pemberian ekstrak kelopak bunga rosela menurunkan ...

TESIS 

PEMBERIAN EKSTRAK KELOPAK BUNGA ROSELA 

MENURUNKAN MALONDIALDEHID PADA TIKUS 

YANG DIBERI MINYAK JELANTAH 

TRIJONO SUWANDI 

PROGRAM PASCASARJANA 

UNIVERSITAS UDAYANA 

DENPASAR 

2012

TESIS 





NIM 0890761018 

PROGRAM MAGISTER 

PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK 



DENPASAR 

2012

TESIS 




Tesis untuk Memperoleh Gelar Magister 

Pada Program Magister Program Studi Ilmu Kedokteran Biomedik 

Program Pasca Sarjana Universitas Udayana 


NIM 0890761018 

PROGRAM MAGISTER 

PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK 



DENPASAR 

2012

Pembimbing I 

Lembar Pengesahan 

TESIS INI TELAH DISETUJUI 

PADA TANGGAL 19 Januari 2012 

Pembimbing II 

Prof. Dr. dr. Wimpie I. Pangkahila, Sp.And, FAACS Prof. dr. I Gusti Made Aman, Sp.FK 

NIP. 194606191976021001 NIP. 194606191976021001 

Mengetahui, 

Ketua Program Studi Ilmu Biomedik Direktur 

Program Pasca Sarjana Program Pascasarjana 

Universitas Udayana Universitas Udayana 

Prof. Dr. dr. Wimpie I. Pangkahila, SpAnd,FAACS Prof.Dr.dr.A.A.Raka Sudewi, Sp. S(K) 

NIP. 194612131971071001 NIP. 195902151985102001

Tesis Ini Telah Diuji pada 

Tanggal 19 Januari 2012 

Panitia Penguji Tesis Berdasarkan SK Rektor 

Universitas Udayana, No. 0144/UN14.4/HK/2012, Tanggal 16 Januri 2012 

Ketua : Prof. Dr. dr. Wimpie I. Pangkahila,SpAnd., FAACS 

Anggota : 

1. Prof. dr. I Gusti Made Aman, SpFK 

2. Prof. Dr. dr. N. Adiputra, MOH 

3. Prof. dr. N. Agus Bagiada, Sp.BIOK 

4. Prof. Dr. dr. Alex Pangkahila, M.Sc., SpAnd

UCAPAN TERIMA KASIH 

Pertama-tama perkenankanlah penulis memanjatkan puji syukur kepada Tuhan 

Yang Maha Esa, karena hanya atas karunia-Nya tesis yang berjudul “Pemberian 

Ekstrak Kelopak Bunga Rosela Menurunkan Malondialdehid pada Tikus yang Diberi 

Minyak Jelantah” dapat diselesaikan. 

Tesis ini untuk memenuhi persyaratan tugas akhir pendidikan yang dijalani 

penulis untuk memperoleh gelar magister pada Program Magister Program Studi Ilmu 

Kedokteran Biomedik, Kekhususan Anti-Aging Medicine, Program Pasca Sarjana 

Universitas Udayana. 

Pada kesempatan ini perkenankanlah penulis menyampaikan rasa hormat, 

penghargaan, dan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada: 

1. Prof. Dr. dr. Wimpie I. Pangkahila, Sp.And, FAACS selaku Ketua Program Sudi 

Ilmu Kedokteran Biomedik Universitas Udayana dan selaku pembimbing I yang 

telah memberikan banyak dorongan, semangat, bimbingan, dan masukan kepada 

penulis selama penyusunan tesis ini. 

2. Prof. dr. I Gusti Made Aman, Sp.FK. selaku pembimbing II yang dengan penuh 

perhatian telah memberikan dorongan, semangat, bimbingan dan masukan 

kepada penulis selama penyusunan tesis ini. 

3. Prof. Dr. dr, N. Adiputra, MOH. selaku pembimbing akademik dan selaku 

penguji yang telah memberikan banyak dorongan, semangat, bimbingan dan 

masukan kepada penulis selama penyusunan tesis ini.

4. Prof. dr. N. Agus Bagiada, SpBIOK. selaku penguji yang telah memberikan 

banyak dorongan, semangat, bimbingan dan masukan kepada penulis selama 

penyusunan tesis ini. 

5. Prof. Dr. dr. Alex Pangkahila, M.Sc. Sp.And. selaku penguji yang dengan penuh 

perhatian telah memberikan dorongan, semangat, bimbingan, dan masukan 

selama penulis mengikuti program magister, khususnya dalam penyusunan tesis 

ini. 

6. Drs. I Ketut Tunas, M.Si., yang telah memberikan masukan dan saran ilmiah 

terutama dalam metode penelitian dan statistik yang sangatlah berguna bagi 

penulis dalam menyusun tesis ini. 

7. Dr. Ir. Eni Harmayani, M.Sc., selaku kepala Pusat Studi Pangan dan Gizi 

Universitas Gajah Mada dan Bapak Yulianto selaku staf yang telah banyak 

membantu dalam menyediakan binatang pecobaan serta fasilitas tempat, 

peralatan dan bantuan teknis bagi terlaksananya penelitian di Laboratorium Pusat 

Studi Pangan dan Gizi Universitas Gajah Mada. 

8. Para dosen pengajar dan staf di Universitas Udayana yang tidak dapat disebutkan 

satu persatu, yang selalu memberikan dorongan dan bantuan. 

9. Segenap staf administrasi dan teman-teman mahasiswa yang telah membantu 

dan memberikan dorongan semangat bagi penulis. 

10. Istri yang sangat mengasihi, Endang Setiawati, anak-anak tersayang, William, 

Kevin dan Charissa, atas segala doa, dukungan dan pengertiannya selama 

penulis menempuh pendidikan.

11. Keluarga tercinta, Papa, Mama dan adik-adik, atas doa, perhatian, semangat 

selama penulis menempuh pendidikan. 

12. Rekan-rekan sejawat yaitu Eve, Jess, Fifin, Kris, Teguh, Juli, dr. Oka dan rekan- 

rekan sejawat lainnya yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang selalu 

memberikan dorongan, semangat, dan saran selama penulis mengikuti program 

magister, khususnya dalam penulisan tesis ini. 

Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada semua pihak yang telah 

membantu dalam pelaksanaan dan peyelesaian tesis ini. 

Penulis berharap tesis ini dapat memberikan manfaat baik bagi penulis pribadi, 

bagi program pendidikan Magister Program Studi Ilmu Biomedik, Program Pasca 

Sarjana Universitas Udayana, serta bagi pihak-pihak lain yang berkepentingan. 

Penulis menyadari bahwa penulisan tesis ini masih jauh dari sempurna dan masih 

banyak kekurangan, oleh karena itu saran dan kritik yang membangun dari semua 

pihak akan menjadi masukan yang sangat diharapkan. 

Akhir kata, Tuhan Yang Maha Kuasa senantiasa melimpahkan kasih, berkat, 

damai sejahtera dan anugerah-Nya kepada kita semua. 

Denpasar, Juli 2011 

Penulis 

Trijono Suwandi

ABSTRAK 

PEMBERIAN EKSTRAK KELOPAK BUNGA ROSELA MENURUNKAN 

MALONDIALDEHID PADA TIKUS YANG DIBERI MINYAK JELANTAH 

Minyak jelantah adalah minyak goreng bekas yang sudah dipakai untuk 

menggoreng berbagai jenis makanan dan sudah mengalami perubahan pada 

komposisi kimianya. Penggunaaan minyak jelantah dapat terbentuk radikal bebas. 

Radikal bebas yang berlebihan menimbulkan stres oksidasi yang memicu proses 

peroksidasi lipid, kerusakan oksidatif protein dan mutasi DNA, sehingga dapat 

mempercepat terjadinya proses penuaan. Rosela dapat dijadikan sumber antioksidan, 

karena mengandung vitamin C, vitamin E, beta karoten, omega 3, dan flavanoid. 

Penelitian ini untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak kelopak bunga rosela 

pada tikus jantan yang diberi minyak jelantah. Penurunan stres oksidasi dapat 

diketahui salah satunya dengan mengukur MDA yang merupakan produk akhir dari 

peroksidasi lipid. 

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan menggunakan pre test 

and post test control group design, yang dilaksanakan di Laboratorium Pusat Studi 

Pangan dan Gizi Universitas Gajah Mada, Jogjakarta. Penelitian ini menggunakan 18 

ekor tikus jantan galur Wistar yang dibagi menjadi tiga kelompok, yaitu kelompok 

kontrol (P0) diberi minyak jelantah dan aquades, kelompok perlakuan 1 (P1) diberi 

minyak jelantah dan ekstrak kelopak bunga rosela dosis 250 mg/kg BB dan kelompok 

perlakuan 2 (P2) diberi minyak jelantah dan ekstrak kelopak bunga rosela dosis 500 

mg/kg BB. Perlakuan terhadap ketiga kelompok ini dilakukan selama 14 hari. 

Uji perbandingan sesudah diberikan ekstrak kelopak bunga rosela antara ketiga 

kelompok menggunakan One Way Anova. Rerata kadar MDA kelompok kontrol 

adalah 7,790,32, rerata kelompok P1 adalah 5,190,30, dan rerata kelompok P2 

adalah 3,410,36. Terjadi penurunan kadar MDA secara bermakna pada ketiga 

kelompok sesudah diberikan perlakuan berupa ekstrak kelopak bunga rosela secara 

peroral selama 14 hari (p < 0,05). 

Disimpulkan bahwa pemberian ekstrak kelopak bunga rosela dosis 250 mg/kg 

BB menurunkan malondialdehid sebesar 28,0% pada tikus yang diberi minyak 

goreng jelantah dan pemberian ekstrak kelopak bunga rosela dosis 500 mg/kg BB 

menurunkan malondialdehid sebesar 50,2%. Hasil penelitian ini diharapkan dapat 

dipakai sebagai dasar penelitian lebih lanjut untuk mengetahui dosis maksimal 

ekstrak kelopak bunga rosella pada hewan coba dan perlu dilakukan clinical trial. 

Kata kunci : rosela, malondialdehid, minyak jelantah.

ABSTRACT 

ADMINISTRATION OF ROSELLA PETAL FLOWER EXTRACT 

DECREASES MALONDIALDEHYDE IN RATS FED WITH WASTE 

COOKING OIL 

Waste cooking oil is used oil that has been used to fry many kinds of food and 

changes in their chemical composition. The use of waste cooking oil, especially 

with deep frying method can form free radicals. Excessive free radicals will cause 

oxidative stress that triggers the process of lipid peroxidation, oxidative damage of 

protein and DNA mutation, which can accelerate the aging process. Lipid 

peroxididation products can be measured as MDA levels. Rosella contains vitamin 

C, vitamin E, beta carotene, omega 3, and flavonoids, is a natural antioxidant which 

can reduce the negative impact of oxidants including free radicals. This research aims 

to determine the effect of rosella petal flower extract against MDA in rats fed with 

waste cooking oil. Decrease in oxidative stress can be determined by measuring 

MDA which is the end product of lipid peroxidation. 

This research was an experimental study which applies randomized Pre test and 

Post test Control Group design. Research conducted at the Food and Nutrition Centre 

of Study Laboratory, Gajah Mada University, Jogjakarta. This research was done on 

18 male Wistar strain rats, were divided into three research groups. The first group 

was the control group (P0) which were administrated with waste cooking oil and 

aquades. The second group was the treatment group 1 (P1) which were administrated 

with waste cooking oil and rosella petal flower extract dose of 250 mg/kg. While the 

third group was the treatment group 2 (P2) were administrated with waste cooking oil 

and rosella petal flower extract dose of 500 mg/kg. The treatment of the three groups 

was conducted for 14 days. 

The analysis result between the three groups using One Way Anova, comparison 

test after roselle petals flower extract administration among the three groups was 

MDA level. The average of the control group was 7.79 ± 0.32, the average P1 group 

was 5.19 ± 0.30, and the average P2 group was 3,41 ± 0.36. There were significant 

differences in MDA levels decreased in all three groups after the treatment rosella 

petal flower extract administration orally for 14 days (p

DAFTAR ISI 

SAMPUL DALAM............................................................................ i 

PRASYARAT GELAR..................................................................... ii 

LEMBAR PENGESAHAN............................................................... iii 

PENETAPAN PANITIA PENGUJI.................................................. iv 

UCAPAN TERIMA KASIH............................................................. v 

ABSTRAK......................................................................................... viii 

ABSTRACT....................................................................................... ix 

DAFTAR ISI...................................................................................... x 

DAFTAR TABEL.............................................................................. xv 

DAFTAR GAMBAR......................................................................... xvi 

DAFTAR SINGKATAN ................................................................... xvii 

DAFTAR LAMPIRAN...................................................................... xviii 

BAB I PENDAHULUAN ................................................................. 1 

1.1. Latar Belakang ....................................................................... 1 

1.2. Rumusan Masalah .................................................................. 6 

1.3. Tujuan Penelitian ................................................................... 6 

1.4. Manfaat Penelitian ................................................................. 6 

BAB II KAJIAN PUSTAKA ............................................................ 8 

Hal

2.1. Proses Penuaan ........................................................................... 8 

2.2. Radikal Bebas ............................................................................. 9 

2.2.1. Definisi Radikal Bebas .......................................................... 9 

2.2.2. Sumber Radikal Bebas ........................................................... 10 

2.2.3. Sifat Radikal Bebas ................................................................ 11 

2.3. Antioksidan ............................................................................ 12 

2.3.1. Definisi Antioksidan .............................................................. 12 

2.3.2. Jenis Antioksidan ................................................................... 13 

2.4. Stres Oksidasi ........................................................................ 14 

2.5. Malondialdehid (MDA) ......................................................... 15 

2.6. Rosela (Hibiscus sabdariffa L.) ............................................. 15 

2.6.1. Taksonomi ............................................................................. 15 

2.6.2. Nama Lain ............................................................................. 16 

2.6.3. Karakteristik dan Morfologi ................................................. 17 

2.6.4. Kandungan Senyawa Kimia .................................................. 18 

2.6.5. Manfaat Rosela ..................................................................... 18 

2.6.6. Toksisitas .............................................................................. 20 

2.7. Minyak Goreng Jelantah ....................................................... 20 

2.8. Dampak Minyak Jelantah terhadap Kesehatan ..................... 23 

2.9. Hewan Coba Tikus (Rattus novergicus L.) ........................... 25 

2.9.1. Penggunaan Tikus ................................................................. 25

2.9.2. Pemberian Makanan Dan Minuman ...................................... 26 

2.9.3. Pemantauan Keselamatan Tikus ............................................ 27 

BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP DAN HIPOTESIS ... 28 

3.1. Kerangka Berpikir ................................................................. 28 

3.2. Konsep ................................................................................... 29 

3.3. Hipotesis ................................................................................ 30 

BAB IV METODE PENELITIAN ................................................... 31 

4.1. Rancangan Penelitian ............................................................ 31 

4.2. Lokasi dan Waktu Penelitian ................................................. 32 

4.3. Subjek Penelitian ................................................................... 33 

4.3.1. Subjek Penelitian ................................................................... 33 

4.3.2. Kriteria Subjek ....................................................................... 33 

4.3.3. Besar Sampel ......................................................................... 33 

4.3.4. Teknik Penentuan Sampel ..................................................... 35 

4.4. Variabel Penelitian ................................................................ 35 

4.4.1. Klasifikasi Variabel Penelitian ............................................. 35 

4.4.2. Definisi Operasional Variabel ............................................... 36 

4.5. Bahan Penelitian .................................................................... 37 

4.6. Alat Penelitian ....................................................................... 38 

4.7. Prosedur Penelitian ................................................................ 38 

4.7.1. Pengambilan Subjek dan Jumlah Subjek Penelitian ............. 38

4.7.2. Penentuan Dosis .................................................................... 39 

4.7.3. Prosedur Kerja ...................................................................... 41 

4.7.4. Alur Penelitian ...................................................................... 43 

4.8. Analisis Data ......................................................................... 44 

BAB V HASIL PENELITIAN.......................................................... 45 

5.1. Uji Normalitas Data Kadar MDA........................................... 45 

5.2. Uji Homogenitas Varians Kadar MDA Antar Kelompok 

Sebelum dan Sesudah Perlakuan............................................ 46 

5.3. Kadar MDA............................................................................ 46 

5.3.1. Uji Komparabilitas Kadar MDA............................................ 46 

5.3.2. Analisis Efek Pemberian Minyak Goreng Jelantah antar 

Kelompok............................................................................... 47 

