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Figura 11: Localizzazione dei recettori per SRIF in cellule HTR-8/SVneo. In A: marcatura con anticorpi antirecettore
sst2A; in B: marcatura con anticorpi anti-recettore sst2B; in C: controllo negativo. Il pannello D mostra
cellule aderenti colorate con fucsina acida 1%. Scala = 10 m in A-C; 20 m in D.
Identificazione dei componenti del sistema del cAMP in cellule HTR-8/SVneo
Dal momento che le cellule HTR-8/SVneo sono altamente responsive a sostanze in grado di
modulare i livelli intracellulari di cAMP e alla luce dell’importante ruolo del nucleotide nel
controllo delle funzioni del trofoblasto, abbiamo esaminato l’espressione delle differenti isoforme
dell’unità catalitica dell’adenilil ciclasi, nonché delle subunità delle proteine G sia nella linea
cellulare che in villi coriali umani del primo trimestre di gravidanza.
Valutazione dell’espressione genica dell’unità catalitica dell’adenilil ciclasi
Per valutare la presenza dell’mRNA per le differenti isoforme dell’unità catalitica dell’adenilil
ciclasi sia di membrana (AC1-AC9) che solubile (ACs), nei modelli in esame, è stata utilizzata la
tecnica di RT-PCR. Sia nelle cellule HTR-8/SVneo che nei villi coriali, abbiamo riscontrato la
presenza dell'mRNA per specifiche isoforme. I risultati da noi ottenuti dimostrano la presenza di
amplificati che corrispondono alle isoforme AC3 (213 bp), AC5 (316 bp), AC6 (170 bp), AC7 (587
bp) ed AC9 (166 bp) nella linea cellulare e nei villi coriali (Fig.12). Gli mRNA per l'isoforma AC4
(166 bp) e per quella solubile ACs (566 bp) [123] sono presenti nel tessuto villoso, ma non nelle
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