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Figura 9: RT-PCR e Western blot dei sottotipi recettoriali per PGE2 nelle cellule HTR-8/SVneo. A: mRNA per i
sottotipi recettoriali EP2 e EP4; GAPDH è stata utilizzata come controllo interno. B: espressione dei sottotipi
recettoriali EP2 and EP4. Sono stati usati 80 µg di proteine/colonna. Gli esperimenti sono rappresentativi di almeno 4
prove separate.
La presenza dei recettori per SRIF è stata indagata attraverso le tecniche di RT-PCR e
marcatura in fluorescenza. La prima ha evidenziato la presenza dei sottotipi recettoriali sst2A e
sst2B (Fig.10). Questo risultato ha trovato conferma nella marcatura in fluorescenza; infatti sulle
membrane di quasi tutte le cellule HTR-8/SVneo risulta evidente la presenza del recettore sst2A,
usando l’anticorpo specifico diluito 1:1000 (Fig.11A). L’esame di campi multipli ha rivelato un
sottogruppo minore di cellule immunomarcate con l’anticorpo anti-recettore sst2B, diluito 1:500
(Fig.11B). Gli anticorpi contro i recettori sst3 e sst5 hanno dato una scarsa marcatura delle cellule
alla diluizione di 1:500 (non mostrato). Non si è osservata alcuna marcatura utilizzando gli anticorpi
anti-recettore sst1 e sst4 (non mostrato).
Figura 10: RT-PCR dei recettori per SRIF in cellule HTR-8/SVneo. In M: marcatore 100bp; in A: Prodotto di PCR
per sst2A; in B: Prodotto di PCR per sst2B.
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