5.3.3. Analisis Efek Pemberian Ekstrak Kelopak Bunga Rosela 

antar Kelompok ..................................................................... 48 

BAB VI PEMBAHASAN HASIL PENELITIAN............................ 51 

6.1. Subjek Penelitian.................................................................... 51 

6.2. Pengaruh Ekstrak Kelopak Bunga Rosela terhadap Kadar 

MDA Darah............................................................................ 51 

BAB VII SIMPULAN dan SARAN.................................................. 56 

7.1 Simpulan................................................................................. 56 

7.2 Saran....................................................................................... 56

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................ 57 

LAMPIRAN……………………………………………………….. 62

DAFTAR TABEL 

Tabel 2.1. Data Biologis Tikus ................................................... 26 

Tabel 5.1. Hasil Uji Normalitas Kadar MDA ............................. 45 

Tabel 5.2. Homogenitas Kadar MDA antar Kelompok 

Perlakuan ................................................................... 46 

Tabel 5.3. Rerata Kadar MDA antar Kelompok Sebelum 

Diberi Minyak Jelantah .............................................. 46 

Tabel 5.4. Rerata Kadar MDA antar Kelompok Sesudah Diberi 

Minyak Jelantah (Pre Test) ........................................ 47 

Tabel 5.5. Perbedaan Rerata Kadar MDA antar Kelompok 

Sesudah Diberikan Ekstrak Kelopak Bunga Rosela 

(Post Test)................................................................... 48 

Tabel 5.6 Beda Nyata Terkecil Kadar MDA Sesudah Diberikan 

Ekstrak kelopak Bunga Rosela antar Dua Kelompok.. 49 

Hal

DAFTAR GAMBAR 

Gambar 3.1. Bagan Kerangka Konsep ........................................... 30 

Gambar 4.1. Rancangan Penelitian ................................................ 31 

Gambar 4.2. Hubungan Antar Variabel .......................................... 37 

Gambar 4.3. Skema Alur Penelitian ............................................... 43 

Gambar 5.1. Perbedaan Rerata Kadar MDA pada Kelompok 

Kontrol, Kelompok Perlakuan 1 dan Kelompok 

Perlakuan 2 ................................................................ 50 

Hal

SINGAKATAN 

AAM : Anti Aging Medicine 

KAP : Kedokteran Anti Penuaan 

DAFTAR SINGKATAN 

LSD : Least Significance Difference 

MDA : Malondialdehid 

MUFA : Mono Unsaturated Fatty Acid 

PUFA : Poly Unsaturated Fatty Acid 

ROS : Reactive Oxygen Species 

TBARS : Thiobarbituric Acid Reactive Substance

DAFTAR LAMPIRAN 

Lampiran 1. Tabel Konversi Perhitungan Dosis Laurence & 

Bacharach ................................................................... 62 

Lampiran 2. Uji Normalitas Data MDA Sebelum dan 

Sesudah Perlakuan ..................................................... 63 

Lampiran 3. Uji One Way Anova .................................................... 64

1.1. Latar Belakang 

BAB I 

PENDAHULUAN 

Pada umumnya manusia menginginkan hidup berumur panjang, mempunyai 

kualitas hidup yang baik, sehat dan berkualitas serta tidak mau tampak cepat tua. 

Untuk mencapai hal tersebut, maka manusia melakukan berbagai upaya untuk 

mencegah proses penuaan. 

Penuaan dapat digambarkan sebagai proses penurunan fungsi fisiologis tubuh 

secara bertahap yang mengakibatkan hilangnya kemampuan tumbuh dan kembang 

serta meningkatnya kelemahan (Bludau, 2010). 

Dengan berkembangnya Ilmu Kedokteran Anti Penuaan (KAP) atau Anti-Aging 

Medicine (AAM) tercipta suatu konsep baru dalam dunia kedokteran. AAM adalah 

bagian ilmu kedokteran yang didasarkan pada penggunaan ilmu pengetahuan dan 

teknologi kedokteran terkini untuk melakukan deteksi dini, pencegahan, pengobatan, 

dan perbaikan ke keadaan semula berbagai disfungsi, kelainan, dan penyakit yang 

berkaitan dengan penuaan, yang bertujuan untuk memperpanjang hidup dalam 

keadaan sehat. Dengan demikian, penuaan bukan lagi merupakan suatu keadaan 

normal yang memang harus terjadi, namun dianggap sama sebagai suatu penyakit, 

yang dapat dan harus dicegah atau diobati bahkan dikembalikan ke keadaan semula, 

sehingga berakibat usia harapan hidup manusia dapat menjadi lebih panjang dengan 

kualitas hidup yang baik (Pangkahila, 2007).

Proses penuaan dapat disebabkan oleh banyak hal, dapat disebabkan faktor dari 

luar, misalnya makanan yang tidak sehat, kebiasaan yang tidak sehat, polusi 

lingkungan, stres dan faktor kemiskinan, dan dapat disebabkan faktor dari dalam, 

salah satunya adalah radikal bebas (Pangkahila, 2007). Ada banyak teori tentang 

penuaan, di antaranya adalah teori radikal bebas yang dikemukakan oleh Gerschman 

pada tahun 1954 dan kemudian dikembangkan oleh Denham Harman pada tahun 

1982. Teori ini menjelaskan bahwa radikal bebas dapat merusak sel-sel dalam tubuh 

manusia. Penimbunan radikal bebas akan menyebabkan stres oksidatif yang pada 

akhirnya dapat menimbulkan kerusakan, bahkan kematian sel dalam tubuh (Goldman 

dan Klantz, 2003). 

Radikal bebas dapat berasal dari dalam dan dari luar tubuh. Yang berasal dari 

dalam tubuh, misalnya akibat proses respirasi sel, proses metabolisme, proses 

inflamasi, sedangkan yang berasal dari luar tubuh dapat disebabkan oleh karena 

polutan, seperti asap rokok, asap kendaraan bermotor, radiasi sinar matahari, 

makanan berlemak, kopi, alkohol, obat, minyak goreng jelantah, bahan racun 

pestisida, dan masih banyak lagi yang lainnya. Juga dapat dipicu oleh stres atau olah 

raga yang berlebihan (Pham-Huy et al., 2008). 

Pada penggunaaan minyak goreng jelantah, khususnya yang digunakan dengan 

cara deep frying dapat terbentuk radikal bebas. Yang dimaksud dengan minyak 

jelantah adalah minyak limbah yang bisa berasal dari berbagi jenis minyak goreng, 

minyak jelantah ini merupakan minyak bekas yang sudah dipakai untuk menggoreng 

berbagai jenis makanan dan sudah mengalami perubahan pada komposisi kimianya 

(Rukmini, 2007; Lestari, 2010). Sedangkan deep frying adalah cara menggoreng yang

menggunakan minyak goreng dalam jumlah banyak, dengan pemanasan berulang dan 

pada suhu yang tinggi (Sartika, 2009). Pemanasan yang lama atau berulang-ulang 

akan mempercepat terjadinya destruksi minyak akibat meningkatnya kadar peroksida. 

Hal tersebut terjadi karena pada saat pemanasan akan terjadi proses destruksi berupa 

degradasi, oksidasi dan dehidrasi dari minyak goreng. Proses ini dapat meningkatkan 

kadar peroksida dan pembentukan radikal bebas yang bersifat toksik, sehingga 

membahayakan bagi tubuh (Mulyati dan Meilina, 2007; Oktaviani, 2009). 

Radikal bebas dapat merusak makromolekul seperti protein, asam nukleat dan 

lipid. Radikal bebas menimbulkan reaksi rantai, misalnya peroksidasi lipid yang 

berdampak merusak komponen membran sel yang mengandung asam lemak tidak 

jenuh ganda menjadi senyawa toksis terhadap sel seperti malondialdehid, 9-hidroksi- 

noneal, F2-isoprostan, etana dan pentana (Murray et al., 2000). Malondialdehid 

(MDA) merupakan salah satu petanda terjadinya kerusakan oksidatif oleh radikal 

bebas pada membran sel (Suryohudoyo, 2000). 

Untuk mencegah terjadinya efek buruk dari radikal bebas diperlukan antioksidan. 

Penggunaan antioksidan mulai marak akhir-akhir ini seiring dengan semakin 

meningkatnya pemahaman pada masyarakat tentang peranan antioksidan dalam 

menghambat penyakit-penyakit degeneratif seperti penyakit jantung, arteriosklerosis, 

penyakit kanker dan gejala penuaan (Goldman dan Klantz, 2003; Kuncahyo dan 

Sunardi, 2007). Antioksidan merupakan suatu senyawa yang dapat menghambat atau 

mencegah terjadinya oksidasi. Cara kerja senyawa antioksidan adalah (Utami et al., 

2009):

1. Bereaksi dengan radikal bebas reaktif membentuk radikal bebas tidak reaktif 

yang relatif stabil. 

2. Antioksidan menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi kekurangan 

elektron yang dimiliki radikal bebas. 

3. Menghambat terjadinya reaksi rantai dari pembentukan radikal bebas. 

Rosela (Hibiscus sabdariffa L.) merupakan salah satu tanaman yang dapat 

dijadikan sebagai sumber antioksidan. Di beberapa daerah, masyarakat menggunakan 

kelopak bunga rosela ini sebagai teh, biasanya disebut dengan teh merah. 

Menurut DEPKES RI. kelopak bunga rosela mengandung vitamin C, vitamin D, 

vitamin B1, B2, niacin, riboflavin, betakaroten, zat besi, asam amino, polisakarida, 

omega 3, kalsium. Tiap 100 gram kelopak bunga rosela mengandung vitamin C yang 

cukup tinggi, yaitu sekitar 260-280 mg (Maryani dan Kristiana, 2008). 

Banyak penelitian yang dilakukan untuk mengetahui kandungan dan manfaat 

rosela. Pada penelitian yang dilakukan Arellano et al. (2004), didapat kandungan 

vitamin A, vitamin C, theaflavins, cathecins. Kandungan theaflavins dan cathecins 

membantu menjaga kolesterol dalam darah dengan cara membatasi penyerapan 

kolesterol dan meningkatkan pembuangan kolesterol LDL dari hati. Vitamin C 

berfungsi dalam menetralisir lemak dalam tubuh, sehingga bermanfaat untuk body 

slimming, body firming. Vitamin A dan vitamin C menjaga, mempertahankan dan 

meningkatkan kesehatan tubuh serta mencegah penuaan dini dan munculnya katarak. 

Vitamin A, vitamin C dan kalsium berguna untuk kesehatan mata, kulit dan tulang 

sedangkan serat untuk memperbaiki sistem pencernaan. Pada penelitian lain tentang 

efek kelopak bunga rosela terhadap kerusakan sel hati tikus, ditemukan senyawa

polifenol (Liu et al., 2002; Lin et al., 2003), dan anthocyanidins (Lazze et al., 2003; 

Ojokoh et al., 2006). Amin dan Hamza (2005) yang meneliti efek hepatoprotektif 

rosela mendapatkan kandungan flavanoid. Flavonoid yang terdapat dalam kelopak 

bunga rosela bermanfaat untuk mencegah kanker, terutama karena radikal bebas, 

seperti kanker lambung dan leukemia. Selain itu flavonoid juga mempunyai efek 

protektif terhadap penyakit kardiovaskular termasuk hipertensi (Kusmardiyana et al., 

2007). 

Jadi kelopak bunga rosela mengandung antioksidan, asam amino, vitamin, 

mineral, dan lain-lain. Kandungan antioksidan kelopak bunga rosela antara lain: 

vitamin C, vitamin E, beta karoten, omega 3, flavanoid. Antioksidan berperan penting 

dalam konsep Ilmu KAP dalam meredam efek buruk dari radikal bebas, salah satu 

penyebab proses penuaan (Pangkahila, 2007). 

Dari keterangan di atas dapat disimpulkan, penggunaan minyak goreng jelantah 

yang banyak terjadi di masyarakat dapat menyebabkan pembentukan radikal bebas, 

sehingga dapat menyebabkan terjadinya stres oksidatif yang berakibat terjadinya 

kerusakan, bahkan kematian sel. Hal ini bisa ditanggulangi dengan pemakaian 

kelopak bunga rosela yang mengandung antioksidan. 

Berdasarkan pengamatan penulis, belum ada penelitian ilmiah yang dilakukan 

untuk membuktikan manfaat dari kelopak bunga rosela dalam menurunkan 

malondialdehid yang diakibatkan oleh pemakaian minyak goreng jelantah. Oleh 

karena itu penulis melakukan penelitian untuk mengetahui apakah pemberian ekstrak 

kelopak bunga rosela dapat menurunkan malondialdehid (MDA) pada tikus putih

(Rattus norvegicus L.) jantan galur Wistar sehat yang diberi/diinduksi minyak goreng 

jelantah. 

1.2. Rumusan Masalah 

Dari uraian di atas dapat dibuat rumusan masalah sebagai berikut: Apakah 

pemberian ekstrak kelopak bunga rosela dapat menurunkan MDA pada tikus jantan 

(Rattus novergicus L.) galur Wistar yang diberi minyak goreng jelantah? 

1.3. Tujuan Penelitian 

1. Tujuan Umum 

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek pemberian antioksidan dalam 

menurunkan terjadinya kerusakan oksidatif. 

2. Tujuan Khusus 

Untuk mengetahui pemberian ekstrak kelopak bunga rosela dapat menurunkan 

MDA pada tikus jantan galur Wistar yang diinduksi minyak goreng jelantah. 

1.4. Manfaat Penelitian 

1. Manfaat Ilmiah 

Memberikan informasi ilmiah mengenai peranan pemberian ekstrak kelopak 

bunga rosela dalam menurunkan malondialdehid pada tikus jantan galur Wistar yang 

diberi minyak goreng jelantah. 

2. Manfaat Praktis

Memberikan informasi bahwa pemberian ekstrak kelopak bunga rosela 

menurunkan malondialdehid yang merupakan salah satu hasil dari terjadinya 

kerusakan oksidatif, salah satu penyebab penting terjadinya proses penuaan. Selain 

itu, hasil dari penelitian ini diharapkan dapat menjadi bahan pertimbangan bagi 

penelitian selanjutnya.

2.1. Proses Penuaan 

BAB II 

KAJIAN PUSTAKA 

Penuaan dapat digambarkan sebagai proses penurunan fungsi fisiologis tubuh 

secara bertahap yang mengakibatkan hilangnya kemampuan tumbuh dan kembang 

serta meningkatnya kelemahan (Bludau,2010). Banyak faktor yang mempengaruhi 

terjadinya proses penuaan. Faktor-faktor ini terbagi menjadi faktor internal meliputi 

radikal bebas, genetik, hormon yang berkurang dan faktor eksternal meliputi pola 

hidup tidak sehat, diet tidak sehat, stres, dan polusi lingkungan. Faktor-faktor ini 

dapat dicegah, diperlambat bahkan mungkin dihambat, sehingga usia harapan hidup 

dapat lebih panjang dengan kualitas hidup yang baik (Pangkahila, 2007). 

