Modul Mikroskopis TB.indd - TB Indonesia

ii 

Modul Pela han Pemeriksaan Dahak Mikroskopis TB 

616.995 1 

Ind 

m

616.995 1 

Ind 

m 

Katalog Dalam Terbitan. Kementerian Kesehatan RI 

Indonesia. Kementerian Kesehatan RI. Direktorat 

Jenderal Bina Upaya Kesehatan 

Modul pelatihan pemeriksaan mikroskopis TB,-- 

Jakarta : Kementerian Kesehatan RI. 20121 

ISBN 978-602-235-145-0 

1. Judul I. TUBERCULOSIS - DIAGNOSIS 

II. TUBERCULOSIS - LABORATORY MANUALS 

III. MICROSCOPY - LABORATORY MANUALS 

KATA PENGANTAR 

Puji dan syukur kami panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Kuasa atas rahmat dan 

hidayah-Nya sehingga penyusunan Modul Pelatihan Pemeriksaan Mikroskopis TB ini 

dapat tersusun dengan baik. 

Sesuai dengan Undang-undang Nomor 21 tahun 2001 yang mengatur tentang 

kurikulum dan modul buku ini disusun sebagai acuan pada penyelenggaraan pelatihan 

pemeriksaan mikroskopis TB sehingga proses pelatihan diharapkan berjalan secara 

sistematis, terarah dan dapat mencapai tujuan yang telah ditentukan. 

Kami mengucapkan terima kasih kepada Kelompok Kerja Laboratorium TB dan 

semua pihak yang telah bekerja sama untuk menyusun Modul Pelatihan Pemeriksaan 

Mikroskopis TB. Harapan kami semoga buku ini bermanfaat dalam penyelenggaraan 

pelatihan sehingga dapat meningkatkan keterampilan petugas laboratorium TB dan 

menghasilkan pemeriksaan yang bermutu. 

Disadari bahwa modul ini masih jauh dari sempurna, untuk itu saran dan kritik 

yang membangun sangat diharapkan demi perbaikan dan penyempurnaan di masa 

yang akan datang. 

Direktur Jenderal Bina Upaya Kesehatan 

Dr. Supriyantoro, SpP, MARS 

Modul Pela han Pemeriksaan Dahak Mikroskopis TB i

MATERI INTI 2 PENGUMPULAN CONTOH UJI (SPESIMEN) DAHAK ....................28 

A. DESKRIPSI SINGKAT ..........................................................................................28 

B. TUJUAN PEMBELAJARAN ..................................................................................28 

C. POKOK BAHASAN ...............................................................................................28 

D. BAHAN BELAJAR .................................................................................................29 

E. URAIAN MATERI ..................................................................................................29 

F. REFERENSI..........................................................................................................33 

G. LATIHAN ...............................................................................................................33 

MATERI INTI 3 PENGGUNAAN DAN PERAWATAN MIKROSKOP ............................34 






F. REFERENSI..........................................................................................................39 

G. LATIHAN: ..............................................................................................................39 

MATERI INTI 4 PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TB ..................................................40 






F. REFERENSI..........................................................................................................53 

G. LATIHAN ...............................................................................................................53 

MATERI INTI 5 PEMANTAPAN MUTU LABORATORIUM MIKROSKOPIS TB ............54 






F. REFERENSI..........................................................................................................63 

G. LATIHAN ...............................................................................................................63 

MATERI INTI 6 PENCATATAN KEGIATAN PEMERIKSAAN LAB TB ..........................64 



C. POKOK-POKOK BAHASAN .................................................................................64 



F. REFERENSI..........................................................................................................65 

G. LATIHAN ...............................................................................................................65 

vi 


KATA SAMBUTAN 

Laboratorium mikroskopis TB merupakan komponen utama dalam pengendalian 

penyakit TB. Laboratorium mikroskopis sebagai manifestasi dari komponen kedua 

strategi DOTS dapat berfungsi optimal apabila dilaksanakan oleh Sumber Daya Manusia 

yang terampil dan memiliki kompetensi standar. 

Terdapat 5540 PRM, PPM dan RS yang melakukan pemeriksaan mikroskopis TB 

dari penjaringan suspek sampai pencatatan pelaporan dan 4149 PS yang melakukan 

penjaringan suspek sampai dengan fi ksasi sediaan dahak mikroskopis. Pelatihan 

pemeriksaan dahak mikroskopis TB perlu dilaksanakan secara berkesinambungan, baik 

dalam bentuk pelatihan awal maupun pelatihan ulang. 

Modul Pelatihan Pemeriksaan Dahak Mikroskopis TB ini diperlukan sebagai bahan 

ajar peningkatan kapasitas petugas laboratorium dalam kemampuan teknis pemeriksaan 

dahak mikroskopis TB termasuk pemantapan mutu laboratorium dan pencatatan 

pelaporan. Diharapkan setelah mengikuti pelatihan, petugas dapat melaksanakan 

strategi DOTS kedua yaitu pemeriksaan dahak miroskopis TB sesuai dengan standar. 

Akhirnya kami sampaikan penghargaan dan terima kasih kepada tim penyusun dan 

narasumber serta pihak yang telah berkontribusi dalam penyusunan modul ini. Semoga 

bermanfaat bagi semua pihak terkait, terutama dalam menjaga dan meningkatkan 

kualitas pemeriksaan mikroskopis TB. 

Jakarta, Agustus 2012 

Direktur Jenderal PP dan PL 

Prof Dr. Tjandra Yoga Aditama 

NIP. 195509031980121001 

Modul Pela han Pemeriksaan Dahak Mikroskopis TB iii

iv 

TIM PENYUSUN 

Dr. Sri Widyastuti Subdit BP Mikrobiologi dan Imunologi 

Dra. Siti Sumartini, M.Kes Subdit BP Mikrobiologi dan Imunologi 

Drg. Dyah Erti Mustikawati, MPH Subdit TB, Dit P2ML 

Prof. Agus Sjahrurrachman, Sp.MK Kelompok Kerja Laboratorium TB 

Dr. Harini Janiar, Sp.PK Kelompok Kerja Laboratorium TB 

Dr. Koesprijanti, Sp.PK Kelompok Kerja Laboratorium TB 

Drs. Isak Solihin, M.Kes Kelompok Kerja Laboratorium TB 

Dra. Ning Rintiswati, M.Kes Kelompok Kerja Laborato rium TB 

Dr. Irfan Ediyanto Subdit TB, Dit P2ML 

Dr. Retno Kusuma Dewi Subdit TB, Dit P2ML 

Dr. Wiwi Ambarwati Subdit BP Mikrobiologi dan Imunologi 

Agus Susanto, SKM, M.Kes Subdit BP Mikrobiologi dan Imunologi 

Roni Chandra, S.Si, M.Biomedi KNCV 


DAFTAR ISI 

KATA PENGANTAR ......................................................................................................... i 

KATA SAMBUTAN ..........................................................................................................iii 

TIM PENYUSUN ........................................................................................................... iv 

DAFTAR ISI .................................................................................................................... v 

PENGANTAR PELATIHAN PEMERIKSAAN DAHAK MIKROSKOPIS TB.....................1 

A. LATAR BELAKANG .................................................................................................1 

B. TUJUAN PEMBELAJARAN ....................................................................................1 

C. METODE DAN ALUR PEMBELAJARAN ................................................................2 

D. ALUR PROSES PELATIHAN ..................................................................................2 

E. PRAKTEK LABORATORIUM : ................................................................................3 

F. MATERI ...................................................................................................................4 

