04.03.2013 Views

39 KDa

39 KDa

39 KDa

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

Figura 19: Espressione dell'mRNA, nel punto di flesso, delle subunità delle proteine G nelle cellule HTR-8/SVneo. La<br />

reazione di amplificazione è stata bloccata nel punto del flesso: per Gq 29 cicli, per Gs 22 cicli, per Gi 28 cicli, per<br />

Go 28 cicli. Linea M: DNA marker 100 bp.<br />

Figura 20: Analisi semiquantitativa dell’espressione del mRNA delle subunità G. I dati rappresentano le medie <br />

SEM di almeno 3 esperimenti. I dati sono normalizzati con il controllo 18S rRNA. p 0.001 rispetto a Go, ° p 0.01<br />

rispetto a Gi, ‘ p 0.05 rispetto a Gi, ** p < 0.05 rispetto a Go. (ANOVA, seguito dal test di comparazione multipla<br />

di Bonferroni).<br />

Espressione proteica delle subunità delle proteine G<br />

L’espressione proteica delle subunità α delle proteine G e la loro quantificazione sono state<br />

determinate mediante la tecnica western blotting, utilizzando come controllo interno -actina. La -<br />

actina e le isoforme Gαq, Gαs, Gαo e Gαi sono state determinate con anticorpi policlonali specifici<br />

riportati nella tabella IX in Materiali e Metodi.<br />

I risultati di immunoblotting riportati in Fig.21 dimostrano la presenza, sia nelle cellule<br />

HTR-8/SVneo che nei villi coriali, delle seguenti subunità :<br />

1. Gαq con un peso apparente di 42 <strong>KDa</strong>;<br />

2. Gαs con due bande di 42 e 46 <strong>KDa</strong>;<br />

3. Gαi con un peso apparente di 40 <strong>KDa</strong>;<br />

Gαq Gαs Gαi Gαo M<br />

La subunità Gαo non è stata rilevata nelle cellule HTR-8/SVneo, mentre nel tessuto villoso si<br />

evidenzia una banda con peso apparente di <strong>39</strong> <strong>KDa</strong>, associabile a questa subunità. La Fig.22 riporta<br />

54

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!