Bermodalkan kesadaran tentang pentingnya menjaga kesehatan dan menghindari 

berbagai faktor penyebab proses penuaan dilengkapi dengan pengobatan, masyarakat 

memiliki kesempatan untuk hidup lebih sehat dan berusia lebih panjang dengan 

kualitas hidup yang baik (Pangkahila, 2007). 

Beberapa upaya yang dapat dilakukan untuk menghambat proses penuaan antara 

lain adalah menjaga kesehatan tubuh dan jiwa dengan pola hidup sehat meliputi 

berolahraga teratur, makanan sehat dan cukup, atasi stres, melakukan pemeriksaan 

kesehatan berkala yang diperlukan dan disesuaikan dengan kondisi, menggunakan 

obat dan suplemen yang diperlukan sesuai petunjuk ahli untuk mengembalikan fungsi 

berbagai organ tubuh yang menurun. Namun, terdapat pula hambatan atau kesulitan 

melakukan upaya menghambat proses penuaan, antara lain karena lingkungan tidak

sehat, pengetahuan rendah dan budaya yang tidak benar. Yang juga termasuk 

hambatan adalah adanya pola hidup yang tidak sehat seperti diet yang tinggi 

karbohidrat dan lemak jenuh (Pangkahila, 2007). 

Dengan berkembangnya AAM tercipta suatu konsep baru dalam dunia 

kedokteran. AAM adalah bagian ilmu kedokteran yang didasarkan pada penggunaan 

ilmu pengetahuan dan teknologi kedokteran terkini untuk melakukan deteksi dini, 

pencegahan, pengobatan, dan perbaikan ke keadaan semula berbagai disfungsi, 

kelainan, dan penyakit yang berkaitan dengan penuaan, yang bertujuan untuk 

memperpanjang hidup dalam keadaan sehat. Dengan demikian, penuaan bukan lagi 

suatu keadaan normal yang memang harus terjadi, namun dianggap sama sebagai 

penyakit yang dapat dan harus dicegah atau diobati bahkan dikembalikan ke keadaan 

semula, sehingga usia harapan hidup dapat menjadi lebih panjang dengan kualitas 

hidup yang baik (Pangkahila, 2007). 

2.2. Radikal Bebas 

2.2.1. Definisi Radikal Bebas 

Radikal bebas adalah atom atau molekul yang memiliki elektron yang tidak 

berpasangan (unpaired electron) pada bagian terluar orbitnya, sehingga menjadi 

komponen yang tidak stabil dan menjadi sangat reaktif. Elektron yang tidak 

berpasangan ini, akan berusaha menarik elektron dari molekul lainnya untuk 

mendapatkan kembali konfigurasi pasangan elektron, oleh karena itu radikal bebas 

sangat reaktif. Sebuah radikal bebas yang berhasil mengambil elektron dari suatu 

molekul lain yang stabil, akan menyebabkan molekul tersebut kehilangan satu

elektron dan akibatnya akan berubah menjadi radikal bebas baru. Proses rantai ini 

dapat menyebabkan perubahan struktur pada molekul lainnya (Pham-Huy et al., 

2008). 

Dalam kepustakaan kedokteran, pengertian radikal bebas sering dibaurkan 

dengan oksidan, karena keduanya memiliki sifat-sifat yang mirip. Aktivitas keduanya 

sering menghasilkan akibat yang sama, akan tetapi sebenarnya melalui proses yang 

berbeda. Keduanya harus dibedakan. Oksidan mempunyai pengertian senyawa 

penerima elektron (electron acceptor). Jadi radikal bebas adalah oksidan, tetapi tidak 

semua oksidan merupakan radikal bebas (Suryohudoyo, 2000). 

2.2.2. Sumber Radikal Bebas 

Pembentukan radikal bebas dapat berasal dari dalam tubuh dan luar tubuh. 

Adapun sumber radikal bebas antara lain (Pham-Huy et al., 2008): 

1. Radikal bebas yang berasal dari dalam tubuh, yang timbul sebagai akibat dari 

berbagai proses enzimatik di dalam tubuh, berupa hasil sampingan dari proses 

oksidasi atau pembakaran sel yang berlangsung pada proses respirasi sel, pada 

proses pencernaan dan pada proses metabolisme. Diproduksi oleh mitokondria, 

membran plasma, lisosom, retikulum endoplasma, dan inti sel. 

2. Radikal bebas yang berasal dari dalam tubuh, yang timbul sebagai akibat dari 

bermacam-macam proses non-enzimatik di dalam tubuh, merupakan reaksi 

oksigen dengan senyawa organik dengan cara ionisasi dan radiasi. Contohnya 

adalah proses inflamasi dan iskemia. 

3. Radikal bebas yang berasal dari luar tubuh, yang didapat dari polutan, seperti asap 

rokok, asap kendaraan bermotor, radiasi sinar matahari, makanan berlemak, kopi,

alkohol, obat, bahan racun, pestisida, minyak goreng jelantah (deep frying) dan 

masih banyak lagi yang lainnya. Peningkatan radikal bebas pun dapat dipicu oleh 

stres atau olah raga yang berlebihan. 

2.2.3. Sifat Radikal Bebas 

Radikal bebas memiliki dua sifat, yaitu : 

1. Reaktivitas tinggi, karena kecenderungannya menarik elektron. 

2. Dapat mengubah suatu molekul menjadi suatu radikal oleh karena hilangnya 

atau bertambahnya satu elektron pada molekul lain. 

Namun perlu diingat, bahwa radikal bebas adalah oksidan, tetapi tidak setiap 

oksidan adalah radikal bebas. Radikal bebas lebih berbahaya dibanding dengan 

oksidan yang bukan radikal. Hal ini disebabkan oleh kedua sifat radikal bebas di atas, 

yaitu reaktivitas yang tinggi dan kecenderungan membentuk radikal bebas baru, yang 

pada gilirannya nanti apabila menjumpai molekul lain akan membentuk radikal baru 

lagi, sehingga terjadilah reaksi rantai (chain reaction) (Halliwell dan Gutteridge, 

2007). 

Perusakan sel oleh radikal bebas reaktif didahului oleh kerusakan membran sel, 

melalui terjadinya rangkaian proses sebagai berikut (Halliwell dan Gutteridge, 

2007): 

1. Terjadi ikatan kovalen antara radikal bebas dengan komponen-komponen membran 

(enzim-enzim membran, komponen karbohidrat membran plasma), sehingga 

terjadi perubahan struktur dari fungsi reseptor. 

2. Oksidasi gugus tiol pada komponen membran oleh radikal bebas yang 

menyebabkan proses transpor lintas membran terganggu.

3. Reaksi peroksidasi lipid dan kolesterol membran yang mengandung asam lemak 

tidak jenuh majemuk (PUFA = poly unsaturated fatty acid). Hasil peroksidasi 

lipid membran oleh radikal bebas, berefek langsung terhadap kerusakan pada 

membran sel, antara lain dengan mengubah fluiditas, struktur dan fungsi 

membran, dalam keadaan yang lebih ekstrim akhirnya akan menyebabkan 

kematian sel. 

Efek biologik peroksidasi lipid membran bergantung antara lain pada populasi 

sel yang bersangkutan dan profil asam lemak pada membran fosfolipid. Contoh 

membran mitokondria dan mikrosom sensitif terhadap peroksidasi lipid karena 

kandungan PUFA pada fosfolipid membran cukup tinggi. Umumnya semua membran 

peka terhadap reaksi peroksidasi lipid dalam derajat yang berbeda-beda. Kerusakan 

struktur subseluler secara langsung mempengaruhi pengaturan metabolisme. Sebagai 

contoh adalah disrupsi membran lisosom menyebabkan pelepasan enzim-enzim 

hidrolitik lisosom yang selanjutnya mampu mengakibatkan perusakan intraseluler, 

dan memperkuat kemampuan radikal bebas dalam menginduksi kerusakan sel 

(Halliwell dan Gutteridge, 2007). 

2.3. Antioksidan 

2.3.1. Definisi Antioksidan 

Kalau radikal bebas adalah penerima elektron (electron acceptor), maka 

antioksidan adalah pemberi elektron (electron donor). Antioksidan dapat 

didefinisikan sebagai suatu zat yang dapat menghambat/memperlambat proses 

oksidasi. Oksidasi adalah jenis reaksi kimia yang melibatkan pengikatan oksigen,

pelepasan hidrogen atau pelepasan elektron. Proses oksidasi adalah peristiwa alami 

yang terjadi di alam dan dapat terjadi dimana-mana, tak terkecuali di dalam tubuh 

kita (Halliwell dan Gutteridge, 2007). 

Dalam pengertian kimia, antioksidan adalah senyawa-senyawa pemberi elektron, 

tetapi dalam arti biologis pengertian antioksidan lebih luas lagi, yaitu semua senyawa 

yang dapat meredam dampak negatif oksidan, termasuk enzim-enzim dan protein- 

protein pengikat logam (Pangkahila, 2007). 

2.3.2. Jenis Antioksidan 

Berdasarkan dua mekanisme pencegahan dampak negatif oksidan, maka 

antioksidan dapat dibagi menjadi dua golongan (Murray et al., 2000), yaitu: 

1. Antioksidan pencegah (preventive antioxidants) 

Pada dasarnya tujuan antioksidan ini mencegah terjadinya radikal hidroksil, yaitu 

radikal yang paling berbahaya. Diperlukan tiga komponen untuk terbentuknya radikal 

hidroksil, yaitu logam transisi Fe atau Cu, H2O2 dan ion superoksid. Agar reaksi 

Fenton tidak terjadi, maka harus dicegah keberadaan ion Fe 2+ atau Cu 2+ bebas. Untuk 

itu berperan beberapa protein penting, yaitu transferin atau feritin (untuk Fe) dan 

seruloplasmin atau albumin (untuk Cu). 

Penimbunan ion superoksid (O2 - ) dapat dicegah oleh enzim SOD (superoksid 

dismutase) dengan mengkatalisis reaksi dismutase ion superoksid: 

2O2 - + 2H + H2O2 + O2 

Penimbunan H2O2 dapat dicegah melalui aktivitas dua enzim, yaitu katalase 

(mengkatalisis reaksi dismutasi H2O2) dan peroksidase. 

2. Antioksidan pemutus rantai (chain-breaking antioxidants)

Dalam kelompok ini terdapat vitamin E (tokoferol), vitamin C (asam askorbat), 

beta karoten, glutation dan sistein. Vitamin E dan beta karoten bersifat lipofilik, 

sehingga dapat berperan pada membran sel untuk mencegah peroksidasi lipid. 

Sedangkan vitamin C, glutation dan sistein bersifat hidrofilik dan berperan dalam 

sitosol. 

2.4. Stres Oksidasi 

Stres oksidasi (oxidative stress) secara terminologi menunjukkan adanya 

produksi radikal bebas yang berlebihan melebihi kapasitas perlindungan antioksidan. 

Radikal bebas adalah substansi yang mempunyai satu atau lebih elektron tidak 

berpasangan. Radikal bebas yang berasal dari oksigen diklasifikasikan sebagai 

Reactive Oxigen Species (ROS), termasuk disini radikal superoksida (O2 - ), radikal 

hidroksil (OH + ) dan radikal hidrogen peroksida (H2O2). Enzim yang berperan dalam 

peningkatan produksi ion superoksid termasuk rantai transport elektron mitokondria, 

NAD(P)H Oxidase, dan Xanthin Oxidase, serta e NOS (Rush et al., 2005). 

Di dalam tubuh, ROS secara konstan diproduksi dan dieliminasi, selama sel 

masih memiliki pertahanan endogen melawan zat oksidan tersebut. Diduga bahwa 

kadar yang rendah ROS berperanan dalam fisiologi signaling antar sel secara normal, 

atau penting untuk memelihara homeostasis. Sedangkan produksi ROS yang 

berlebihan atau terjadinya kerusakan perlindungan terhadap ROS menimbulkan stres 

oksidasi, sehingga mengakibatkan terjadinya beberapa kelainan patologis (Rush et 

al., 2005).

Stres oksidasi menyebabkan kerusakan oksidatif terhadap lemak, protein, dan 

DNA. ROS dapat memicu proses peroksidasi terhadap lipid. Peroksida lipid tidak 

saja bertanggung jawab atas perusakan makanan, tetapi yang lebih penting adalah 

perusakan jaringan tubuh in vivo, sehingga dapat menimbulkan berbagai macam 

penyakit, seperti penyakit kanker, inflamasi, aterosklerosis, dan proses penuaan. 

Peroksidasi terhadap lipid dalam membran sel akan sangat mengganggu fungsi 

membran, menimbulkan kerusakan yang ireversibel terhadap fluiditas dan elastisitas 

membran, yang dapat menyebabkan ruptur membran sel (Szocs, 2004). Untuk 

mengetahui terjadinya peroksida lipid salah satunya adalah dengan mengukur kadar 

MDA (Suryohudoyo, 2000). 

2.5. Malondialdehid (MDA) 

MDA merupakan produk akhir dari peroksidasi lipid, dan biasanya digunakan 

sebagai biomarker biologis untuk menilai stres oksidatif (Suryohudoyo, 2000). 

Pada proses peroksidasi lipid, selain MDA terbentuk juga radikal bebas yang lain, 

tetapi radikal bebas tersebut mempunyai waktu paruh yang pendek sehingga sulit 

diperiksa dalam laboratorium (Cherubini et al., 2005). 

Pengukuran kadar MDA serum dapat dilakukan dengan Test thiobarbituric acid- 

reactive subtance (TBARS) yang berdasar pemeriksaan reaksi spektrofotometrik 

(Konig dan Berg, 2002). 

2.6. Rosela (Hibiscus sabdariffa L.) 

2.6.1. Taksonomi

Klasifikasi tanaman rosela adalah (Mardiah et al., 2009): 

Regnum : Plantae 

Superdivisi : Spermatophyta 

Divisi : Magnoliophyta 

Kelas : Magnoliopsida 

Subkelas : Dilleniidae 

Ordo : Malvales 

Familia : Malvaceae 

Genus : Hibiscus L. 

Spesies : Hibiscus sabdariffa L. 

2.6.2. Nama Lain 

Tanaman rosela dapat tumbuh baik di daerah yang beriklim tropis dan yang 

beriklim subtropis. Tanaman ini mempunyai habitat asli yang sangat luas, terbentang 

dari India hingga Malaysia, namun saat ini tanaman rosela telah tersebar luas di 

daerah tropis dan subtropis di seluruh dunia. Karena itu rosela mempunyai nama 

umum yang berbeda-beda di berbagai daerah (Mardiah et al., 2009). 

Tumbuhan Hibiscus sabdariffa Linn ini dalam bahasa Indonesia disebut rosela. 

Hibiscus sabdariffa Linn di daerah Sunda dikenal dengan nama gamel walanda, di 

daerah Ternate dengan nama kasturi rortha, di daerah Jawa Tengah dengan nama 

mrambos hijau, di daerah Padang dengan nama asam jarot, di daerah Sumatra Selatan 

dengan nama kesew jawe, dan di daerah Muara Enim dikenal dengan nama asam 

rejang (Maryani dan Kristiana, 2008; Mardiah et al., 2009).

Di Malaysia, rosela dikenal sebagai asam susur, asam paya, atau asam kumbang. 

Di Cina dikenal lou shen kui, lou shen hua. Di Thailand dikenal sebagai kachieb 

priew. Di Belanda dikenal Zuring, dan di Sinegal dikenal sebagai bisap. Di Inggris 

dikenal dengan roselle, rozelle, sorrel, sour-sour, queensland jelly plant, jelly okra, 

lemon bush dan florida cranberry. Di Afrika Utara dikenal karkade atau carcade. 

Nama carcade inilah yang dipakai sebagai nama dagang rosela, baik dalam dunia 

pengobatan maupun sebagai bahan makanan di benua Eropa (Mardiah et al., 2009). 