G. SASARAN MODUL .................................................................................................4 

H. JADWAL HARIAN ...................................................................................................4 

MATERI DASAR 1. KEBIJAKAN NASIONAL PROGRAM PENGENDALIAN 

TB DI INDONESIA ..........................................................................................................6 

A. DESKRIPSI SINGKAT ............................................................................................6 

B. TUJUAN PEMBELAJARAN ....................................................................................6 

C. POKOK BAHASAN .................................................................................................6 

D. BAHAN BELAJAR ...................................................................................................6 

E. URAIAN MATERI ....................................................................................................7 

F. REFERENSI..........................................................................................................13 

G. LATIHAN ...............................................................................................................13 

MATERI DASAR 2 KEBIJAKAN LABORATORIUM DALAM MENDUKUNG 

PROGRAM TB .............................................................................................................14 






F. REFERENSI..........................................................................................................19 

G. LATIHAN ...............................................................................................................19 

MATERI INTI 1 PENCEGAHAN & PENGENDALIAN INFEKSI (K3 LAB) ...................20 



C. POKOK BAHASAN DAN ATAU SUB POKOK BAHASAN ....................................20 



F. REFERENSI..........................................................................................................27 

G. LATIHAN ...............................................................................................................27 

Modul Pela han Pemeriksaan Dahak Mikroskopis TB v

4 

6. Pencatatan dan Pelaporan Hasil Pemeriksaan 1 2 3 

C 

Mikroskopis TB 

Materi Penunjang 

Membangun Komitmen Pembelajaran 0 1 1 

JUMLAH 10 39 49 

F. MATERI 

Materi pelatihan merupakan sistematis praktis yang aplikatif untuk meningkatkan 

keterampilan petugas teknis mikroskopis TB di Fasyankes, meliputi: 

1. Kebijakan Nasional Program Pengendalian TB di Inddonesia 

2. Kebijakan Laboratorium Kesehatan dalam mendukung P2TB 

3. Keamanan kerja di Laboratorium/Pencegahan dan Pengendalian Infeksi (PPI) 

4. Pengumpulan contoh uji (spesimen) dahak 

5. Penggunaan dan Perawatan Mikroskop 

6. Pemeriksaan Mikroskopis TB 

7. Pemantapan Mutu Laboratorium Mikroskopis TB 

8. Pencatatan dan Pelaporan Hasil Pemeriksaan Mikroskopis TB 

Masing-masing materi terdiri dari sub bahasan dan sub-sub bahasan yang diuraikan 

secara rinci pada Topik Materi. 

G. SASARAN MODUL 

Modul ini disusun untuk pelatihan tenaga teknis laboratorium di Fasyankes guna 

meningkatkan keterampilan pemeriksaan mikroskopis TB. Materi dalam modul 

ini dipergunakan secara utuh pada “Initial training” tenaga teknis laboratorium 

mikroskopis TB di Fasyankes dengan bobot sesuai kurikulum yang telah diakreditasi 

Pusat Diklat SDM Kesehatan Badan PPSDM Kemenkes RI. Sedangkan pada 

pelatihan penyegaran (refreshing training) secara prinsip sama, hanya memberikan 

penekanan pada sub bahasan tertentu atau sesuai permasalahan yang ditemukan 

di laboratorium. 

H. JADWAL HARIAN 

Pelatihan teknis laboratorium mikroskopis TB ini akan diselenggarakan selama 5 

(lima) hari efektif atau 7 (tujuh) hari termasuk hari kedatangan dan kepulangan. 

Secara rinci kegiatan pelatihan disusun dalam Jadwal Pelatihan Mikroskopis TB di 

bawah ini. 


PENGANTAR 

PELATIHAN PEMERIKSAAN DAHAK MIKROSKOPIS TB 

A. LATAR BELAKANG 

Laboratorium Mikroskopis merupakan penunjang utama untuk tata laksana pasien 

Tuberkulosis. Ketersediaan perangkat laboratorium mikroskopis tidak dapat 

dipisahkan dalam memberikan pelayanan tata laksana pasien TB selain obat anti 

tuberkulosis (OAT). 

Laboratorium Mikroskopis sebagai manisfestasi dari komponen kedua dari strategi 

DOTS akan berperan dan berfungsi maksimal apabila dilaksanakan oleh sumber daya 

manusia (SDM) yang terampil dan mempunyai kompetensi yang standar. Semua 

institusi fasilitas pelayanan kesehatan yang melakukan pemeriksaan mikroskopis 

harus dikelola dan dilaksanakan oleh SDM yang terlatih dan terakreditasi. 

Secara nasional, hampir semua tenaga laboratorium di Fasyankes pelaksana 

DOTS telah terlatih pemeriksaan mikoroskopis TB, tetapi dengan adanya mutasi 

dan pengembangan/ pemekaran daerah yang diikuti oleh penambahan Fasyankes, 

dan kemajuan di bidang teknis Pengendalian TB, maka diperlukan pelatihan secara 

berkesinambungan, baik untuk pelatihan awal (initial) maupun pelatihan ulang 

(refreshing) 

Sebagai upaya pemenuhan tenaga teknis laboratorium yang terampil sesuai 

kebutuhan program, diperlukan pelatihan dengan kurikulum yang terakreditasi serta 

dilengkapi dengan materi pembelajaran yang konsisten dan sistematis. Pelatihan 

Pemeriksaan Mikroskopis TB ini adalah untuk petugas teknis laboratorium 

Fasyankes dengan fi losofi peningkatan ketrampilan teknis. 

B. TUJUAN PEMBELAJARAN 

Tujuan Pembelajaran Umum (TPU): 

Setelah menyelesaikan materi ini, peserta latih mampu melakukan kegiatan 

pemeriksaan mikroskopis TB di Fasyankes secara benar. 

Tujuan Pembelajaran Khusus (TPK): 

Setelah menyelesaikan materi ini, peserta mampu melakukan: 

1. Kebijakan Program Nasional Pengendalian Tuberkulosis 

Modul Pela han Pemeriksaan Dahak Mikroskopis TB 1

2 

2. Kebijakan Laboratorium dalam mendukung Program Nasional Pengendalian 

Tuberkulosis 

3. Pencegahan dan Pengendalian Infeksi 

4. Pengumpulan contoh uji (spesimen) dahak 

5. Penggunaan dan Pemeliharaan Mikroskop 

6. Pemeriksaan Mikroskopis TB 

7. Pemantapan Mutu Pemeriksaan Mikroskopis TB 

8. Pencatatan dan Pelaporan Hasil Pemeriksaan Mikroskopis TB 

C. METODE DAN ALUR PEMBELAJARAN 

Metode pelatihan ini menerapkan pendekatan pembelajaran orang dewasa 

atau andragogy dengan menggunakan sistem modul dan berbagai bahan yang 

memungkinkan partisipasi aktif para peserta seperti kegiatan diskusi, demonstrasi, 

simulasi/role play, penugasan, praktek lapangan, diskusi panel dan tugas mandiri. 

Pembahasan “teori” materi modul dengan praktek dilaksanakan secara berseri, 

sesuai dengan tahapannya. Antara materi yang satu dengan lainnya, adalah satu 

kesatuan yang utuh dan dibahas atau dipraktekan secara berurutan. 

