonan bi bainu azkarretan garbitu.<br />
Ur bidistilatuan garbitu.<br />
37ºC-tan gau osoan lehortu.<br />
Desparafinazioa eta hidratazioa<br />
Xilola 2 x 10 min<br />
%100 etanola 2 x 2 min<br />
%96 etanola 2 min<br />
%70 etanola 2 min<br />
H 2 O distilatua 5 min<br />
3.- Beharrezkoa bada laginetan antigenizitatearen berreskuratzea egin daiteke.<br />
Horretarako ebakiak %0.5 tripsina duen TBS-tan 5 minutuz murgildu ziren.<br />
TBS, pH 7.6 (100 ml)<br />
Tris 0.605 g<br />
NaCl 0.877 g<br />
H 2 O distilatua 100 ml<br />
Metodologi-eranskina<br />
229
Change language