2.6.3. Karakteristik dan Morfologi 

Tanaman rosela merupakan herba tahunan yang bergetah. Tinggi tanaman ini 

dapat mencapai ketinggian 0.5–3 meter, serta mengeluarkan bunga hampir sepanjang 

tahun. Batangnya berbentuk bulat, tegak, berkayu dan berwarna merah. Daunnya 

berupa daun tunggal, berbentuk bulat telur, pertulangan daunnya menjari, berujung 

tumpul, tepi bergerigi dan dengan pangkal berlekuk. Panjang daunnya 6-15 cm dan 

dengan lebar daun 5-8 cm. Tangkai daun bulat berwarna hijau dengan panjang 4-7 cm 

(Mardiah et al., 2009). 

Bunga tanaman rosela yang keluar dari ketiak daun merupakan bunga tunggal, 

artinya pada setiap tangkai tanaman rosella hanya terdapat satu bunga. Bunga dari 

tanaman rosela ini mempunyai 8-11 helai kelopak bunga yang berbulu dengan 

panjang sekitar 1 cm, dengan pangkal yang saling berlekatan, dan berwarna merah. 

Kelopak bunga ini sering dianggap sebagai bunga oleh masyarakat, bagian inilah 

yang sering dimanfaatkan sebagai bahan makanan dan minuman (Maryani dan 

Kristiana, 2008). Mahkota bunga berbentuk corong terdiri dari 5 helaian, panjangnya 

sekitar 3-5 cm. Tangkai sari yang merupakan tempat melekatnya kumpulan benang

sari berukuran pendek dan tebal, panjang sekitar 5 mm dan lebar sekitar 5 mm. Putik 

berbentuk tabung berwarna kuning atau merah (Mardiah et al., 2009). 

Buah berbentuk kotak kerucut, berambut, terbagi menjadi 5 ruang, berwarna 

merah. Bentuk biji menyerupai ginjal, berbulu dengan panjang 5 mm dan lebar 4 mm. 

Saat masih muda, biji berwarna putih dan setelah tua berubah menjadi abu-abu 

(Mardiah et al., 2009; Devi, 2009). 

2.6.4. Kandungan Senyawa Kimia 

Bahan aktif dari kelopak bunga rosela adalah grossypeptin, antosianin, gluside 

hibiscin dan flavonoid. Menurut DEPKES RI. kelopak bunga rosela mengandung 

vitamin C, vitamin D, vitamin B1, B2, niacin, riboflavin, betakaroten, zat besi, asam 

amino, polisakarida, omega 3, kalsium. Rasa asam dari kelopak bunga rosela 

disebabkan kandungan vitamin C, asam sitrat dan asam glikolik (Maryani dan 

Kristiana, 2008). 

Hasil studi kimia pada kelopak bunga kering H.sabdariffa L. ditemukan 

alumunium, chromium, copper, besi (Arellano et al., 2004), polifenol (Liu et al., 

2002; Lin et al., 2003), anthocyanidins (Lazze et al., 2003; Ojokoh et al., 2006), 

asam polisakarida heterogen dan komponen fenol termasuk gossypetine-3-glycoside, 

flavonoid (Amin dan Hamza, 2005). 

2.6.5. Manfaat Rosela 

Rosela dilaporkan memiliki efek antiseptik, aphrodisiak, astringent, diuretik, 

emolien, sedatif, dan tonik (Okasha et al., 2008). 

Karakteristik fisiokimia kelopak bunga rosela memiliki kadar vitamin C yang 

tinggi dengan kandungan gula yang rendah, juga mengandung asam suksinat dan

asam oksalat yang merupakan dua asam organik yang dominan. Rosela memiliki 

kandungan asam askorbat yang lebih tinggi daripada jeruk dan mangga. Kelopak 

bunga rosela mengandung vitamin A dan 18 jenis asam amino yang diperlukan 

tubuh. Salah satunya adalah arginin yang berperan dalam proses peremajaan sel 

tubuh. Di samping itu, rosela juga mengandung protein, kalsium, dan unsur-unsur 

lain yang berguna bagi tubuh. Asam amino yang terdapat dalam tanaman ini antara 

lain arginine, cystine, histidine, isoleucine, leucine, lysine, methionine, 

phenylalanine, threonine, trytophan, tyrosine, valine, aspartic acid, glutamic acid, 

alanine, glycine, proline dan serine (Okasha et al., 2008). 

Kandungan theaflavins dan cathecins membantu mengontrol kadar kolesterol 

dalam darah, dengan cara membatasi penyerapan kolesterol dan meningkatkan 

pembuangan kolesterol LDL dari hati. Sedangkan vitamin C dapat berfungsi untuk 

menetralisir lemak dalam tubuh, sehingga cukup bermanfaat untuk body slimming, 

body firming. Selain itu, kandungan vitamin C yang tinggi secara farmakologis 

berfungsi dalam membantu penyerapan semua vitamin dan mineral. Vitamin dan 

mineral membantu metabolisme tubuh. Vitamin A dan vitamin C mempunyai fungsi 

menjaga dan meningkatkan kesehatan tubuh serta mencegah penuaan dini dan 

munculnya katarak. Vitamin C sebagai salah satu antioksidan eksternal. Kandungan 

kalsium yang tinggi sangat membantu pertumbuhan serta kekuatan tulang dan gigi. 

Vitamin A, vitamin C dan kalsium berguna untuk kesehatan mata, kulit dan tulang 

sedangkan serat untuk memperbaiki sistem pencernaan (Arellano et al., 2004). 

Flavonoid dalam kelopak bermanfaat untuk mencegah kanker, terutama yang 

dikarenakan radikal bebas, seperti kanker lambung dan leukimia. Selain itu flavonoid

juga mempunyai efek protektif terhadap penyakit-penyakit kardiovaskular termasuk 

hipertensi (Kusmardiyana et al., 2007). Senyawa flavonoid dapat menghambat 

pertumbuhan mikroorganisme, karena mampu membentuk senyawa kompleks dengan 

protein melalui ikatan hidrogen. Polifenol atau fenol bekerja sebagai antibakteri 

dengan cara mendenaturasi protein sel dan merusak membran plasma (Arellano et al., 

2004). 

2.6.6. Toksisitas 

Toksisitas ekstrak kelopak bunga rosela sangat rendah, LD 50 dari ekstrak 

kelopak bunga rosela tersebut ditemukan di atas 5000 mg/kg, penelitian dilakukan 

pada tikus (Ali et al., 2005). 

2.7. Minyak Goreng Jelantah 

Berdasarkan ada atau tidak ikatan ganda dalam struktur molekulnya, minyak 

goreng terbagi menjadi (Ketaren, 2005): 

a. Minyak dengan asam lemak jenuh (saturated fatty acids). 

Merupakan asam lemak yang mengandung ikatan tunggal pada rantai 

hidrokarbonnya. Bersifat stabil dan tidak mudah bereaksi atau berubah menjadi 

asam lemak jenis lain. Asam lemak jenuh yang terkandung dalam minyak goreng 

pada umumnya terdiri dari asam miristat, asam palmitat, asam laurat dan asam 

kaprat. 

b. Minyak dengan asam lemak tak jenuh tunggal (mono-unsaturated fatty 

acids/MUFA) maupun majemuk (poly-unsaturated fatty acids/PUFA).

Merupakan asam lemak yang memiliki ikatan atom karbon rangkap pada rantai 

hidrokarbonnya. Semakin banyak jumlah ikatan rangkap itu (poly-unsaturated), 

semakin mudah bereaksi atau berubah menjadi asam lemak jenuh. Asam lemak 

tidak jenuh yang terkandung dalam minyak goreng adalah asam oleat dan asam 

linoleat dan asam linolenat. 

Minyak yang baik adalah minyak dengan kandungan asam lemak tak jenuh yang 

lebih banyak dibandingkan dengan kandungan asam lemak jenuhnya, salah satunya 

adalah minyak nabati. Minyak goreng jenis ini mengandung sekitar 80% asam lemak 

tak jenuh, kecuali minyak goreng kelapa sawit (Sartika, 2009). 

Minyak goreng kelapa sawit dibuat melalui dua fase yang berbeda, yaitu fase padat 

disebut stearin dengan asam lemaknya stearat dan fase cair disebut olein dengan asam 

lemaknya oleat. Dengan penyaringan (pemisahan fase padat dari fase cair) sebanyak 

2 kali, kandungan asam lemak tak jenuh dalam minyak kelapa sawit menjadi lebih 

tinggi sehingga minyak menjadi lebih mudah rusak oleh proses penggorengan deep 

frying (Sartika, 2009; Lestari, 2010). 

Yang dimaksud dengan minyak goreng jelantah adalah minyak limbah yang bisa 

berasal dari berbagi jenis minyak goreng, minyak jelantah ini merupakan minyak 

bekas yang sudah dipakai untuk menggoreng berbagai jenis makanan dan sudah 

mengalami perubahan pada komposisi kimianya (Rukmini, 2007; Lestari, 2010). 

Sedangkan deep frying adalah cara menggoreng yang menggunakan minyak goreng 

dalam jumlah banyak, dengan pemanasan berulang dan pada suhu yang tinggi 

(Sartika, 2009). Pemanasan yang lama atau berulang-ulang akan mempercepat 

terjadinya destruksi minyak akibat meningkatnya kadar peroksida. Hal tersebut

terjadi karena pada saat pemanasan akan terjadi proses destruksi berupa degradasi, 

oksidasi dan dehidrasi dari minyak goreng. Proses ini dapat meningkatkan kadar 

peroksida dan pembentukan radikal bebas yang bersifat toksik, sehingga 

membahayakan tubuh (Mulyati dan Meilina, 2007; Oktaviani, 2009). 

Temperatur pada proses penggorengan adalah sekitar 150-200 0 C. Pada 

temperatur tersebut, setiap bahan pangan rata-rata memerlukan waktu 8 menit untuk 

matang. Minyak goreng akan diganti atau ditambahkan dengan minyak baru bila 

sudah digunakan untuk menggoreng tiga kali atau lebih. Proses penggorengan di atas 

dapat menyebabkan minyak goreng kelapa sawit menjadi rusak karena proses 

oksidasi (Andik, 2001). 

Selama proses penggorengan, minyak mengalami reaksi degradasi yang 

disebabkan oleh panas, udara, dan air, sehingga mengakibatkan terjadinya oksidasi, 

hidrolisis, dan polimerisasi. Reaksi oksidasi juga dapat terjadi selama masa 

penyimpanan (Lee et al., 2002). 

Reaksi oksidasi terjadi akibat serangan oksigen terhadap asam lemak tak jenuh 

yang terkandung dalam minyak kelapa sawit. Reaksi antara oksigen dengan lemak 

akan membentuk senyawa peroksida yang selanjutnya akan membentuk asam lemak 

bebas, aldehida dan keton yang menimbulkan bau yang tidak enak pada minyak 

(ketengikan) (Herawati dan Akhlus, 2006). 

Oksidasi dapat terjadi melalui dua jenis mekanisme, yaitu auto-oksidasi dan foto- 

oksidasi. Reaksi auto-oksidasi melibatkan pembentukan radikal bebas yang sangat 

tidak stabil, yang merupakan inisiator terjadinya reaksi rantai. Pada reaksi foto- 

oksidasi, terjadi interaksi antara ikatan rangkap minyak dan radikal oksigen bebas

yang sangat reaktif. Kedua jenis reaksi oksidasi ini menghasilkan produk reaksi 

primer, yaitu hidroperoksida, yang sangat tidak stabil. Senyawa ini bukan penyebab 

terjadinya perubahan rasa dan bau yang berkaitan dengan oxidative rancidity. Namun 

karena sifatnya yang tidak stabil, hidroperoksida akan segera terdekomposisi dan 

menghasilkan produk reaksi sekunder, misalnya senyawa aldehid, yang merupakan 

penyebab adanya oxidative rancidity (Azeredo et al., 2004). 

Oksidasi juga dapat menyebabkan warna minyak menjadi gelap, tetapi 

mekanisme terjadinya komponen yang menyebabkan warna gelap ini masih belum 

sepenuhnya diketahui. Diperkirakan bahwa senyawa berwarna pada bahan yang 

digoreng terlarut dalam minyak dan menyebabkan terbentuknya warna gelap 

(Yustinah, 2009). 

Pemberian minyak jelantah pada tikus menyebabkan kenaikan kadar MDA, 

dimana kadar MDA dapat mencapai konsentrasi 0,285 mg/ml. Sedangkan pada 

keadaan normal konsentrasi MDA tikus adalah 0,1 mg/ml. Ini menunjukkan bahwa 

antioksidan yang ada di dalam hewan coba tidak mencukupi untuk menangkal radikal 

bebas yang disebabkan pemberian minyak jelantah (Ulilalbab, 2010). 

2.8. Dampak Minyak Jelantah terhadap Kesehatan 

Ketika lemak masuk ke dalam makanan dapat terjadi modifikasi terhadap 

komposisi makanan. Perubahan yang dihasilkan bergantung pada beragam faktor, 

seperti komposisi lemak yang digoreng dan yang dikandung dalam makanan tersebut, 

tekstur, ukuran, bentuk makanan dan kondisi penggorengan seperti lama durasi dan 

temperatur. Faktor-faktor terkait mempengaruhi perubahan yang terjadi pada nilai

nutrisi makanan. Perubahan ini dapat meliputi hilangnya nutrisi terutama vitamin dan 

mineral (Ghidurus et al.,2010). 

Pada umumnya makanan hasil penggorengan mengandung 4% - 14% lemak dari 

total beratnya. Kualitas minyak goreng yang digunakan juga mempengaruhi 

penyerapan minyak ke dalam makanan. Penggunaan minyak jelantah akan meningkat 

polaritas minyak dan menurunkan tegangan permukaannya antara bahan pangan dan 

minyak sehingga penyerapan lemak akan semakin meningkat (Ghidurus et al.,2010). 

Selain menyerap minyak, makanan yang digoreng menggunakan minyak jelantah 

juga menyerap produk degradasi seperti radikal bebas, keton, aldehid, polimer yang 

menyebabkan perubahan pada organ misalnya bertambahnya berat organ ginjal dan 

hati serta timbulnya berbagai penyakit seperti kanker, disfungsi endotelial, hipertensi 

dan obesitas (Rukmini, 2007; Castillo’n et al.,2011). 

Sebuah penelitian tentang pengaruh suhu dan lama proses deep frying terhadap 

pembentukan asam lemak trans menunjukkan bahwa setelah proses deep frying yang 

ke-2 akan terbentuk asam lemak trans baru terbentuk dan kadarnya akan semakin 

meningkat sejalan dengan penggunaan minyak. Akibat dari kenaikan asam lemak 

trans adalah peningkatan kadar low density lipoprotein (LDL), trigliserol dan 

lipoprotein, penurunan high density lipoprotein (HDL), dan mempengaruhi 

metabolisme asam lemak bebas yang akan menyebabkan dislipidemia dan 

arterosklerosis (Sartika,2009). 

Beberapa studi pada tikus menunjukkan bahwa pemberian diet tinggi lemak 

trans menyebabkan terjadinya resistensi insulin, peningkatan berat badan, akumulasi 

massa lemak terutama trigliserida pada organ hati karena terjadi penurunan oksidasi

lipid dan peningkatan sintesis asam lemak. Hal ini dapat memicu terjadinya obesitas, 

sindrom metabolik dan hepatik steatosis dan lipotoksisitas (Dorfman et al.,2009). 

Lipotoksisitas adalah toksisitas sel akibat akumulasi abnormal lemak. Asam 

lemak bebas bersifat hidrofobik sehingga dapat menembus membran sel atau melalui 

transporter yaitu fatty acid transport protein (FATP) atau fatty acid transporter 

CD36. Asam lemak tersaturasi dapat menginduksi apoptosis (programmed cell death) 

(Malhi, 2008). 