Untuk efi siensi dan efektifi tas pelatihan, penyelenggaraan rangkaian kegiatan 

pelatihan dilaksanakan di BBLK/ BLK. Apabila BBLK/ BLK tidak mempunyai fasiltas 

kegiatan kelas, maka diupayakan tempatnya berdekatan dengan BBLK/ BLK. Hal ini 

untuk mengoptimalkan waktu antara teori dengan praktek 

D. Alur Proses Pelatihan Digambarkan sebagai Berikut : 


E. PRAKTEK LABORATORIUM : 

Dalam mengikuti proses pelatihan ini peserta latih, selain membahas materi dalam 

kelas, akan melaksanakan praktek langsung rangkaian pemeriksaan mikroskopis 

dahak di laboratorium. Selama praktek laboratorium, peserta akan dibagi dalam 

kelompok, sesuai dengan jumlah instruktur dan fasilitas yang tersedia. Rangkaian 

kegiatan praktek antara lain: 

1. Pengantar dari Instruktur 

2. Praktek Mikroskopis TB: 

a) Demo sesuai bahan dan sarana latih 

b) Pengenalan dan Perawatan Sarana dan bahan Laboratorium TB. 

c) Pembuatan Sedian 

d) Pembacaan Sediaan 

e) Pencatatan dan Pelaporan hasil pemeriksaan. 

3. Penilaian : 

a) Pre dan post test 

b) Evaluasi kinerja harian 

Dalam penjadwalan dan alokasi waktu proporsi antara latihan dan praktek dengan 

teori kelas atau kelompok antara 81 % (praktek/latihan ) berbanding 19 % (teori) 

yang dirinci sbb: 

No MATERI 

T 

Waktu JPL 

P Jumlah 

A Materi Dasar 

1. Kebijakan Program Nasional Pengendalian TB 1 0 1 

2. Kebijakan Lab dalam mendukung P2TB 1 0 1 

B Materi Inti 

1. Pencegahan & Pengendalian Infeksi (PPI) 1 0 1 

2. Pengumpulan contoh uji (specimen) Dahak 1 1 2 

3. Penggunaan & Perawatan Mikroskop 1 2 3 

4. Pemeriksaan Mikroskopis TB 2 0 2 

4.1. Pembuatan Sediaan 0 15 15 

4.2. Pembacaan Sediaan 0 13 13 

5. Pemantapan Mutu Laboratorium TB 

5.1. Pemantapan Mutu Internal 1 3 4 

5.2. Pemantapan Mutu Eksternal dan Peningkatan Mutu 1 

Laboratorium Mikroskopis TB 

2 3 


8 

2. Visi, Misi Dan Tujuan Program Nasional Pengendalian TB 

a. Visi: Masyarakat Bebas Masalah TB, Sehat Dan Mandiri 

b. Misi: 

1) Meningkatkan pemberdayaan masyarakat, termasuk swasta dan 

masyarakat madani dalam pengendalian TB. 

2) Menjamin ketersediaan pelayanan TB yang paripurna, merata, bermutu, 

dan berkeadilan. 

3) Menjamin ketersediaan dan pemerataan sumberdaya pengendalian TB. 

4) Menciptakan tata kelola program TB yang baik. 

c. Tujuan: 

Menurunkan angka kesakitan dan kematian akibat TB dalam rangka 

pencapaian tujuan pembangunan kesehatan untuk meningkatkan derajat 

kesehatan masyarakat. 

d. Strategi Kebijakan Nasional Pengendalian TB 

1) Meningkatkan ekspansi DOTS yang berkualitas 

2) Menangani TB/HIV, MDR-TB, TB anak, kebutuhan masyarakat miskin 

dan kelompok populasi rentan lainnya 

3) Melibatkan semua penyedia layanan dalam pelaksanaan ISTC 

4) Memberdayakan pasien TB dan masyarakat 

5) Memperkuat sistem kesehatan dan manajemen program pengendalian 

TB 

6) Meningkatkan komitmen pemerintah pusat dan daerah 

7) Meningkatkan penelitian, pengembangan dan pemanfaatan informasi 

strategis 

3. Kebijakan Nasional Pengendalian TB 

Kebijakan nasional pengendalian TB di Indonesia menggunakan strategi DOTS 

sesuai dengan rekomendasi WHO. Fokus utama DOTS adalah penemuan dan 

penyembuhan pasien dengan prioritas kepada pasien TB tipe menular. Strategi 

ini akan memutuskan penularan TB dan demikian menurunkan insidensi TB di 

masyarakat. Menemukan dan menyembuhkan pasien merupakan cara terbaik 

dalam upaya pencegahan penularan TB. 



MATERI DASAR 1. 

KEBIJAKAN NASIONAL PROGRAM PENGENDALIAN TB DI INDONESIA 

A. DESKRIPSI SINGKAT 

6 

Penanggulangan TB di Indonesia menggunakan strategi DOTS sejak tahun 1995 

yang bertujuan memutuskan penularan TB dan menurunkan insidensi TB di 

masyarakat. Saat ini Indonesia berada pada peringkat 5 negara dengan beban 

terbanyak penderita TB di dunia. Saat ini peran laboratorium bukan lagi menjadi 

penunjang diagnosis tetapi adalah sebagai penentu diagnosis TB. Dengan hasil 

pemeriksaan mikroskopis TB dapat ditentukan klasifi kasi dan tipe penyakit TB serta 

untuk menilai kemajuan dan hasil pengobatan pasien TB. 


Tujuan Pembelajaran Umum 

Setelah membaca materi ini diharapkan peserta dapat memahami kebijakan 

nasional program pengendalian TB di Indonesia. 

Tujuan Pembelajaran Khusus 

Setelah membaca materi ini diharapkan peserta dapat memahami: 

1. Visi, misi dan tujuan Program Nasional Pengendalian TB 

2. Perjalanan alamiah penyakit TB 

3. Pemeriksaan dahak mikroskopis dan fungsinya 

C. POKOK BAHASAN 

1. Situasi TB di Indonesia 

2. Visi, misi dan tujuan Program Nasional Pengendalian TB 

3. Perjalanan alamiah penyakit TB 

4. Pemeriksaan dahak mikroskopis dan fungsinya 

D. BAHAN BELAJAR 

Pedoman Nasional Pengendalian TB 

Strategi Nasional Pengendalian TB 2011-2014 


E. URAIAN MATERI 

1. Situasi TB di Indonesia 

Diperkirakan sekitar sepertiga penduduk dunia telah terinfeksi oleh 

M. tuberculosis. Seluruh dunia pada tahun 1995, diperkirakan ada 9 juta pasien 

TB baru dan 3 juta kematian akibat TB. Di negara-negara berkembang kematian 

TB merupakan 25% dari seluruh kematian yang sebenarnya dapat dicegah. 

Diperkirakan 95% kasus TB dan 98% kematian akibat TB di dunia terjadi pada 

negara-negara berkembang. Kematian wanita karena TB lebih banyak daripada 

kematian wanita karena kehamilan, persalinan dan nifas. 

Situasi TB di dunia semakin memburuk, sebagian besar negara di dunia yang 

dikategorikan sebagai high burden countries, jumlah kasus TB semakin tidak 

terkendali dengan banyaknya pasien TB yang tidak berhasil disembuhkan. 

Mensikapi hal tersebut, pada tahun 1993 WHO mencanangkan TB sebagai 

kedaruratan dunia (global emergency). 

Indonesia berada pada peringkat 5 negara dengan beban TB terbanyak di 

dunia dengan insidensi 429.000 per tahun setelah sebelumnya berada pada 

peringkat 3 dengan insidensi 528.000 per tahun (Global Report WHO 2009). 

