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Figura 19: Espressione dell'mRNA, nel punto di flesso, delle subunità delle proteine G nelle cellule HTR-8/SVneo. La<br />
reazione di amplificazione è stata bloccata nel punto del flesso: per Gq 29 cicli, per Gs 22 cicli, per Gi 28 cicli, per<br />
Go 28 cicli. Linea M: DNA marker 100 bp.<br />
Figura 20: Analisi semiquantitativa dell’espressione del mRNA delle subunità G. I dati rappresentano le medie <br />
SEM di almeno 3 esperimenti. I dati sono normalizzati con il controllo 18S rRNA. p 0.001 rispetto a Go, ° p 0.01<br />
rispetto a Gi, ‘ p 0.05 rispetto a Gi, ** p < 0.05 rispetto a Go. (ANOVA, seguito dal test di comparazione multipla<br />
di Bonferroni).<br />
Espressione proteica delle subunità delle proteine G<br />
L’espressione proteica delle subunità α delle proteine G e la loro quantificazione sono state<br />
determinate mediante la tecnica western blotting, utilizzando come controllo interno -actina. La -<br />
actina e le isoforme Gαq, Gαs, Gαo e Gαi sono state determinate con anticorpi policlonali specifici<br />
riportati nella tabella IX in Materiali e Metodi.<br />
I risultati di immunoblotting riportati in Fig.21 dimostrano la presenza, sia nelle cellule<br />
HTR-8/SVneo che nei villi coriali, delle seguenti subunità :<br />
1. Gαq con un peso apparente di 42 <strong>KDa</strong>;<br />
2. Gαs con due bande di 42 e 46 <strong>KDa</strong>;<br />
3. Gαi con un peso apparente di 40 <strong>KDa</strong>;<br />
Gαq Gαs Gαi Gαo M<br />
La subunità Gαo non è stata rilevata nelle cellule HTR-8/SVneo, mentre nel tessuto villoso si<br />
evidenzia una banda con peso apparente di <strong>39</strong> <strong>KDa</strong>, associabile a questa subunità. La Fig.22 riporta<br />
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