Salah satu dampak berbahaya dari penggunaan minyak jelantah adalah 

meningkatnya radikal bebas, substansi yang mempunyai satu atau lebih elektron tidak 

berpasangan. Radikal bebas yang berlebihan akan menimbulkan stress oksidasi yang 

memicu proses peroksidasi terhadap lipid, sehingga dapat menimbulkan penyakit 

kanker, inflamasi, aterosklerosis, dan mempercepat terjadinya proses penuaan (Koch 

et al., 2007; Jusup dan Raharjo, 2010). 

2.9. Hewan Coba Tikus (Rattus novergicus L.) 

2.9.1. Penggunaan Tikus 

Penggunaan hewan coba tikus galur Wistar dikarenakan tikus telah diketahui 

sifat-sifatnya dengan baik, mudah dipelihara, merupakan hewan yang relatif sehat dan 

cocok untuk berbagai macam penelitian. Terdapat beberapa galur tikus antara lain 

galur Sprague-dawley yang berwarna albino berkepala kecil dengan ekor lebih 

panjang daripada badannya dan galur Wistar yang ditandai dengan kepala yang besar 

dan dengan ekor yang lebih pendek. Tikus galur Wistar lebih besar daripada famili 

tikus umumnya, dimana tikus galur Wistar ini dapat mencapai ukuran 40 cm, yang

diukur dari hidung sampai ujung ekor dan berat berkisar antara 140-500 gram. Tikus 

betina biasanya memiliki ukuran lebih kecil dari tikus jantan dan memiliki 

kematangan seksual pada umur 4 bulan dan tikus ini dapat hidup selama 4 tahun 

(Kusumawati, 2004). 

Adapun data biologis tikus dapat dilihat dari tabel 2.1. di bawah ini 

(Kusumawati, 2004): 

Tabel 2.1. Data Biologis Tikus 

Karakteristik Ukuran 

Berat badan 

Jantan : 300-400 gram 

Betina : 250-300 gram 

Berat lahir : 5-6 gram 

Lama hidup : 2,5-3 tahun 

Temperatur tubuh : 35,9-37,5°C 

Kebutuhan air : 8-11 ml/100 g BB 

Kebutuhan makanan : 5 g/kg BB 

Frekuensi denyut jantung : 330-480/ menit 

Frekuensi respirasi : 66-114/ menit 

Tidal volume : 0,6-1,25 ml 

Pubertas : 50-60 hari 

Saat dikawinkan 

Jantan : 65-110 hari 

Betina : 65-110 hari 

Lama siklus birahi : 4-5 hari 

Lama kebuntingan : 21-23 hari 

Jumlah anak perkelahiran : 6-12 

Umur sapih : 21 hari 

2.9.2. Pemberian Makanan Dan Minuman 

Bahan dasar makanan tikus dapat bervariasi, misalnya protein 20-25%, lemak 

5%, karbohidrat 45-50%, serat kasar 5%, abu 4-5%, vitamin A 4000 IU/kg, vitamin D 

1000 IU/kg, alfa tokoferol 30 mg/kg, asam linoleat 3 g/kg, tiamin 4 mg/kg, riboflavin

3 mg/kg, pantotenat 8 mg/kg, vitamin B12 50 μg/kg, biotin 10 μg/kg, piridoksin 

40μg/kg dan kolin 1000 mg/kg. Untuk memenuhi kebutuhan makanan tikus, di 

Indonesia digunakan makanan ayam petelur dengan kandungan protein 17%, yang 

mudah didapatkan di toko makanan ayam dan pemberian minum tikus ad libitum 

(Ngatidjan, 2006). 

2.9.3. Pemantauan Keselamatan Tikus 

2006): 

Diperlukan pemantauan keselamatan tikus di laboratorium antara lain (Ngatidjan, 

1. Kandang tikus harus cukup kuat, tidak mudah rusak, mudah dibersihkan (satu kali 

seminggu), mudah dipasang lagi, hewan tidak mudah lepas, harus tahan terhadap 

gigitan tikus dan hewan tampak jelas dari luar. Alas kandang harus mudah 

menyerap air, pada umumnya yang dipakai serbuk gergaji atau sekam padi. 

2. Untuk tikus dengan berat badan 200-300 gram, luas alas kandang tiap ekor tikus 

adalah 600 cm 2 dan tinggi 20 cm. 

3. Menciptakan suasana lingkungan yang stabil dan sesuai dengan keperluan 

fisiologis tikus. Diatur suhu, kelembaban dan kecepatan pertukaran udara yang 

ekstrim harus dihindari. 

4. Tikus harus diperlakukan dengan kasih sayang.

3.1. Kerangka Berpikir 

BAB III 

KERANGKA BERPIKIR, KONSEP DAN HIPOTESIS 

Proses penuaan dapat disebabkan oleh beberapa faktor, baik faktor dari luar, 

misalnya polusi, stres dan makanan yang tidak sehat, maupun bisa disebabkan faktor 

dari dalam, di antaranya radikal bebas, genetik, hormon yang berkurang dan lain-lain. 

Kerangka berpikir penelitian ini didasarkan pada teori bahwa proses penuaan 

dapat terjadi salah satunya oleh karena radikal bebas. Peran radikal bebas pada proses 

penuaan sangat penting, karena radikal bebas akan menyebabkan stres oksidatif yang 

pada akhirnya dapat menimbulkan kerusakan, bahkan kematian sel dalam tubuh. 

Salah satu penyebab timbulnya radikal bebas yang berasal dari luar tubuh adalah 

penggunaan minyak goreng jelantah, khususnya yang digunakan dengan cara deep 

frying. Penggunaan minyak goreng yang berulang-ulang, dipanaskan dengan suhu 

tinggi (deep frying) menyebabkan oksidasi asam lemak tidak jenuh dalam minyak 

goreng tersebut. Minyak goreng yang dipanaskan berulang-ulang (deep frying) 

mengandung radikal bebas yang dapat menyebabkan kerusakan sel. 

Meningkatnya kadar radikal bebas dapat diketahui dengan mengukur kadar 

MDA. Malondialdehid merupakan petanda terjadinya kerusakan oksidatif oleh 

radikal bebas pada membran sel yang sering digunakan. 

Untuk mencegah terjadinya efek buruk dari radikal bebas diperlukan antioksidan. 

Antioksidan merupakan suatu senyawa yang dapat menghambat atau mencegah 

terjadinya oksidasi. Cara kerja senyawa antioksidan adalah bereaksi dengan radikal

ebas reaktif membentuk radikal bebas tidak reaktif yang relatif stabil. Antioksidan 

menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi kekurangan elektron yang dimiliki 

radikal bebas, dan menghambat terjadinya reaksi berantai dari pembentukan radikal 

bebas. 

Rosela merupakan salah satu tanaman yang dapat dijadikan sebagai sumber 

antioksidan. Rosela mengandung bermacam-macam antioksidan, di antaranya 

vitamin C, vitamin E, betakaroten, polifenol dan flavanoid. 

Pemberian ekstrak kelopak bunga rosela yang mengandung antioksidan dapat 

menurunkan pembentukan radikal bebas yang disebabkan penggunaan minyak 

goreng jelantah, yang ditandai dengan menurunnya kadar MDA. 

3.2. Konsep 

Berdasarkan uraian di atas, dapat disusun kerangka konsep seperti gambar 3.1. 

Stres oksidatif yang dapat diketahui dengan mengukur kadar MDA yang meningkat, 

dipengaruhi oleh faktor internal dan eksternal. Faktor internal meliputi genetik, 

hormonal dan sistem kekebalan. Faktor eksternal meliputi polusi, stres, nutrisi dan 

minyak goreng jelantah.

Faktor internal 

Genetik 

Hormonal 

Sistem kekebalan 

3.3. Hipotesis 

Gambar 3.1. Bagan Kerangka Konsep 

Pemberian ekstrak kelopak bunga rosela menurunkan malondialdehid pada tikus 

yang diberi minyak jelantah. 

Ekstrak kelopak 

bunga rosela 

Tikus 

Stres oksidatif 

Kadar MDA meningkat 

Faktor eksternal 

Polusi 

Stres 

Nutrisi 

Minyak goreng jelantah

4.1. Rancangan Penelitian 

BAB IV 

METODE PENELITIAN 

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan menggunakan 

rancangan penelitian pre test and post test control group design (Pocock, 2008). 

Rancangan penelitian dapat digambarkan sebagai berikut: 

P0 

O1 O2 

P S R O3 O4 

Keterangan: 

Gambar 4.1. Rancangan Penelitian 

P1 

P2 

O5 O6 

P : Populasi tikus jantan sehat, berumur 2-3 bulan, berat badan 180-200 

gram 

S : Sampel tikus dengan kadar MDA meningkat diatas 2,05mmol/l 

R : Randomisasi 

O1 : Observasi pre test kelompok kontrol (MDA)

O3 : Observasi pre test kelompok P1 (MDA) 

O5 : Observasi pre test kelompok P2 (MDA) 

P0 : Perlakuan dengan pemberian minyak jelantah dan aquades 

P1 : Perlakuan dengan pemberian minyak jelantah dan pemberian ekstrak 

kelopak bunga rosela dosis 250 mg/kg BB 

P2 : Perlakuan dengan pemberian minyak jelantah dan pemberian ekstrak 

kelopak bunga rosela dosis 500 mg/kg BB 

O2 : Observasi post test kelompok kontrol (MDA) 

O4 : Observasi post test kelompok P1 (MDA) 

O6 : Observasi post test kelompok P2 (MDA) 

4.2. Lokasi dan Waktu Penelitian 

Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Pusat Studi Pangan dan Gizi Universitas 

Gajah Mada, Jogjakarta. Waktu penelitian dilakasanakan mulai tanggal 24 Mei 2011 

sampai dengan 29 Juni 2011. Penelitian membutuhkan waktu selama 35 hari, dengan 

perincian sebagai berikut: waktu yang diperlukan untuk adaptasi subjek penelitian 

adalah selama 7 hari dan waktu yang diperlukan untuk perlakuan adalah selama 28 

hari, 14 hari pertama digunakan untuk perlakuan dengan pemberian minyak jelantah 

pada semua kelompok untuk mendapatkan data pre test dan 14 hari berikutnya 

digunakan untuk perlakuan dengan pemberian minyak jelantah ditambah aquades 

pada kelompok kontrol (P0), sedangkan pada kelompok perlakuan (P1 dan P2) 

pemberian minyak jelantah ditambah pemberian ekstrak kelopak bunga rosela untuk 

mendapatkan data post test.

4.3. Subjek Penelitian 

4.3.1. Subjek Penelitian 

Subjek penelitian adalah tikus putih galur Wistar dengan jenis kelamin jantan, 

berumur antara 2-3 bulan, dengan berat badan 180-200 gram dan dengan kadar MDA 

yang meningkat di atas rata-rata dibandingkan dengan kadar MDA tikus sebelum 

diinduksi dengan minyak jelantah, tikus dalam keadaan sehat dan aktif. Didapatkan 

data awal kadar MDA rata-rata dari tikus sebelum diberi minyak jelantah adalah 2,05 

mmol/l. 

4.3.2. Kriteria Subjek 

1. Kriteria Inklusi 

a. Tikus jantan galur Wistar sehat 

b. Umur 2-3 bulan 

c. Berat badan 180-200 gram 

d. Kadar MDA meningkat di atas 2,05 mmol/l 

2. Kriteria Drop Out 

Tikus mati 

4.3.3. Besar Sampel 

Besarnya sampel ditentukan berdasarkan rumus Pocock (Pocock, 2008): 

2 σ 2 

n = ------------ x ƒ(α, β) 

(µ2-μ1) 2 

Keterangan: 

n = Jumlah sampel 

σ = Simpang baku

µ2 = Rerata hasil pada kelompok perlakuan 

μ1 = Rerata hasil pada kelompok kontrol 

ƒ(α, β) = Sesuai dengan table Pocock 

Pada penelitian yang sudah dilakukan oleh Usoh et al. (2005) tentang efek 

antioksidan ekstrak bunga kering rosela terhadap stress oksidatif, didapatkan data 

sebagai berikut: 

σ = 9,05 

µ2 = 86,53 

μ1 = 102,60 

dalam penelitian ini, ƒ(α, β) = 6,6. Untuk mendapatkan jumlah sampel tiap kelompok, 

(n) maka angka yang diperoleh tersebut di atas dimasukkan ke dalam rumus: 

2 x 9,05 2 

n = ------------------------------ x 6,6 

(86,53 – 102,60) 2 

2 x 81,90 

n = ---------------------- x 6,6 

(-16,07) 2 

163,80 

n = --------------------- x 6,6 

258,24 

n = 0,63 x 6,6 

n = 4,16 

didapatkan hasil n = 4,16, dibulatkan ke atas menjadi 5. Jadi jumlah sampel 

perkelompok adalah 5 ekor. Untuk mengantisipasi drop out (tikusnya mati), maka

dalam penelitian ini jumlah tikus ditambah 20% menjadi 6 ekor perkelompok, 

sehingga seluruhnya berjumlah 18 ekor tikus. 

4.3.4. Teknik Penentuan Sampel 

berikut: 

Teknik pengambian sampel dalam penelitian ini dilakukan dengan cara sebagai 

1. Dilakukan pemilihan sampel dari populasi tikus berdasarkan kriteria inklusi, 

yaitu tikus jantan sehat, berumur 2-3 bulan, berat badan tikus antara 180-200 gram 

dan dengan kadar malondialdehid yang meningkat di atas rata-rata kadar MDA 

tikus sebelum diinduksi dengan minyak jelantah, yaitu yang meningkat di atas 2,05 

mmol/l. 

2. Dari sampel yang telah memenuhi kriteria inklusi, diambil secara random 

untuk mendapatkan jumlah sampel penelitian. 

3. Dari sampel yang telah dipilih kemudian dibagi menjadi 3 kelompok secara 

random yaitu kelompok kontrol (P0), kelompok perlakuan I (P1) dan kelompok 

perlakuan II (P2). 

4.4. Variabel Penelitian 

4.4.1. Klasifikasi Variabel Penelitian 

Klasifikasi variabel penelitian dibedakan menjadi: 

1. Variabel bebas : ekstrak kelopak bunga rosela 

2. Variabel tergantung : MDA serum 

3. Variabel terkendali : a. varian tikus 

b. jenis kelamin, usia, berat badan

4.4.2. Definisi Operasional Variabel 

c. kandang, nutrisi, cahaya, suhu 

1. Variabel bebas : ekstrak kelopak bunga rosela 

Ekstrak kelopak bunga rosela yang dipakai dalam penelitian ini diperoleh dari 

Litbang Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta Pusat. Pembuatan 

ekstrak kelopak bunga rosela menggunakan metode maserasi dengan pelarut 

etanol. Ekstrak kelopak bunga rosela diberikan peroral sekali dalam sehari 

menggunakan sonde lambung dengan dosis 250 dan 500 mg/kg BB tikus, 

diberikan pada pukul 12.00. Skala variabel ekstrak kelopak bunga rosela 

merupakan skala rasio. 

2. Variabel tergantung : MDA serum 

MDA merupakan produk akhir peroksida lipid, dan bisa digunakan sebagai 

petanda (biomarker) terjadinya kenaikan radikal bebas. Diukur dari plasma darah 

dengan metode TBARSC spektrometri. Satuan dalam mmol/l. Skala pengukuran 

adalah rasio. 

3. Variabel terkendali 

a. Varian tikus dari galur Wistar yang bewarna putih berkepala besar dan 

ekornya lebih pendek daripada badannya. 

b. Jenis kelamin jantan, usia 2-3 bulan dan berat badan 180-200 gram. 

c. Kandang pemeliharaan dilengkapi dengan tempat pemberian makanan dan 

minuman, dan disediakan satu kandang untuk setiap tikus. Diberi makanan 

secukupnya berupa makanan tikus standar dengan kadar protein 17% dan 

minuman diberikan secara tidak terbatas (ad libitum). Ruang tempat kandang

dengan ventilasi yang baik, penyinaran normal, suhu dan kelembaban udara 

diperhatikan. 