Sekitar 75% pasien TB adalah kelompok usia yang paling produktif secara 

ekonomis (15-50 tahun). Seorang pasien TB dewasa akan kehilangan rata-rata 

waktu kerjanya 3 sampai 4 bulan. Hal tersebut berakibat kehilangan pendapatan 

tahunan rumah tangganya sekitar 20-30%. Jika ia meninggal akibat TB, maka 

akan kehilangan pendapatannya sekitar 15 tahun. Selain merugikan secara 

ekonomis, TB juga memberikan dampak buruk lainnya berupa stigma sosial, 

bahkan mungkin dikucilkan oleh masyarakat. 

Penatalaksanaan pasien TB di Indonesia masih belum seragam dan masih 

banyak pasien TB yang belum tercatat dan terlaporkan. Hal ini menyebabkan 

risiko terjadinya kekebalan terhadap OAT dengan meningkatnya kasus MDR 

(Multi Drug Resistance) dan XDR (Extremely Drug Resistance). 


12 

Penjaminan Kualitas Pemeriksaan Laboratorium 

Penjaminan kualitas pemeriksaan laboratorium dilakukan dengan pemantapan 

mutu internal, pemantapan mutu eksternal dan peningkatan mutu. 

5. Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Pemeriksaan Dahak Mikroskopis TB 

Faktor-faktor yang mempengaruhi pemeriksaan dahak mikroskopis TB adalah 

faktor di dalam laboratorium (pembuatan sediaan, pembacaan sediaan, 

pencatatan dan pelaporan) dan faktor di luar laboratorium (pasien, petugas 

kesehatan, pengambilan sampel, pengadaan logistik, pengelola program) seperti 

tampak pada bagan di bawah ini. 

Dampak Lab yang “Jelek” 

Sakit berlanjut 

Kehilangan penghasilan 

Terus menularkan 

Meninggal 

Pengobaatan salah 

Salah diagnosis 

Ketidak-percayaan thd lab 

Pilih Rontgen 

Petugas 

Kesehatan 

Stok obat tidak cukup 

Kebutuhan lab tidak cukup 

Pasien 

Pengadaan 

Kualitas sampel tidak adequat 


Pengambilan 

Sampel 

Pengelola 

Program 

Pembuatan Sediaan Jelek 

Pengecatan Jelek 

Pembuatan 

Sediaan 

Luar Lab Dalam Lab 

Prioritas tidak tepat 

Pendanaan tidak cukup 

Pembacaan 

Sediaan 

Pembacaan tak cukup 

Salah baca 

Pencatatan & 

Pelaporan Positif palsu 

Negatif palsu 

Tanpa jaminan mutu 

Data insiden TB salah 

Strategi DOTS terdiri dari 5 komponen kunci: 

a. Komitmen politis; 

b. Pemeriksaan dahak mikroskopis yang terjamin mutunya; 

c. Pengobatan jangka pendek yang standar bagi semua kasus TB dengan tata 

laksana kasus yang tepat, termasuk pengawasan langsung pengobatan; 

d. Jaminan ketersediaan OAT yang bermutu; 

e. Sistem pencatatan dan pelaporan yang mampu memberikan penilaian 

terhadap hasil pengobatan pasien dan kinerja program secara keseluruhan. 

Perjalanan alamiah penyakit TB 

Sumber penularan TB adalah pasien TB BTA positif yang pada waktu batuk 

atau bersin mengeluarkan percikan dahak ( droplet nuklei). Daya penularan 

seorang pasien ditentukan oleh banyaknya kuman yang dikeluarkan dari 

parunya. Makin tinggi derajat kepositifan hasil pemeriksaan dahak, makin 

menular pasien tersebut. Faktor yang memungkinkan seseorang terpajan 


10 

kuman TB ditentukan oleh konsentrasi percikan dahak dalam udara dan 

lamanya menghirup udara tersebut. Selain itu faktor yang mempengaruhi 

kemungkinan seseorang menjadi pasien TB adalah daya tahan tubuh yang 

rendah, diantaranya infeksi HIV/ AIDS dan malnutrisi (gizi buruk). Hanya 

sekitar 10% yang terinfeksi TB akan menjadi sakit TB. 

Pada pasien TB yang tidak diobati, setelah 5 tahun maka: 

- 50% meninggal 

- 25% akan sembuh sendiri dengan daya tahan tubuh yang tinggi 

- 25% menjadi kasus kronis yang tetap menular. 

Dengan pengobatan TB yang benar dengan strategi DOTS maka lebih dari 

95% akan sembuh, sedangkan apabila pasien diobati tanpa DOTS maka 

risiko terjadinya MDR akan semakin besar. 

4. Peran Laboratorium dalam Program Nasional Pengendalian TB 

Peran laboratorium dalam program nasional pengendalain TB adalah : 

a. Menegakkan diagnosis dan menentukan klasifi kasi/ tipe penyakit TB 


b. Menilai kemajuan dan hasil pengobatan 

c. Penjaminan kualitas pemeriksaan laboratorium dilaksanakan melalui 

kegiatan pemantapan mutu 

Penegakan Diagnosis TB. 

Untuk penegakan diagnosis dilakukan 3 kali pemeriksaan dahak SPS 

Menilai Kemajuan dan Hasil Pengobatan 

Untuk menilai kemajuan dan hasil pengobatan pasien TB dilakukan pemeriksaan 

pada: 

a. Akhir fase intensif 

b. Pada bulan ke 5 pengobatan 

c. Akhir pengobatan 

d. Akhir fase sisipan pada pasien yang hasil pemeriksaan dahaknya masih 

positif di akhir fase intensif. 

Pemeriksaan laboratorium dalam pengelolaan pasien tuberkulosis 

SUSPEK 

FASE 

INTENSIF 

(2 bulan) 

FASE 

LANJUTAN 

(4 bulan) 

+ SPS PSPS PS 

+ neg neg neg 

+ neg o neg 

+ + SISIPAN 

(neg) 

neg neg 

SEMBUH 

T/ LENGKAP 

GAGAL 

DEFAULT 

MENINGGAL 

SEMBUH 


16 

3. Tantangan-Tantangan Utama dalam Implementasi Laboratorium TB di 

Indonesia 

Tantangan-tantangan utama dalam kegiatan laboratorium TB di Indonesia 

didasarkan pada kebutuhan masyarakat akan pelayanan laboratorium TB yang 

berkualitas yaitu: 

a. Pelayanan laboratorium TB untuk daerah terpencil, kepulauan, daerah 

tertinggal dan perbatasan. 

a. Pemantapan mutu laboratorium melalui sistem jejaring laboratorium TB 

belum berfungsi optimal baik mikroskopis maupun biakan dan Uji kepekaan. 

a. Pelatihan teknis laboratorium secara berkesinambungan dengan Training 

need assessment yang baik agar pelatihan tepat sasaran. 

b. Kasus HIV yang meningkat dimana infeksi penyerta yang paling banyak 

adalah TB. Pada seseorang yang terinfeksi TB, maka ko-infeksi dengan HIV 

akan meningkatkan resiko progresivitas menjadi TB aktif. 

c. Pelayanan laboratorium TB yang dibutuhkan untuk mendukung penanganan 

kasus TB MDR dan XDR. Diperlukan terobosan untuk percepatan 

pengembangan. pelayanan biakan dan uji kepekaan terutama di luar Jawa. 

4. Jejaring Laboratorium TB dan Pemantapan Mutu 

Pemeriksaan laboratorium TB dilaksanakan di fasilitas pelayanan kesehatan 

mulai dari tingkat Kecamatan, Kabupaten/Kota, provinsi, maupun nasional. 

kemampuan pemeriksaan di setiap jenjang laboratorium berbeda sehingga 

diperlukan suatu sistem jejaring laboratorium TB untuk melaksanakan rujukan 

pemeriksaan dan pemantapan mutu. 

