Teori kromatografi modern

3/17/2011
PERTEMUAN 2
• Kromatografi ?
• Manfaat teknik kromatografi?
• Parameter dalam kromatografi ?
• Elusi, eluat, eluen?
•
1

3/17/2011
• Pemisahan campuran
• Identifikasi
• Analisis kuantitatif
• Analisis preparatif
inte
nsit
as
A
B
Waktu retensi (tr), menit
Parameter yang digunakan:
• waktu retensi (tr)
• volume retensi (Vr)
4
2

3/17/2011
• Waktu retensi (tr)
• Volume retensi (Vr)
• Faktor kapasitas (k’)
• Efisiensi kolom (N, H)
• Faktor pemisahan/
selektivitas (α)
• Resolusi (R)
I/
A
A
B
Waktu retensi (tr), menit
Soal :
tr (1) = 2,3 menit
Tr (2) = 5,3 menit
Tr (3) = 10,7 menit
Tr(0) = 0,97 menit
Hitung faktor
kapasitas masingmasing.
Apa artinya?
Faktor kapasitas, k`
k`
t
r
t
r(0)
t
r(0)
t r(o) = waktu retensi senyawa yang tidak
tertahan dalam kolom
= waktu retensi fasa gerak
3

3/17/2011
Soal :
Efisiensi kolom
Ukuran efisiensi:
Jumlah pelat (N) atau
H (HETP)
Puncak (1) :
Tr (1) = 2,5 menit
W (1) = 5 menit
Tr = 2,5 menit
Tr = 2,5 menit
Tr (2) = 2,5 menit
W (2) = 0,2 menit
L = 12,5 cm
Puncak mana yg menghasilkan
efisien kolom yang lebih baik?
N
t
16(
r
W
)
t
w
2
5,54(
r
)
2
1/ 2
HETP = L/N
High Equivalent to Teoritical Plate
= tinggi pelat teori
Kolom efisien: N besar, HETP kecil
4

3/17/2011
Perbedaan distribusi komponen
diantara fasa gerak dan fasa diam
yang menyebabkan migrasi diferensial
komponen-komponen analit dalam kolom
kromatografi
Kemampuan kolom untuk
membedakan suatu komponen dari
komponen lain
Dasar : perbedaan harga faktor
kapasitas
5

3/17/2011
1. Faktor Selektivitas ( )
K
K
2
1
K adalah Koef partisi komponen
1 dan 2
t
'
r2
t
'
r1
t
r(2)
t
r(1)
t
r(0)
t
r(0)
Untuk Pemisahan:
>>1
11
I 3,2 4,5
T 0 = 0,99
Tr, menit
:………………………………
‣ menjamin pemisahan bagian atas
kromatogram
(puncak)
‣ Tidak memperhitungkan overlap puncakpuncak
Parameter lain : R (resolusi)
12
6

3/17/2011
Soal
RESOLUSI
Bagaimana kalau
puncaknya seperti ini?
Rs
tr(2)
tr
1
( w1
w
2
(1)
2
)
1 2
w
W 1/2
)
w
Rs
2( t
1,699( w
r(2)
1/ 2(1)
t
r(1)
w
)
1/ 2(2)
Rs ideal = 1,25
(97,5% terpisah)
14
7

3/17/2011
Cara lain menghitung Rs :
memperhitungkan
selektivitas
efisiensi
faktor kapasitas
1 k`
1
R ( )( )
4 1
k`
Faktor
kapasitas
Faktor
selektivitas
N
Faktor
efisiensi
15
Data retensi campuran 3 senyawa adalah sebagai
berikut:
(1) (2) (3) (0)
Tr 3,50 4,9 6,8 0,23
W1/2 0,04 0,5 0,8
N
α
k’
R
8