Variabel bebas 

Ekstrak kelopak bunga rosela 

4.5. Bahan Penelitian 

Gambar 4.2. Hubungan antar variabel 

Bahan penelitian yang digunakan adalah: 

1. Ekstrak kelopak bunga rosela 

2. Minyak jelantah 

3. Makanan tikus berupa makanan tikus standar dengan kandungan protein 17% 

4. Larutan H3PO4 

5. Larutan TBA 

6. Metanol 

7. Aquades 

Variabel terkendali 

Varian tikus 

Jenis kelamin, usia, berat badan 

Kandang, nutrisi, cahaya, suhu 

Variabel tergantung 

MDA serum

4.6. Alat Penelitian 

Alat penelitian yang digunakan adalah: 

1. Kandang tikus beserta kelengkapan tempat makanan dan minuman 

2. Timbangan berat badan 

3. Sarung tangan 

4. Termometer 

5. Tabung mikrohematokrit untuk mengambil sampel darah 

6. Tabung ependorf 

7. Timbangan analitik 

8. Sonde lambung 

9. Homogeneser 

10. Mikro pipet dan tip 

11. Water bath 

12. Vortex 

13. Tabung polypropylene 

14. Ice bath 

15. Sentrifuge 

16. Cartridges C18 

17. Spektrofotometer untuk pemeriksaan kadar MDA 

4.7. Prosedur Penelitian 

4.7.1. Pengambilan Subjek dan Jumlah Subjek Penelitian

Hewan coba pada penelitian ini diperoleh dari Laboratorium Pusat Studi Pangan 

dan Gizi Universitas Gajah Mada, Jogjakarta. Penelitian ini mengambil sampel tikus 

berumur 2-3 bulan, karena pada usia tersebut tikus sudah dewasa. Tikus yang 

diambil adalah tikus jantan, karena tikus jantan lebih sedikit dipengaruhi faktor 

hormonal dibandingkan dengan tikus betina. Tikus berjumlah 25 ekor, diinduksi 

dengan minyak jelantah selama 14 hari. Tikus yang dipilih sebagai subjek penelitian 

adalah tikus dengan kadar MDA meningkat di atas 2,05 mmol/l. 

Tikus jantan galur Wistar yang dijadikan subjek penelitian berjumlah 18 ekor. Tikus 

dibagi secara random menjadi 3 kelompok, yaitu kelompok kontrol, kelompok 

perlakuan P1 dan kelompok perlakuan P2, masing-masing terdiri dari 6 ekor tikus 

tiap kelompok. 

4.7.2. Penentuan Dosis 

1. Perhitungan dosis minyak jelantah 

Minyak jelantah yang digunakan didapat dari pedagang kaki lima yang menjual 

aneka makanan gorengan di kota Solo, adalah minyak goreng kelapa sawit yang 

dipakai untuk menggoreng bermacam makanan gorengan pada pemanasan tinggi 

secara berulang-ulang (deep frying). Dari penelitian yang dilakukan Hidayat (2005), 

dosis minyak jelantah yang dapat menyebabkan kerusakan oksidatif sel hati pada 

mencit adalah 0,3 ml/100 gram BB atau 0,06 ml/20 gram BB. Faktor konversi mencit 

(20 gram) ke tikus (200 gram) adalah 7,0 (Kusumawati, 2004). Maka dosis minyak 

jelantah (deep frying) yang digunakan pada penelitian ini adalah = 0,06 x 7,0 = 0,42 

ml/ 200 gram BB tikus putih setiap kali pemberian. 

2. Penentuan dosis ekstrak kelopak bunga rosela

Pada penelitian yang sudah dilakukan, Dahiru et al. (2003) menggunakan dosis 

250 dan 500 mg/kg BB. Pada penelitian yang dilakukan Ali et al. (2003), dosis 

ekstrak kelopak bunga rosela yang digunakan adalah dengan dosis 50, 100 dan 200 

mg/kg BB, didapatkan dalam dosis di bawah 200 mg/kg BB tidak memberikan hasil 

yang efektif. 

Dosis ekstrak kelopak bunga rosela yang digunakan pada penelitian ini adalah 

250 dan 500 mg/kg BB tikus. Jumlah ekstrak kelopak bunga rosela yang dibutuhkan 

= (kelompok I 50 mg + kelompok II 100 mg) x 14 hari x 6 ekor tikus = 12600 mg. 

Pada proses pembuatan ekstrak kelopak bunga rosela, didapatkan 465 gram 

ekstrak kelopak bunga rosela dari 1160 gram kelopak bunga rosela kering. Jadi untuk 

setiap gram ekstrak mengandung 2,495 gram rosela, dibulatkan menjadi 2,5 gram. 

Untuk pembuatan larutan ekstrak kelopak bunga rosela, diambil 6 gram ekstrak 

kelopak bunga rosela lalu ditambahkan aquades sampai mencapai volume 75 ml, 

sehingga didapatkan dosis 15000 mg/75 ml atau 200 mg ekstrak kelopak bunga 

rosela/ml larutan. Setiap tikus ditimbang berat badannya setiap minggu. Larutan 

ekstrak kelopak bunga rosela yang diberikan sesuai dosis kelompok perlakuan dan 

berat badan masing-masing tikus. Tikus 200 gram BB pada kelompok perlakuan P1 

(dosis 250 mg/kg BB) mendapat larutan ekstrak kelopak bunga rosela sebanyak 0,25 

ml setiap kali pemberian, sedangkan pada kelompok perlakuan P2 (dosis 500 mg/kg 

BB) 0,5 ml setiap kali pemberian. 

Pemberian dosis ekstrak kelopak bunga rosela 500 mg/kg BB bertujuan untuk 

mengetahui apakah dengan peningkatan dosis 2 kali, efek penurunan MDA juga 

meningkat, atau terjadi sebaliknya, dimana rosela yang bersifat antioksidan pada

pemberian dosis 2 kali lipat menjadi prooksidan, selain untuk mengetahui 

toksisitasnya. 

4.7.3. Prosedur Kerja 

1. Tikus jantan yang berjumlah 25 ekor dengan umur 2-3 bulan ditimbang, satu 

ekor tikus ditempatkan dalam satu kandang. Selama penelitian, tikus diberi 

makan berupa makanan tikus standar dengan kandungan protein 17% dan 

pemberian minum tikus ad libitum. 

2. Setelah adaptasi selama 7 hari, setiap tikus diambil darah untuk pemeriksaan kadar 

MDA dengan menggunakan mikrohematokrit melalui pleksus retroorbitalis. 

3. Selama penelitian, setiap tikus ditimbang setiap minggu untuk menentukan dosis 

minyak jelantah dan larutan ekstrak kelopak bunga rosela yang diberikan 

Masing-masing tikus ditimbang berat badannya dan diberi minyak jelantah 

dengan dosis 0,42 ml/200 gram BB/hari selama 14 hari. Minyak jelantah 

diberikan peroral sekali sehari menggunakan sonde lambung. Diberikan pada 

pukul 08.00 setiap hari. 

4. Pada hari ke-22 dilakukan pengambilan sampel darah untuk pemeriksaan kadar 

MDA pada masing-masing tikus (data pre test). 

5. Dari hasil pengukuran kadar malondialdehid tikus, dilakukan penentuan subjek 

penelitian secara random sejumlah 18 ekor tikus dengan melihat peningkatan 

kadar malondialdehid. Tikus dengan kadar malondialdehid yang meningkat di atas 

2,05 mmol/l, dipilih sebagai subjek penelitian.

6. Tikus dibagi menjadi 3 kelompok secara random, yaitu kelompok kontrol, 

kelompok perlakuan P1 dan kelompok perlakuan P2, masing-masing kelompok 

terdiri dari 6 ekor tikus. 

7. Kelompok kontrol diberi minyak jelantah dengan dosis 0,42 ml/200 gram BB/hari 

dan aquades sebanyak 0,5 ml selama 14 hari. Minyak jelantah dan aquades 

diberikan peroral sekali sehari menggunakan sonde lambung. Minyak jelantah 

diberikan pada pukul 08.00, sedangkan aquades diberikan pada pukul 12.00 setiap 

hari. 

8. Kelompok P1 diberi minyak jelantah dengan dosis 0,42 ml/200 gram BB/hari dan 

ekstrak kelopak bunga rosela dengan dosis 250 mg/kg BB selama 14 hari. Minyak 

jelantah dan ekstrak kelopak bunga rosela diberikan secara peroral masing-masing 

sekali sehari menggunakan sonde lambung. Minyak jelantah diberikan pada pukul 

08.00, sedangkan ekstrak kelopak bunga rosela diberikan pada pukul 12.00 setiap 

hari. 

9. Kelompok P2 diberi minyak jelantah dengan dosis 0,42 ml/200 gram BB/hari dan 

ekstrak kelopak bunga rosela dengan dosis 500 mg/kg BB selama 14 hari. Minyak 

jelantah dan ekstrak kelopak bunga rosela diberikan secara peroral masing-masing 

sekali sehari menggunakan sonde lambung. Minyak jelantah diberikan pada pukul 

08.00, sedangkan ekstrak kelopak bunga rosela diberikan pada pukul 12.00 setiap 

hari. 

10. Pada hari ke-36 penelitian, dilakukan pengambilan darah lagi pada semua tikus 

untuk pemeriksaan kadar MDA setelah perlakuan (data post test). 

11. Dilakukan analisis dari data yang diperoleh.

4.7.4. Alur Penelitian 

Tikus jantan 25 ekor, 2-3 bulan, BB 180-200 gram 

Adaptasi 7 hari 

Pengukuran MDA (rata-rata 2,05 mmol/l) 

Minyak jelantah 0,42 ml/200 gram BB 14 hari 

Pengukuran MDA (data pre test) 

Tikus 18 ekor dengan kadar MDA > 2,05 mmol/l 

dibagi secara random menjadi 3 kelompok @ 6 

Kelompok kontrol Kelompok 1 Kelompok 2 

Minyak jelantah 0,42 

ml/200 gram BB + 

aquades 0,5 ml 

selama 14 hari 

Pengukuran MDA 

(data post test) 


ml/200 gram BB + 

ekstrak kelopak 

bunga rosela dosis 

250 mg/kg BB selama 

14 hari 



Gambar 4.3. Skema Alur Penelitian 


ml /200 gram BB + 

ekstrak kelopak 

bunga rosela dosis 

500 mg/kg BB selama 

14 hari 



Data Data Data 

Analisis

4.8. Analisis Data 

Analisis data yang digunakan adalah : 

1. Analisis deskriptif. 

Analisis deskriptif dilakukan sebagai dasar untuk statistik analitis (uji hipotesis) 

untuk mengetahui karakteristik data yang dimiliki. Analisis deskriptif dilakukan 

dengan program SPSS. Pemilihan penyajian data dan uji hipotesis tergantung dari 

normal tidaknya distribusi data. 

2. Analisis normalitas dengan Uji Shapiro-Wilk dan Uji homogenitas dengan 

Levene’s Test. 

3. Dari hasil penelitian didapatkan data menyebar normal dan homogen, maka 

analisis perbandingan antar 3 kelompok dilakukan dengan Uji One Way Anova,. 

4. Terdapat perbedaan yang signifikan dari uji Anova ini, maka dapat dilanjutkan 

dengan uji Least Significance Difference (LSD) untuk melihat lebih jelas letak 

perbedaan antar kelompok perlakuan.

BAB V 

HASIL PENELITIAN 

Dalam penelitian ini digunakan sebanyak 18 ekor tikus jantan galur Wistar sebagai 

sampel, yang terbagi menjadi 3 (tiga) kelompok masing-masing berjumlah 6 ekor, yaitu 

kelompok kontrol, kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 250 mg/kg BB, dan kelompok 

ekstrak kelopak bunga rosela 500 mg/kg BB. Dalam bab ini akan diuraikan uji normalitas 

data, uji homogenitas data, uji komparabilitas, dan uji efek perlakuan. 

5.1 Uji Normalitas Data Kadar MDA 

Data kadar MDA diuji normalitasnya dengan menggunakan uji Shapiro-Wilk. Hasilnya 

menunjukkan data berdistribusi normal (p>0,05) seperti yang disajikan pada Tabel 5.1. 

Tabel 5.1 

Hasil Uji Normalitas Kadar MDA 

Kelompok Subjek n p Keterangan

MDA Kontrol awal 

MDA (Ekstrak dosis 250 mg/kg BB) awal 

MDA (Ekstrak dosis 500 mg/kg BB) awal 

MDA Kontrol Pre2 

MDA (Ekstrak dosis 250 mg/kg BB) Pre 

MDA (Ekstrak dosis 500 mg/kg BB) Pre 

MDA Kontrol Post 

MDA (Ekstrak dosis 250 mg/kg BB) Post 

MDA (Ekstrak dosis 500 mg/kg BB) Post 

6 

6 

6 

6 

6 

6 

6 

6 

6 

0,831 

0,528 

0,880 

0,650 

0,137 

0,331 

0,978 

0,701 

0,931 

Normal 

Normal 

Normal 

Normal 

Normal 

Normal 

Normal 

Normal 

Normal 

5.2 Uji Homogenitas Varians Kadar MDA Antar Kelompok Sebelum dan Sesudah 

Perlakuan 

Data kadar MDA diuji homogenitasnya dengan menggunakan uji Levene’s test. Hasilnya 

menunjukkan data homogen (p>0,05), disajikan pada Tabel 5.2. 

MDA (awal) 

Tabel 5.2 

Homogenitas Kadar MDA antar Kelompok Perlakuan 

Kelompok Subjek F p Keterangan 

MDA Sebelum Perlakuan (pre) 

MDA Sesudah Perlakuan (post) 

0,227 

1,600 

0,092 

0,799 

0,234 

0,912 

Homogen 

Homogen 

Homogen

5.3 Kadar MDA 

5.3.1 Uji Komparabilitas Kadar MDA 

Uji Komparabilitas bertujuan untuk membandingkan rerata kadar MDA antar kelompok 

sebelum diberi minyak jelantah. Hasil analisis kemaknaan dengan uji One Way Anova 

disajikan pada Tabel 5.3 berikut. 

Kontrol 

Tabel 5.3 

Rerata Kadar MDA antar Kelompok Sebelum Diberi Minyak Jelantah 

Kelompok Subjek n 

Ekstrak kelopak bunga 

rosella 250 mg/kg BB 

Ekstrak kelopak bunga 

rosella 500 mg/kg BB 

6 

6 

6 

Rerata Kadar 

MDA 

2,02 

2,01 

2,12 

SB F 

0,23 

0,20 

0,17 

p 

0,533 0,598 

Tabel 5.3 di atas, menunjukkan bahwa rerata kadar MDA kelompok kontrol adalah 

2,020,23, rerata kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 250 mg/kg BB adalah 2,010,20, 

dan rerata kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 500 mg/kg BB adalah 2,120,17. Analisis 

kemaknaan dengan uji One Way Anova menunjukkan bahwa nilai F = 0,533 dan nilai p = 

0,598. Hal ini berarti bahwa semua kelompok sebelum diberi minyak jelantah, rerata kadar 

MDA tidak berbeda secara bermakna (p > 0,05). 

5.3.2 Analisis Efek Pemberian Minyak Goreng Jelantah antar Kelompok

Uji Komparabilitas bertujuan untuk membandingkan rerata kadar MDA antar kelompok 

sesudah diberikan minyak goreng jelantah. Hasil analisis kemaknaan dengan uji One Way 

Anova disajikan pada Tabel 5.4 berikut. 