Kegiatan pemantapan mutu eksternal yang dilaksanakan dengan cara uji silang 

secara buta (blinded re-checking), supervisi (on site evaluation) dan uji profi siensi 

(panel testing). 

Unit yang terkait dengan PME mikroskopis TB adalah fasyankes diagnostik 

mikroskopis TB, laboratorium rujukan uji silang, laboratorium rujukan propinsi, 

Laboratorium Rujukan Nasional, Dinas Kesehatan Kabupaten/Kota, Dinas 

Kesehatan Propinsi, Subdit Mikrobiologi & Imunologi (Dit. Bina Pelayanan 

Penunjang Medik dan Sarana Kesehatan) dan Subdit Tuberkulosis (Dit. PPML). 


Dampak Lab yang “berkualitas” 

Sembuh/ sehat 

Tetap bekerja 

Tidak menular 

Pengobaatan tepat 

Rontgen atas indikasi 

Diagnosis benar 

Percaya thd lab 

Petugas 

Kesehatan 

Stok obat cukup 

Kebutuhan lab cukup 

Pasien 

Pengadaan 

F. REFERENSI 

Pedoman Nasional Pengendalian TB 

Pengambilan 

Sampel 

Pengelola 

Program 

Pembuatan Sediaan Baik 

Pengecatan Baik 

Pembuatan 

Sediaan 

Luar Lab Dalam Lab 

Pembacaan 

Sediaan 

Pencatatan & 

Pelaporan 

Prioritas tepat 

Pendanaan cukup 

Pembacaan cukup 

Pembacaan benar 

Hasil yang akurat 

Ada jaminan mutu 

Data insiden TB benar 

G. LATIHAN 

1. Apa Visi, Misi Dan Tujuan Program Nasional Pengendalian TB? 

2. Apa saja Peran Laboratorium Dalam Program Nasional Pengendalian TB? 

3. Apa yang akan terjadi bila pemeriksaan laboratorium tidak baik? 

4. Faktor apa saja yang mempengaruhi kualitas pemeriksaan laboratorium? 


MATERI DASAR 2 

KEBIJAKAN LABORATORIUM DALAM MENDUKUNG PROGRAM TB 


Dalam mendukung program TB diperlukan laboratorium yang kinerjanya dipantau 

melalui pemantapan mutu, sehingga hasil pemeriksaan laboratorium terpercaya. 

Untuk menjamin mutu pelayanan laboratorium TB diperlukan penguatan jejaring 

yang dilaksanakan melalui penerapan regulasi, standar, pedoman; fasilitasi; 

peningkatan koordinasi antara pusat dan daerah; peningkatan sumber daya dan 

kerjasama organisasi profesi laboratorium dan mitra kerja. 



Setelah menyelesaikan materi ini peserta latih mampu memahami Kebijakan 

Laboratorium dalam mendukung program TB Nasional 

14 


Setelah menyelsaikan materi ini, peserta latih mampu menjelaskan: 

1. Situasi laboratorium TB di Indonesia 

2. Peran Laboratorium dalam mendukung program TB 

3. Jejaring Laboratorium TB dan Pemantapan Mutu laboratorium 

4. Tantangan-Tantangan Utama Dalam Implementasi Laboratorium TB Di Indonesia 

5. Indikator dan Target 

6. Rumusan Strategi 


1. Situasi laboratorium TB di Indonesia 

2. Peran Laboratorium dalam mendukung program TB 

3. Jejaring Laboratorium TB dan Pemantapan Mutu laboratorium 

4. Tantangan-Tantangan Utama Dalam Implementasi Laboratorium TB Di Indonesia 





1. Rencana kerja Laboratorium TB 

2. Standar Pelayanan Laboratorium Tuberkulosis 


1. Situasi Laboratorium TB di Indonesia 

a. Kebijakan, pedoman, standar, kriteria bidang teknis & manajemen 

laboratorium belum dilaksanakan optimal 

b. Jejaring pelayanan laboratorium belum berjalan optimal 

1) Sumber daya laboratorium yang belum sesuai standar 

2) Geografi s Indonesia yang luas dan bervariasi 

3) Adanya kebijakan otonomi daerah 

c. Koordinasi lintas program dengan laboratorium di tingkat pusat, provinsi & 

kab/kota belum optimal 

2. Peran Laboratorium Dalam Mendukung Program TB 

Dalam program penanggulangan TB, pemeriksaan mikroskopis dahak merupakan 

komponen kunci untuk menegakkan diagnosis serta evaluasi dan tindak lanjut 

pengobatan pemeriksaan 3 spesimen (SPS) dahak secara mikroskopis nilainya 

identik dengan pemeriksaan dahak secara biakan. Diagnosis TB melalui 

pemeriksaan biakan dahak merupakan metode baku emas (gold standard) namun 

memerlukan waktu relatif lama dan mahal. Pemeriksaan dahak mikroskopis 

merupakan pemeriksaan yang paling efi sien, mudah, murah, bersifat spesifi k dan 

dapat dilaksanakan di semua unit laboratorium yang kinerjanya harus dipantau 

melalui sistem pemantapan mutu laboratorium. 

Operasionalisasi Kegiatan Laboratorium TB 

a. Penemuan kasus 

b. Monitoring pengelolaan kasus 

c. Pengembangan jejaring dan pemantapan mutu 

d. Pencatatan dan pelaporan 


MATERI INTI 1 

PENCEGAHAN & PENGENDALIAN INFEKSI (K3 LAB) 


Pemeriksaan laboratorium merupakan pekerjaan dengan risiko infeksi karena 

berhubungan dengan bahan-bahan yang infeksius. Untuk mencegah risiko ini 

diperlukan pengetahuan dan praktek laboratorium yang baik, selain itu harus 

tersedia sarana dan prasarana yang menunjang. 



Setelah menyelesaikan modul ini, peserta latih mampu memahami dan terampil 

melakukan pengendalian penyakit infeksi pada waktu melakukan pemeriksaan 

laboratorium mikroskopis TB. 

20 


Setelah menyelesaikan modul ini, peserta latih mampu : 

1. Memahami risiko yang timbul jika bekerja dalam kondisi yang tidak aman 

2. Memahami peran dan fungsi setiap petugas dalam melakukan pengendalian 

penyakit infeksi 

3. Melakukan pengendalian penyakit infeksi sesuai standar. 

C. POKOK BAHASAN DAN ATAU SUB POKOK BAHASAN 

1. Sarana dan tata ruang laboratorium 

2. Peralatan dan fasilitas laboratorium 

3. Pengelolaan limbah 

4. Praktek PPI 

5. Kesiapan kedaruratan 

6. Prosedur tetap 


1. Pedoman Manajerial Pencegahan dan Pengendalian Infeksi di RS dan Fasyankes 

lainnya, Yanmed tahun 2006, Depkes RI & Perdalin 

2. Pedoman Pencegahan dan Pengendalian Infeksi Tuberkulosis di Puskesmas 

tahun 2010, Dit. Bina Upaya Kesehatan Dasar. 


Jejaring laboratorium TB sebagai tertera dibawah ini: 

Saat ini terdapat 3 laboratorium rujukan nasional yaitu: 

a. BBLK Surabaya sebagai Lab Rujukan Nasional untuk pemeriksaan 

biakan dan uji kepekaan Tuberkulosis fenotipik 

b. BLK Provinsi Jawa Barat sebagai Lab Rujukan Nasional untuk 

pemeriksaan mikroskopis Tuberkulosis 


18 

c. Departemen Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia untuk 

penelitian operasional Tuberkulosis, pemeriksaan molekuler, serologi 

dan Mycobacterium Other Than Tuberculosis (MOTT) 


Indikator dan Target Laboratorium Tuberkulosis yang akan dicapai pada 2014 

adalah sebagai berikut : 

Indikator Target 2014 

Proporsi jumlah laboratorium rujukan uji silang 100% 

mikroskopis provinsi berfungsi sesuai pedoman 

Proporsi jumlah laboratorium mikroskopis di 80% 

sarana kesehatan yang memiliki petugas terlatih 

Kualitas kinerja laboratorium mikroskopis TB 

a. Tingkat kesalahan 

Tidak melampaui pedoman 

b. Cakupan uji silang 

90% 

c. Kualitas sediaan untuk uji silang harus baik 90% 

d. Rutinitas melakukan uji silang sesuai pedoman Per triwulan 

Jumlah Laboratorium Rujukan TB Propinsi 46 

mampu melakukan pemeriksaan biakan M 

tuberculosis sesuai standar* 

Jumlah Laboratorium Rujukan TB Propinsi 

mampu melakukan pemeriksaan biakan & Uji 

kepekaan* 

Jumlah Laboratorium Rujukan TB Provinsi siap 

mendukung survei Uji kepekaan di 4 provinsi* 

Proporsi jumlah Laboratorium biakan dan Uji 

kepekaan TB telah menjalankan Biosafety 

sesuai standar 

Proporsi BBLK/BLK tersertifi kasi untuk 

pemeriksaan laboratorium mikroskopis TB 

Jumlah fasilitas Laboratorium Rujukan Provinsi 

tersertifi kasi dalam pemeriksaan biakan dan Uji 

kepekaan oleh Laboratorium Rujukan Nasional 

Terbentuknya laboratorium rujukan TB nasional 

dan regional 


17 

17 

100% 

100% 

8 

3 lab nasional 

8 lab regional 

Pencatatan dan pelaporan laboratorium TB 

secara elektronik terintegrasi dalam program TB 

Melakukan validasi metode baru untuk 

pemeriksaan laboratorium TB 

TB 12 elektronik 

Rapid culture/DST method , 

Uji molekuler 


a. Kebijakan 

1) Upaya penguatan jejaring laboratorium TB dilaksanakan melalui 

kerjasama lintas sektor dan program di pusat dan daerah, sesuai tugas 

pokok dan fungsi institusi dengan melibatkan ahli laboratorium. 

2) Upaya peningkatan SDM teknis laboratorium TB di semua fasyankes 

pemerintah maupun swasta melalui pendidikan dan pelatihan, kalakarya, 

supervisi dengan melibatkan berbagai institusi di dalam dan luar negeri. 

3) Pemantapan mutu laboratorium TB dilaksanakan secara berjenjang dan 

difasilitasi oleh peran pusat dan daerah serta sektor terkait. Pemantapan 

mutu eksternal laboratorium mikroskopis dilaksanakan dengan metode 

LQAS. 

b. Strategi 

1) Penjaminan mutu pelayanan laboratorium TB 

2) Implementasi sistem jejaring laboratorium biakan dan Uji kepekaan M.Tb 

3) Penguatan jejaring laboratorium TB 

4) Menjamin pelaksanaan pemeriksaan laboratorium TB yang aman 

5) Validasi dan penapisan metode baru pemeriksaan laboratorium TB 

dilaksanakan di laboratorium rujukan riset dan hasilnya dilaporkan melalui 

Pokja lab TB dan Komli sebelum diputuskan sebagai metode yang dapat 

digunakan di Indonesia 

F. REFERENSI 

Rencana kerja Lab TB 

Pedoman Jejaring dan Pemantapan Mutu Laboratorium Mikroskopis TB 

G. LATIHAN 

1. Apa yang menjadi tantangan utama dalam implementasi laboratorium TB di 

indonesia? 

2. Bagaimana rumusan kebijakan laboratorium dalam mendukung program TB? 

3. Apa saja kegiatan operasional laboratorium TB? 


24 

Tersedia wadah sampah untuk : 

a. Limbah infeksius : padat, cair dan tajam. 

b. Limbah non infeksius yang dapat didaur ulang 

c. Limbah non infeksius yang tidak dapat didaur ulang 

d. Masing-masing memiliki tanda/ warna yang berbeda. 

Limbah infeksius harus di-desinfeksi dengan cara merendam dengan larutan 

disinfektan selama semalam (12 jam) sebelum dilakukan pemusnahan atau 

diangkut ke tempat lain untuk pengolahan limbah selanjutnya. Apabila pengolahan 

limbah laboratorium dilakukan pihak lain harus ada jadwal pengangkutan 

sedemikian rupa supaya tidak terjadi timbunan limbah. 

Pemusnahan dapat dilakukan dengan cara : 

a. Pembakaran, untuk mengurangi volume limbah. 

b. Penimbunan/ dikubur 

c. Limbah infeksius harus dikumpulkan pada tempat terpisah dalam wadah 

kuat tidak mudah bocor. 

1) Limbah non infeksius harus dikumpulkan pada tempat terpisah dalam 

wadah kuat tidak mudah bocor. 

2) Limbah padat dan limbah cair dipisahkan 

3) Wadah untuk limbah tajam harus kuat terhadap tusukan 

Proses dekontaminasi limbah sebelum dibuang atau dicuci 



1. Sarana dan Tata Ruang Laboratorium TB: 

a. Sarana : 

Laboratorium mikroskopis TB minimal terdiri dari : 

1) Ruang pendaftaran/ ruang tunggu. 

Ruang ini harus memiliki ventilasi yang cukup melalui pengaturan 

sirkulasi udara yang baik. 

2) Lokasi pengumpulan dahak 

Lokasi harus memiliki ventilasi yang baik dan terkena paparan sinar 

matahari langsung untuk menghindari infeksi. Sebaiknya tidak berada di 

dekat kumpulan orang banyak, agar memberikan rasa nyaman kepada 

pasien untuk berdahak dengan bebas. Prosedur tetap pengumpulan 

dahak harus dipasang di lokasi pengumpulan dahak agar pasien dapat 

membacanya terlebih dahulu. 

Harus tersedia sarana cuci tangan : air mengalir dan sabun cair agar 

pasien mencuci tangannya setelah pengumpulan dahak. 

3) Ruang kerja laboratorium 

Akses ke ruang ini hanya terbatas untuk petugas laboratorium, pintu harus 

selalu tertutup untuk mencegah turbulensi udara yang dapat mencemari 

lingkungan. Pencahayaan harus cukup terang baik bersumber dari sinar 

matahari maupun aliran listrik. 

Letak meja kerja harus dipertimbangkan agar aliran udara tidak mengarah 

kepada petugas. Sebaiknya udara mengalir dari arah belakang petugas 

laboratorium. 

4) Ruang administrasi 

Dalam keadaan keterbatasan ruang, ruangan administrasi dapat bersatu 

dengan ruang kerja laboratoium tetapi harus memiliki meja terpisah. 