Tabel 5.4 

Rerata Kadar MDA antar Kelompok Sesudah Diberi Minyak Jelantah (Pre Test) 


Kontrol (P0) 


250 mg/kg BB (P1) 


500 mg/kg BB (P2) 

6 

6 

6 

Rerata Kadar 

MDA 

7,40 

7,22 

6,85 

SB F 

0,33 

0,57 

0,49 

p 

2,144 0,152 





0,152. Hal ini berarti bahwa semua kelompok sesudah diberi minyak jelantah, rerata kadar 

MDA tidak berbeda secara bermakna (p > 0,05). 

5.3.3 Analisis Efek Pemberian Ekstrak Kelopak Bunga Rosela antar Kelompok 

Analisis efek perlakuan diuji berdasarkan rerata kadar MDA antar kelompok sesudah

diberikan perlakuan berupa ekstrak kelopak bunga rosela. Hasil analisis kemaknaan dengan 

uji One Way Anova disajikan pada Tabel 5.5 berikut. 

Tabel 5.5 

Perbedaan Rerata Kadar MDA antar Kelompok Sesudah Diberikan Ekstrak Kelopak Bunga 

Rosela (Post Test) 


Kontrol (P0) 


250 mg/kg BB (P1) 


500 mg/kg BB (P2) 

6 

6 

6 

Rerata Kadar 

MDA 

7,79 

5,19 

3,41 

SB F 

0,32 

0,30 

0,36 

p 

270,34 0,001 





0,001. Hal ini berarti bahwa rerata kadar MDA pada ketiga kelompok sesudah diberikan 

perlakuan berbeda secara bermakna (p

Tabel 5.6 

Beda Nyata Terkecil Kadar MDA Sesudah Diberikan Ekstrak Kelopak Bunga Rosela 

antar Dua Kelompok 

Kelompok 

Kontrol (P0) dan Ekstrak kelopak bunga rosela 250 

mg/kg BB (P1) 

Kontrol (P0) dan Ekstrak kelopak bunga rosela 500 

mg/kg BB (P2) 

Ekstrak kelopak bunga rosela 250 mg/kg BB (P1) 

dan 500 mg/kg BB (P2) 

Beda 

Rerata 

2,60 0,001 

4,39 0,001 

1,79 0,001 

p Interpretasi 

Berbeda 

Berbeda 

Berbeda 

Uji lanjutan dengan uji Least Significant Difference–test (LSD) di atas mendapatkan hasil 

sebagai berikut. 

1. Rerata kelompok kontrol berbeda secara bermakna dengan kelompok ekstrak 

kelopak bunga rosela 250 mg/kg BB (rerata kelompok kontrol lebih tinggi daripada 

rerata kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 250 mg/kg BB). 

2. Rerata kelompok kontrol berbeda secara bermakna dengan kelompok ekstrak 

kelopak bunga rosela 500 mg/kg BB (rerata kelompok kontrol lebih tinggi daripada 

rerata kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 500 mg/kg BB). 

3. Rerata kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 250 mg/kg BB berbeda secara 

bermakna dengan kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 500 mg/kg BB (rerata

mg/dl 

kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 250 mg/kg BB lebih tinggi daripada rerata 

kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 500 mg/kg BB). 

8.00 

6.00 

4.00 

2.00 

0.00 

Kadar MDA 

7.40 

7.79 

7.22 6.85 

5.19 

Kontrol Perlakuan 1 Perlakuan 2 

Gambar 5.1 Perbedaan Rerata Kadar MDA pada Kelompok Kontrol, Kelompok 

Perlakuan 1 dan Kelompok Perlakuan 2 

3.41 

Pre test 

Post test

6.1. Subjek Penelitian 

BAB VI 

PEMBAHASAN HASIL PENELITIAN 

Untuk menguji pemberian ekstrak kelopak bunga rosela dalam menurunkan MDA 

dalam darah tikus Wistar yang diberi minyak jelantah, maka dilakukan penelitian pada tikus 

jantan sehat berumur 2-3 bulan dengan berat badan 180-200 gram yang diberikan ekstrak 

kelopak bunga rosela. 

Tikus yang dipergunakan dalam penelitian ini berjumlah 18 ekor, dibagi menjadi 3 

kelompok yaitu kelompok kontrol P0, kelompok P1 (ekstrak kelopak bunga rosela 250 mg/kg 

BB), dan kelompok P2 (ekstrak kelopak bunga rosela 500 mg/kg BB). Penelitian dilakukan 

selama 28 hari, 14 hari diberikan minyak goreng jelantah, yang dilanjutkan dengan 

pemberian minyak goreng jelantah dan ekstrak kelopak bunga rosela selama 14 hari 

berikutnya. 

Pengambilan waktu 14 hari didasarkan hasil penelitian pendahuluan bahwa dalam 

waktu 14 hari telah terjadi penurunan MDA yang signifikan (Suwandi, 2011). 

6.2. Pengaruh Ekstrak Kelopak Bunga Rosela terhadap Kadar MDA Darah 

Hasil penelitian dan analisis data MDA darah pada kelompok kontrol, kelompok P1 dan 

kelompok P2 menunjukkan bahwa uji normalitas (Uji Shapiro Wilk) dan homogenitas

(Levene test) untuk kelompok pre test dan post test masing-masing kelompok berdistribusi 

normal dan homogen (p > 0,05). 

Uji perbandingan sebelum diberikan minyak goreng jelantah antara ketiga kelompok 

menggunakan uji One Way Anova. Rerata kadar MDA kelompok kontrol adalah 2,020,23, 

rerata kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 250 mg/kg BB adalah 2,010,20, dan rerata 

kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 500 mg/kg BB adalah 2,120,17. Uji perbandingan 

pre test antara ketiga kelompok dengan One Way Anova menunjukkan bahwa tidak 

terdapat perbedaan bermakna perubahan MDA darah antara kelompok kontrol dengan 

kelompok perlakuan 1 (P1) maupun kelompok perlakuan 2 (P2) ( p > 0,05). Hal ini berarti 

bahwa MDA pada ketiga kelompok adalah sama atau dengan kata lain ketiga kelompok 

sebelum diberikan perlakuan kadar MDAnya tidak berbeda secara bermakna (p > 0,05). 

Uji perbandingan sesudah diberikan minyak goreng jelantah antara ketiga kelompok 

menggunakan uji One Way Anova. Rerata kadar MDA kelompok kontrol adalah 7,400,33, 

rerata kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 250 mg/kg BB adalah 7,220,57, dan rerata 

kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 500 mg/kg BB adalah 6,850,49. Uji perbandingan 

sesudah pemberian minyak goreng jelantah antara ketiga kelompok dengan One Way Anova 

menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan bermakna perubahan MDA darah antara 

kelompok kontrol dengan kelompok P1 maupun P2 ( p > 0,05). Hal ini berarti bahwa MDA 

pada ketiga kelompok adalah sama atau dengan kata lain ketiga kelompok sesudah 

diberikan minyak goreng jelantah, kadar MDAnya tidak berbeda secara bermakna (p > 0,05). 

Uji perbandingan sesudah diberikan ekstrak kelopak bunga rosela antara ketiga 

kelompok menggunakan One Way Anova. Rerata kadar MDA kelompok kontrol adalah 

7,790,32, rerata kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 250 mg/kg BB adalah 5,190,30,

dan rerata kelompok ekstrak kelopak bunga rosela 500 mg/kg BB adalah 3,410,36. Uji 

perbandingan post test antara ketiga kelompok dengan One Way Anova menunjukkan 

bahwa terdapat perbedaan bermakna penurunan kadar MDA darah antara kelompok 

kontrol dengan kelompok P1, antara kelompok kontrol dengan kelompok P2, dan juga 

antara kelompok P1 dengan kelompok P2. Hal ini berarti bahwa terjadi penurunan kadar 

MDA secara bermakna pada ketiga kelompok sesudah diberikan perlakuan berupa ekstrak 

kelopak bunga rosela secara peroral selama 14 hari (p < 0,05). Terjadi penurunan kadar 

MDA sebesar 28,1% pada kelompok yang diberikan ekstrak kelopak bunga rosela dengan 

dosis 250 mg/kg BB tikus, sedangkan pada kelompok yang diberikan ekstrak rosela dosis 

500 mg/kg BB tikus mengalami penurunan kadar MDA sebesar 50,2%. 

Berdasarkan hasil penelitian di atas, menunjukkan terjadinya penurunan bermakna 

kadar MDA pada kelompok P1 yang diberi ekstrak kelopak bunga rosela peroral 250 mg 

kg/BB dan kelompok P2 yang diberi ekstrak kelopak bunga rosela peroral 500 mg/kg BB, 

selama 14 hari. Hal ini disebabkan karena ekstrak kelopak bunga rosela mengandung 

antioksidan, sehingga dapat menyebabkan penurunan kadar MDA yang disebabkan oleh 

pemberian minyak goreng jelantah. Hasil penelitian ini sesuai dengan beberapa studi yang 

telah dilakukan, yang menyebutkan bahwa kelopak bunga rosela mengandung vitamin C, 

vitamin E, beta karoten dan omega 3 (Arellano et al., 2004; Maryani dan Kristiana, 2008). 

Pada studi lain, ditemukan kandungan flavanoid dalam kelopak bunga rosela (Amin dan 

Hamza, 2005). 

Pemberian minyak goreng jelantah menimbulkan radikal bebas. Radikal bebas yang 

berlebihan akan menimbulkan stres oksidasi yang memicu proses peroksidasi terhadap lipid 

yang dapat diketahui dengan mengukur kadar MDA. Hal ini didukung oleh penelitian yang

dilakukan Dorfman et al. (2010), Jusup dan Raharjo (2010), Ghidurus et al. (2011). Pada 

penelitian yang lain, yang dilakukan oleh Ulilalbab (2010), didapatkan juga kenaikan kadar 

MDA yang disebabkan pemberian minyak jelantah. 

Kelopak bunga rosela yang mengandung antioksidan menurunkan kadar MDA yang 

meningkat akibat pemberian minyak jelantah. Hal ini didukung penelitian yang dilakukan 

Thadeus (2006), Okasha et al. (2008). Pada penelitian lain menyebutkan aktivitas 

antioksidan kelopak bunga rosela menghambat laju peroksidasi lipid (Ulilalbab, 2010). 

Pada penelitian ini didapatkan, efek menurunkan kadar MDA lebih besar pada 

pemberian kelopak bunga rosela dengan dosis yang lebih tinggi. Hal ini mungkin disebabkan 

makin tinggi pemberian dosis kelopak bunga rosela akan menyebabkan makin tinggi pula 

antioksidan yang dikonsumsi, sehingga makin kuat pula meredam peroksidasi lipid yang 

ditimbulkan radikal bebas. Hasil penelitian ini didukung oleh penelitian yang dilakukan 

Dahiru et al. (2003) dan Ali et al. (2003). 

Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa kelopak bunga rosela mengandung 

antioksidan, asam amino, vitamin dan mineral. Kandungan antioksidan kelopak bunga rosela 

antara lain: vitamin C, vitamin E, beta karoten, omega 3 dan flavanoid. Kandungan vitamin C 

dalam kelopak bunga rosela cukup tinggi, yaitu 260-280 mg dalam setiap 100 gram kelopak 

bunga rosela. Kandungan antioksidan kelopak bunga rosela inilah yang meredam efek 

radikal bebas yang disebabkan pemberian minyak goreng jelantah. Radikal bebas dapat 

menimbulkan, salah satunya peroksidasi lipid, yang dapat diketahui dengan mengukur kadar 

MDA.

Antioksidan berperan penting dalam konsep AAM dalam meredam efek buruk radikal 

bebas, salah satu penyebab proses penuaan (Pangkahila, 2007).

7.1 Simpulan 

BAB VII 

SIMPULAN DAN SARAN 

Dari hasil penelitian pemberian ekstrak kelopak bunga rosela pada tikus jantan 

jenis Wistar yang diberi minyak jelantah didapatkan simpulan sebagai berikut: 

1. Pemberian ekstrak kelopak bunga rosela dosis 250 mg/kg BB menurunkan 

malondialdehid sebesar 28,0% pada tikus jantan galur Wistar yang diberi minyak 

goreng jelantah. 

2. Pemberian ekstrak kelopak bunga rosela dosis 500 mg/kg BB menurunkan 

malondialdehid sebesar 50,2% pada tikus jantan galur Wistar yang diberi minyak 

goreng jelantah. 

3. Dosis ekstrak kelopak bunga rosela yang lebih tinggi menurunkan kadar 

malondialdehid lebih banyak. 

7.2 Saran 

Sebagai saran dalam penelitian ini adalah: 

1. Perlu melakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui dosis maksimal ekstrak 

kelopak bunga rosela pada hewan coba. 

2. Perlu dilakukan clinical trial supaya dapat diterapkan pada manusia..

DAFTAR PUSTAKA 

Ali, B.H., Mouse, H.M., El-Mougy, S. 2003. The effect of a water extract and 

anthocyanins of Hibiscus sabdariffa L on paracetamol-induced hepatoxicity in 

rats. Phytotherapy Research 17(1): 56-59. 

Ali, B.H., Naser, A.W., Gerald, B. 2005. Phytochemical, Pharmacological and 

Toxicologi Aspects of Hibiscus sabdariffa L : A. Review. Phytotherapy 

Research 19: 369-375. 

Amin, A., Hamza, A.A. 2005. Hepatoprotective effects of Hisbiscus, Rosmarinus and 

Salvia on azathioprine-induced toxicity in rats. Life Sci. 77(3): 266-278. 

Andik, E.S. 2001. “Pengaruh Pemberian Minyak Goreng Kelapa Sawit Curah Setelah 

Pemanasan Berulang pada Struktur Histologis Hati Mencit” (skripsi). Surakarta: 

Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret. 

Arellano, H. A., Romero, F. S., Soto C.M.A., Tortoriello, J. 2004. Effectiveness and 

Tolerability of A Standardized Extract from Hibiscus Sabdariffa in patients with 

mild to moderate hypertension, a controlled and Randomized Clinical Trial. 

Phytomedicine 11(2004): 375-82. 

Azeredo, H.M.C., Faria, J.A.F., Silva. 2004. Minimization of proxide formation rate 

in soybean oil by antioxidant combinations. Food Research International 37: 

689-94. 

Bludau, J.H. 2010. Aging, But Never Old: The Realities, Myths, and 

Misrepresentations of the Anti-Aging Movement (The Praeger Series on 

Contemporary Health and Living). 1 st edition. Publisher Praeger. page 2. 

Castillo’n, P.G., Artalejo, F.R., Fornés, N.S., Banegas, J. R., Etxezarreta, P.A., 

Ardanaz, E., Barricarte, A., Chirlaque, M.D., Iraeta,M.D.,Larran˜aga, N., 

Losada, A., Mendez, M., Martínez, C., Quiro´s, J.R., Navarro, C., Jakszyn, P., 

Sa´nchez, M.J., Tormo, M.J., Gonza´lez, A. 2007. Intake of fried foods is 

associated with obesity in the cohort of Spanish adults from the European 

Prospective Investigation into Cancer and Nutrition. Am J Clin Nutr 2007;86:198 

–205. Available from: http://www.ajcn.org/content/86/1/198.full.pdf+html?sid= 

0585e315-71d4-49c5-ad83-0ed0cb17b91b. Accessed February 10th, 2011 

Cherubini, A., Ruggiero, C., Polidori, M.C., Mecocci, P. 2005. Potensial marker of 

oxidative stress in stroke. Free Radic Biol Med 39 : 841 – 52. 

Dahiru, D., Obi, O.J., Umaru, H. 2003. Effect Hibiscus Sabdariffa calyx extract on 

carbon tetrachloride induced liver damage. Biokemistri 15(1): 27-33.