22 

b. Tata Ruang laboratorium mikroskopis TB : 

a) Ruang laboratorium harus terbuat dari bahan-bahan yang mudah dibersihkan: 

i. Pertemuan dua dinding dibuat melengkung, tidak siku-siku. 

ii. Permukaan lantai, dinding dan meja kerja harus rata. 

iii. Terdapat cukup ruang antara alat dan meja kerja. 

b) Alat-alat laboratorium harus terbuat dari bahan yang kuat tidak menyerap air, 

tahan terhadap zat kimia dan tidak mudah terbakar. 

c) Fasilitas pengelolaan limbah. 

i. Wadah limbah infeksius 

ii. Wadah limbah non infeksius yang tidak dapat didaur ulang 

iii. Wadah limbah non infeksius yang dapat didaur ulang 

iv. Otoklaf yang mampu mencapai pemanasan sampai suhu 121 0 C 

v. Incenerator/ kerjasama dengan pihak lain untuk insenerasi. 

d) Harus tersedia bak cuci tangan dan bak cuci alat di ruang laboratorium dengan 

air mengalir langsung (tidak ditampung). 

Bak cuci tangan terletak di dekat pintu, kran sebaiknya dibuka dengan siku atau 

pijakan kaki, agar tidak terjadi kontaminasi pada bukaan kran. 


Sabun pencuci tangan harus dalam bentuk cair dan mengandung desinfektan. 

Petugas harus sesering mungkin mencuci tangan setiap kali setelah kontak dengan 

bahan infeksius, tindakan ini jauh lebih bermanfaat daripada menggunakan sarung 

tangan yang dipakai berulang kali karena ketersediaan yang terbatas. 

Bak cuci alat harus berukuran panjang 50-60 cm, lebar 40-50 cm, tinggi minimal 60 

cm untuk menghindari percikan keluar. 

2. Peralatan dan Fasilitas PPI di Laboratorium Mikroskopik TB 

a. Baju laboratorium. 

Terbuat dari bahan yang mudah dicuci dan kuat, tertutup di bagian depan 

dengan panjang melewati lutut, lengan sepanjang pergelangan tangan 

dengan ujung berkaret. Baju ini wajib dipakai pada saat bekerja dan 

ditanggalkan apabila petugas meninggalkan ruang kerja laboratorium. 

Pencucian baju laboratorium dilakukan di tempat kerja dengan terlebih dahulu 

didekontaminasi. Baju kerja yang kotor tidak boleh dibawa pulang. 

b. Wadah penampung alat bekas pakai ( lidi, pot dahak dan alat tercemar lain) 

harus cukup kuat, tidak mudah bocor dan tertutup. Sebaiknya wadah diberi 

alas plastik sehingga mudah dipindahkan. Larutan desinfektan dalam wadah 

harus cukup untuk merendam limbah. 

c. Otoklaf (kalau tersedia) harus diletakkan di dalam ruang kerja laboratorium 

sehingga memastikan seluruh bahan yang terkontaminasi tidak lagi infeksius 

ketika keluar dari ruang kerja laboratoium. 

d. Bahan habis pakai 

1) Sabun cair yang mengandung desinfektan untuk cuci tangan 

2) Towell Tissue/ Lap untuk mengeringkan tangan setelah cuci tangan. 

3) Larutan desinfektan : Lysol, larutan hypoclorite 1-5 %, 

3. Pengelolaan Limbah 

Pada prinsipnya semua peralatan dan limbah laboratorium harus sudah “aman”, 

tidak lagi infeksius, saat keluar dari ruang laboratorium atau saat pekerjaan 

pemeriksaan selesai. 


MATERI INTI 2 

PENGUMPULAN CONTOH UJI (SPESIMEN) DAHAK 


Diagnosis TB melalui pemeriksaan biakan dahak merupakan metode baku emas 

(gold standar). Namun, pemeriksaan biakan memerlukan waktu lebih lama (paling 

cepat sekitar 6 minggu). 

Harus dikerjakan di laboratorium dengan peralatan khusus. Pemeriksaan 3 spesimen 

(SPS) dahak secara mikroskopis nilainya identik dengan pemeriksaan dahak secara 

biakan. Pemeriksaan dahak mikroskopis efi sen, mudah, murah, bersifat spesifi k, 

sensitif dan dapat dilaksanakan di semua unit laboratorium fasilitas pelayanan 

kesehatan (fasyankes) yang memiliki mikroskop dan tenaga mikroskopis TB terlatih. 

Pengumpulan contoh uji lain seperti : cairan serebrospinal, cairan asites, bilasan 

lambung, aspirasi jarum halus, cairan pleura dilakukan dengan teknis khusus oleh 

tenaga medis. 



Setelah menyelesaikan sesi ini peserta latih mampu melaksanakan pengumpulan 

dahak yang berkualitas 


Setelah mempelajari materi ini, peserta diharapkan mampu: 

1. Melaksanakan persiapan pengumpulan dahak 

2. Menjelaskan cara mengeluarkan dahak 

3. Mengajarkan cara berdahak kepada pasien 

4. Melaksanakan pengumpulan dahak yang berkualitas 

5. Menilai kualitas dahak 

6. Menulis kode spesimen dan sediaan dahak mikroskopis sesuai pedoman. 

7. Melengkapi form permohonan pemeriksaan lab TB (Form TB 05) 


1. Persiapan Pengumpulan contoh uji dahak. 

2. Cara pengeluaran dahak yang baik 

28 


Direbus sampai mendidih 10 menit 

Limbah non infeksius yang dapat didaur ulang dan 

yang tidak dapat didaur ulang dikumpulkan untuk 

selanjutnya secara berkala dikelola oleh pihak ketiga 

untuk diproses. 

Dibakar sampai hangus 

Kedalam wadah yang dialasi kantong plastik 

dituangkan larutan desinfektan dengan jumlah yang 

cukup untuk merendam wadah/ alat bekas pakai. 

Tutup wadah/ pot dahak dilonggarkan ketika akan 

dimasukkan ke dalam wadah penampung limbah. 

Membuka tutup wadah/ pot dahak berbahaya karena 

dapat menimbulkan aerosol. 

Biarkan limbah direndam dalam wadah yang tertutup 

selama 12 jam sebagai tindakan pra sterilisasi ; untuk 

membebaskan kuman dari perlekatan dengan zat-zat 

organik di sekitarnya ( sputum mukopurulen, pus dan 

lain-lain). 

Direndam dalam desinfektan selama 12 jam 

Setelah direndam dalam larutan desinfektan selama 

12 jam limbah dapat dimusnahkan dengan cara 

pemanasan : direbus atau dibakar 


26 

4. Perilaku Petugas/ Praktek PPI Laboratorium 

a. Harus dilakukan : 

1) Memakai jas laboratorium pada saat bekerja di ruang kerja laboratorium. 

2) Melakukan dekontaminasi meja kerja setiap selesai bekerja. 

3) Melakukan pembersihan lantai ruangan dengan larutan desinfektan setiap 

selesai bekerja. 

4) Memilah dan mengumpulkan limbah infeksius dan non infeksius 

5) Cuci tangan setiap selesai bekerja dengan sabun cair mengandung 

desinfektan. 

6) Bekerja di tentangan aliran udara. 

b. Jangan dilakukan 

1) Makan, minum dan merokok di dalam ruang kerja laboratorium 

2) Membuka pot sputum atau memanaskan sengkelit sebelum merendamnya 

dalam larutan pasir alkohol karena akan menimbulkan aerosol. 

3) Memasukkan benda-benda ke dalam mulut : pensil, pena, memasang 

lipstick. 

4) Membiarkan pintu ruang kerja terbuka. 

5) Memipet dengan cara menghisap pipet dengan mulut. 

6) Menggunakan pot dahak secara berulang 

7) Bekerja dengan memakai sarung tangan yang dipakai berulang kali. 

8) Berdiri di depan pasien yang sedang berdahak. 