Devi, M. 2009. Dashyatnya Khasiat Rosella. Yogyakarta. Cemerlang Publishing. 

Dorfman, S. E., Laurent.D., Gounarides. J.S., Li.X., Mullarkey, T.L., Rocheford. 

E.C., Sarraf. F.S., Hirsch. E.A., Hughes, T.E. Commerford,S.R. 2009. Metabolic 

Implications of Dietary Trans-fatty Acids. Obesity vol.17 no. 6:1200-1207. 

Available from : www.nature.com/oby/journal/v17/n6/full/oby2008662a.html. 

Accessed November 29 th ,2010 

Ghidurus, M., Turtoi, M., Boskou, G., Niculita, P., Stan, V. 2010. Nutritional and 

health aspects related to frying. Romanian Biotechnological Letters. Vol. 15, no 

6. Available from : www.rombio.eu/rbl6vol15/1%20Review_Ghidurus.pdf. 

Accessed January 29 th , 2011 

Goldman, R., Klantz. 2003. The New Anti-Aging Revolution. Australasian Edition p. 

22-24, 191-194. 

Halliwell, B., Gutteridge, J.M.C. 2007. Free Radicals in Biology and Medicine. 

Fourth edition. New York. Oxford University Press. 

Herawati, Akhlus, S. 2006. Kinerja (Bht) sebagai antioksidan minyak sawit pada 

perlindungan terhadap oksidasi oksigen singlet. Akta Kimindo 2: 1–8. 

Hidayat, T. 2005. “Efek Antioksidan Ekstrak Daun Sambiloto (Andrographis 

paniculata) pada Tikus Putih (Rattus norvegicus) yang Diberi Minyak Kelapa 

Sawit dengan Pemanasan Berulang” (skripsi). Surakarta: Universitas Sebelas 

Maret. 

Jusup, S.A., Raharjo, S.S. 2010. Efek Ekstrak Daun Krokot (Portulaca oleracea L.) 

Sebagai Anti Oksidan Alami Terhadap Kadar Alanin Transaminase (ALT) dan 

Gambaran Histologi Sel Hepar Rattus norvegicus L. yang Diberi Minyak 

Goreng deep frying. Surakarta. Universitas Sebelas Maret. 

Ketaren, S. 2005. Minyak dan Lemak Pangan. Jakarta. Penerbit Universitas 

Indonesia, 

Koch, A., KÖnig, B., Spielmann, J., Leitner, A., Stang, G.L., Eder,.K. 2007. 

Thermally Oxidized Oil Increases the Expression of Insulin-Induced Genes and 

Inhibits Activation of Sterol Regulatory Element-Binding Protein-2 in Rat Liver. 

Journal of Nutrition: Biochemical, Molecular, and Genetic Mechanisms 137: 

2018–2023. Available from : jn.nutrition.org/content/137/9/ 2018.full.pdf. (17 

Desember 2010). 

Konig, D., Berg, A. 2002. Exercise and Oxidative Stress: is there a need for 

additional antioxidant. Osterreichisches J Fur Sportmedizin 3: 6-15.

Kuncahyo, I., Sunardi. 2007. Uji aktivitas antioksidan ekstrak belimbing wuluh 

(Averrhoa bilimbi L.) terhadap 1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl (DPPH). Seminar 

Nasional Teknologi 2007 (SNT 2007). pp: E1-9. 

Kusmardiyana, S., Melati, I., Nawawi, A. 2007. Detail Penelitian Obat Bahan Alam. 

Available from: http://bahan-alam.fa.itb.ac.id (15 januari 2011). 

Kusumawati, D. 2004. Bersahabat dengan Hewan Coba. Yogyakarta. Gajah Mada 

University Press. 

Lazze, M.C., Pizzala, R., Savio, M., Stivala, L.A., Prosperi, E., Bianchi, L. 2003. 

Anthocyanins protect against DNA damage induced by tert-butyl-hydroperoxide 

in rat smooth muscle and hepatoma cells. Mutation Research 535: 103-115. 

Lee, J., Lee, S., Lee, H., Park, K., Choe, E. 2002. Spinach (Spinacia oleracea) as a 

natural food grade antioxidant in deep fat fried products. J. Agric. Food Chem 

50: 5664-9. 

Lestari, P.P. 2010. “Pemanfaatan Minyak Goreng Jelantah Pada Pembuatan Sabun 

Cuci Piring” (tesis). Medan: Universitas Sumatera Utara. 

Lin, W.L., Hsieh, Y.J., Chou, F.P., Wang, C.J., Cheng, M.T., Tseng, T.H. 2003. 

Hibiscus protocatechuic acid inhibits lipopolysaccharide-induced rat hepatic 

damage. Arch. Toxicol 77: 42-47. 

Liu, C.L., Wang, J.M., Chu, C.Y., Cheng, M.T., Tseng, T.H. 2002. In vivo protective 

effect of protocatechuic acid on tert-butyl hydroperoxide-induced rat 

hepatotoxicity. Food Chem. Toxicol 40: 635-641. 

Malhi, H., Gores, G. J. 2008. Molecular Mechanism of Lipotoxicity in Nonalcoholic 

Fatty Liver Disease. Semin Liver Dis., 28(4):360-369. 

Mardiah, Hasibuan, S., Rahayu, A., Ashadi, R.W. 2009. Budidaya dan Pengolahan 

Rosella. Ed. Ke-1. Jakarta. Agromedia. 

Maryani, H., Kristiana, L. 2008. Khasiat dan Manfaat Rosela. Jakarta. PT Agro 

Media Pustaka. hal 6, 25-31. 

Mulyati, S., Meilina, H. 2007. Pemurnian Minyak Jelantah dengan Menggunakan 

Sari Mengkudu. Available from: http://222.124.186.229/gdl40/go.php?id= 

gdlnode-gdl-res-2007-srimulyati-1082&node-3517&start=6 (24 Oktober 2010). 

Murray, R.K., Granner, D.K., Mayes, P.A., Rodwell V.W. 2000. Biokimia Harper. 

Edisi 25. Jakarta. EGC. hal: 609-612.

Ngatidjan. 2006. Metode Laboratorium dalam Toksikologi. Cetakan ke-1. 

Yogyakarta. Bagian Farmakologi dan Toksikologi Fakultas Kedokteran UGM. 

hal: 116, 136. 

Ojokoh, O.A. 2006. Roselle (Hibiscus sabdariffa) calyx Diet and histopatological 

Changes in Liver Albino Rats. J Food Tec 5(2): 110-113. 

Okasha, M.A.M., Abubakar, M.S., Bako, I.G. 2008. Study of the Effect of Aqueous 

Hibiscus sabdariffa Linn Seed Extract on Serum Prolactin Level of Lactating 

Female Albino Rats. European Journal of Scientific Research. Vol 22, no 4: 

575-583. 

Oktaviani, N.D. 2009. Hubungan lamanya pemanasan dengan kerusakan minyak 

goreng curah ditinjau dari bilangan peroksida. Jurnal Biomedika. 1: 31-4. 

Pangkahila, W. 2007. Memperlambat Penuaan Meningkatkan Kualitas Hidup. Anti- 

Aging Medicine. Cetakan ke-1. Jakarta. Penerbit Buku Kompas. hal: 8-11. 

Pham-Huy, L.A.P., He, H., Pham-Huy, C. 2008. Free Radicals, Antioxidants in 

Disease and Health. Int J Biomed Sci 4: 89-96. 

Pocock, 2008. Clinical Trial : A Practical Approach. Chichester : John Willey & 

Sons. p. 127-128. 

Rukmini, A. 2007. Regenerasi Minyak Goreng Bekas dengan Arang Sekam Menekan 

Kerusakan Organ Tubuh. Seminar Nasional Teknologi 2007 (SNT 2007). ISSN 

: 1978 – 9777. 

Rush, J.W.E., Denniss, S.G., Graham, D.A. 2005. Vascular Nitric Oxide and Oxidative Stress: 

Determinants of Endothelial Adaptations to Cardiovascular Disease and to Physical 

Activity. Can J Appl Physiol 30(4): 442-474. 

Sartika, R.A.D. 2009. Pengaruh suhu dan lama proses menggoreng (deep frying) 

terhadap pembentukan asam lemak trans. Markara Sains 13: 23-8. 

Suryohudoyo, P. 2000. Kapita Selekta Ilmu Kedokteran Molekuler. Perpustakaan 

Nasional RI. Jakarta. Penerbit CV Sagung Seto. hal: 31-47. 

Suwandi, T. 2011. “Pemberian Ekstrak Kelopak Bunga Rosela Menurunkan 

Malondialdehid Pada Tikus Yang Diberi Minyak Jelantah” (penelitian 

pendahuluan). Denpasar: Universitas Udayana. 

Szocs, K. 2004. Endothelial Dysfunction and Reactive Oxygen Species Production in 

Ischemia/Reperfusion and Nitrate Tolerance. Gen Physiol. Biophys 23: 265-295. 

Thadeus, M.S. 2006. Pengaruh Vitamin C dan Vitamin E terhadap Perubahan 

Struktur Histologik Hati, Jantung dan Aorta Mencit (Mus Musculus L.) Galur

Swiss Derived Akibat Pemberian Minyak Jelantah. Available from: 

http://lontar.cs.ui.ac.id/gateway/file?file=digital/85412-T-16208a.pdf. (25 

Oktober 2010). 

Ulilalbab, A. 2010. Aktivitas Antioksidan Tablet Effervescent Rosella Ungu Sebagai 

Suplement Penghambat Laju Peroksidasi Melalui Pengujian In Vivo. PKM-P. 

Ilmu dan Teknologi Pangan. Malang. Universitas Brawijaya. 

Usoh, I.F., Akpan, E.J., Etim, E.O., Farombi, E.O. 2005. Antioxidant Actions of 

Dried Flower Extracts of Hibiscus sabdariffa L. On Sodium Arsenite - Induced 

Oxidative Stress in Rats. Pakistan Journal of Nutrition 4(3): 135-141. 

Utami, T.S., Arbianti, R., Hermansyah, H., Reza, A., Rini. 2009. Perbandingan 

Aktifitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Simpur (Dillenia indica) dari 

Berbagai Metode Ekstraksi dengan Uji ANOVA. Seminar Nasional Teknik 

Kimia Indonesia-SNTKI 2009. pp:1-4. 

Yustinah. 2009. Pengaruh massa absorben chitin pada penurunan kadar asam lemak 

bebas (FFA), bilangan peroksida, dan warna gelap minyak goreng bekas. 

Seminar Nasional Teknik Kimia Indonesia – SNTKI 2009. pp:1-14.

Lampiran 1. 

TABEL KONVERSI PERHITUNGAN DOSIS LAURENCE & BACHARACH 

(Kusumawati, 2004) 

Mencit 

20 gr 

Tikus 

200 gr 

Marmot 

400 gr 

Kelinci 

1,5 kg 

Kucing 

2 kg 

Kera 

4 kg 

Anjing 

12 kg 

Manusia 

70 kg 

Mencit 

20 gr 

Tikus 

200 

gr 

Marmot 

400 gr 

Kelinci 

1,5 kg 

Kucing 

2 kg 

Kera 

4 kg 

Anjing 

12 kg 

Manusia 

70 kg 

1.0 7.0 12.25 27.8 29.7 64.1 124.2 387.9 

0.14 1.0 1.74 3.9 4.2 9.2 17.8 56.0 

0.08 0.57 1.0 2.25 2.4 5.2 10.2 31.5 

0.04 0.25 0.44 1.0 1.08 2.4 4.5 14.2 

0.03 0.23 0.41 0.92 1.0 2.2 4.1 13.0 

0.016 0.11 0.19 0.42 0.45 1.0 1.9 6.1 

0.008 0.06 0.1 0.22 0.24 0.52 1.0 3.1 

0.0026 0.018 0.031 0.07 0.076 0.16 0.32 1.0

Lampiran 2 

Uji Normalitas Data MDA Sebelum dan Sesudah Perlakuan 

MDA_ 

pre 

minyak 

jelanta 

h 

MDA_ 

post 

Kelompok 

Tests of Normality 

Kolmogorov-Smirnov a Shapiro-Wilk 

Statistic df Sig. Statistic df Sig. 

Kontrol .198 6 .200 * .961 6 .831 

ekstrak dosis 250 mg/kg BB .218 6 .200 * .923 6 .528 


Kontrol .200 6 .200 * .939 6 .650 



Kontrol .140 6 .200 * .986 6 .978 



a. Lilliefors Significance Correction 

*. This is a lower bound of the true 

significance.

Lampiran 3 

Uji One Way Anova 

MDA_ 

pre 

minyak 

jelanta 

h 

MDA_ 

post 

N Mean 

Descriptives 

Std. 

Deviation 

Std. 

Error 

95% Confidence 

Interval for Mean 

Lower 

Bound 

Upper 

Bound 

Mini 

mum 

Maxi 

mum 

Kontrol 6 2.0183 .23147 .09450 1.7754 2.2612 1.74 2.38 

ekstrak dosis 

250 mg/kg BB 


500 mg/kg BB 

6 2.0050 .19937 .08139 1.7958 2.2142 1.74 2.25 

6 2.1150 .16861 .06884 1.9381 2.2919 1.87 2.32 

Total 18 2.0461 .19584 .04616 1.9487 2.1435 1.74 2.38 

Kontrol 6 7.4017 .33457 .13659 7.0506 7.7528 6.87 7.77 


250 mg/kg BB 


500 mg/kg BB 

6 7.2167 .56747 .23167 6.6211 7.8122 6.66 7.91 

6 6.8450 .49083 .20038 6.3299 7.3601 6.38 7.70 

Total 18 7.1544 .50520 .11908 6.9032 7.4057 6.38 7.91 

Kontrol 6 7.7933 .32426 .13238 7.4530 8.1336 7.32 8.21 


250 mg/kg BB 


500 mg/kg BB 

6 5.1933 .29575 .12074 4.8830 5.5037 4.76 5.53 

6 3.4083 .36213 .14784 3.0283 3.7884 2.97 3.98 

Total 18 5.4650 1.87817 .44269 4.5310 6.3990 2.97 8.21 

Test of Homogeneity of Variances 

Levene 

Statistic df1 df2 Sig. 

MDA_pre .227 2 15 .799 

Minyak jelantah 1.600 2 15 .234 

MDA_post .092 2 15 .912

ANOVA 

Sum of 

Squares df 

Mean 

Square F Sig. 

MDA_pre Between Groups .043 2 .022 .533 .598 

Minyak 

jelantah 

Within Groups .609 15 .041 

Total .652 17 

Between Groups .964 2 .482 2.144 .152 

Within Groups 3.374 15 .225 

Total 4.339 17 

MDA_post Between Groups 58.349 2 29.174 270.342 .000 

Post Hoc Tests 

LSD 

Within Groups 1.619 15 .108 

Total 59.968 17 

Depe 

ndent 

Varia 

ble (I) Kelompok (J) Kelompok 

MDA 

_post 

Kontrol ekstrak dosis 

250 mg/kg BB 


250 mg/kg BB 


500 mg/kg BB 


500 mg/kg BB 

Multiple Comparisons 

Mean 

Difference 

(I-J) 

Std. 

Error Sig. 

95% Confidence 

Interval 

Lower 

Bound 

Upper 

Bound 

2.60000 * .18966 .000 2.1957 3.0043 

4.38500 * .18966 .000 3.9807 4.7893 

Kontrol -2.60000 * .18966 .000 -3.0043 -2.1957 


500 mg/kg BB 

1.78500 * .18966 .000 1.3807 2.1893 

Kontrol -4.38500 * .18966 .000 -4.7893 -3.9807 


250 mg/kg BB 

*. The mean difference is significant at 

the 0.05 level. 

-1.78500 * .18966 .000 -2.1893 -1.3807

pemberian ekstrak kelopak bunga rosela menurunkan ...

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?