5. Kesiapan Kedaruratan 

1) Obat P3K 

2) Alat pemadam kebakaran 

6. Prosedur Tetap 

1) Mencuci tangan secara higienis 

2) Pengelolaan limbah infeksius 

3) Pengelolaan limbah non infeksius 

4) Dekontaminasi meja kerja dan ruang kerja 


F. REFERENSI 

1. Pedoman Manajerial Pencegahan dan Pengendalian Infeksi di RS dan Fasyankes 

lainnya, Yanmed tahun 2006, Depkes RI & Perdalin 

2. Pedoman Pencegahan dan Pengendalian Infeksi Tuberculosis di Puskesmas 

tahun 2010, Dit. Bina Upaya Kesehatan Dasar 

G. LATIHAN 

1. Apa yang dimaksud dengan bahan-bahan infeksius 

2. Apa prinsip penataan ruangan lab 

3. Apa Prinsip Penggunaan APD 


32 

c. Waktu pengambilan dahak : 

1. A,B,C : SPS dahak pasien pada pertama kali datang 

2. D,E: SP dahak pasien pada akhir fase intensif pengobatan 

3. J,K : SP dahak pasien pada akhir pemberian obat sisipan 

4. F,G: SP dahak pasien pada akhir bulan ke lima masa pengobatan 

5. H,I : SP dahak pasien pada akhir masa pengobatan 


3. Penilaian Kualitas spesimen dahak. 

4. Pemberian identitas contoh uji dan sediaan dahak 

5. Pengisian formulir permohonan pemeriksaan lab TB 


1. Buku Pedoman Laboratorium Pemeriksaan mikroskopis TB tahun 2007 

2. Buku Pedoman Nasional Penanggulangn TB Edisi ke 3 tahun 2010 


1. Persiapan Pengumpulan Contoh Uji Dahak 

a. Persiapan pasien 

Pasien diberitahu bahwa contoh uji dahak sangat bernilai untuk menentukan 

status penyakitnya, karena itu anjuran pemeriksaan SPS untuk pasien baru 

dan SP untuk pasien dalam pemantauan pengobatan harus dipenuhi. Dahak 

yang baik adalah yang berasal dari saluran nafas bagian bawah, berupa lendir 

yang berwarna kuning kehijauan (mukopurulen). Pasien berdahak dalam 

keadaan perut kosong, sebelum makan/minum dan membersihkan rongga 

mulut terlebih dahulu dengan berkumur air bersih. 

Bila ada kesulitan berdahak pasien harus diberi obat ekspektoran yang 

dapat merangsang pengeluaran dahak dan diminum pada malam sebelum 

mengeluarkan dahak. Olahraga ringan sebelum berdahak juga dapat 

merangsang dahak keluar. Dahak adalah bahan infeksius sehingga pasien 

harus berhati-hati saat berdahak dan mencuci tangan. Pasien dianjurkan 

membaca prosedur tetap pengumpulan dahak yang tersedia di tempat/ lokasi 

berdahak. 

b. Persiapan Alat 

1) Pot dahak bersih dan kering, diameter mulut pot ≥ 3,5 cm, transparan, 

berwarna bening, dapat menutup dengan erat, bertutup ulir minimal 3 

ulir, pot kuat, tidak mudah bocor. Sebelum diserahkan kepada pasien, pot 

dahak harus sudah diberi identitas sesuai identitas/ nomor register pada 

form TB 05. 

2) Formulir Permohonan Pemeriksaan Laboratorium (TB 05) 

3) Label, pensil, spidol 


30 

2. Cara Pengeluaran Dahak yang Baik 

a. Waktu Pengambilan Dahak 

1) S (Sewaktu, pertama): Dahak dikumpulkan saat datang pada kunjungan 

pertama ke laboratorium fasyankes 

2) P (Pagi): Dahak dikumpulkan pagi segera setelah bangun tidur pada hari 

ke-2, dibawa langsung oleh pasien ke laboratorium fasyankes 

3) S (Sewaktu, kedua): Dahak dikumpulkan di laboratorium fasyankes pada 

hari ke-2 saat menyerahkan dahak pagi 

b. Tempat Pengumpulan Dahak 

1) Ruang terbuka; dengan sinar matahari langsung 

2) Ruang tertutup; dengan ventilasi yang baik 

Dahak adalah bahan yang infeksius, pada saat berdahak aerosol/percikan 

dapat menulari orang yang ada di sekitarnya, karena itu tempat berdahak 

harus berada di tempat yang jauh dari kerumunan orang, misalnya di 

depan ruang pendaftaran, ruang pemeriksaan, ruang obat dll. 

Harus diperhatikan pula arah angin pada saat berdahak, 

c. Cara Berdahak 

1) Kumur-kumur dengan air bersih sebelum mengeluarkan dahak 

2) Bila memakai gigi palsu, lepaskan sebelum berkumur 

3) Tarik nafas dalam (2-3 kali) 

4) Buka tutup pot, dekatkan ke mulut, berdahak dengan kuat dan ludahkan 

ke dalam pot dahak 

5) Tutup pot yang berisi dahak dengan rapat 

6) Pasien harus mencuci tangan dengan air dan sabun antiseptik 

d. Pengumpulan Dahak 

Pot berisi dahak diserahkan kepada petugas laboratorium, dengan 

menempatkan pot dahak di tempat yang telah disediakan 

3. Penilaian Kualitas Contoh Uji Dahak Secara Makroskopis 

Petugas laboratorium harus melakukan penilaian terhadap dahak pasien. Tanpa 


membuka tutup pot, petugas laboratorium melihat dahak melalui dinding pot yang 

transparan 

Hal-hal yang perlu diamati adalah : 

- Vol 3,5 - 5 ml 

- Kekentalan : mukoid 

- Warna : Hijau kekuningan (purulen) 

Bila ternyata air liur, petugas harus meminta pasien berdahak kembali, sebaiknya 

dengan pendampingan. 

Perhatian : pada saat mendampingi pasien berdahak, petugas harus berada di 

belakang pasien dan hindari arah angin menuju petugas. 

4. Pemberian Identitas Contoh Uji dan Sediaan Dahak 

Aturan pemberian identitas contoh uji dan sediaan dahak: 

• Nomor sesuai dengan nomor pada form TB 05, dituliskan pada badan 

tabung, bukan pada tutup pot. 

• Nomor identitas sediaan dahak sama dengan nomor identitas pada Form TB 

05 dan pot dahak 

5. Pengisian Formulir Permohonan Pemeriksaan Lab TB (Form TB 05) 

Formulir TB 05 adalah formulir yang diberikan oleh petugas di bagian pemeriksaan 

sebagai pengantar pasien ke laboratorium untuk pemeriksaan dahak. 

a. Formulir harus diisi lengkap . 

Bagian bawah dari lembar Form TB 05 tentang hasil pemeriksaan laboratorium 

diisi oleh petugas laboratorium dan diserahkan ke bagian pemeriksaan setelah 

hasil dari semua sediaan selesai (SPS atau SP). 

Hasil harus diserahkan selama-lamanya 7 hari setelah penyerahan dahak 

pertama. 

b. Nomor identitas terdiri dari : 

Nomor kode Kabupaten, 2 digit 

Nomor kode Fasyankes, 2 digit 

Nomor urut pasien, sesuai urutan pada Form TB 06 


36 

Keterangan 

a) Lensa okuler 

Sepasang lensa okuler yang berhadapan dengan mata, terletak di ujung 

tabung mikroskop . Lensa ini dapat diangkat dengan menariknya ke atas. 

Lensa okuler dapat mempunyai kekuatan pembesaran 5 x dan 10x. 

Untuk pemeriksaan mikroskopis BTA digunakan lensa okuler 10x. 

Fungsi lensa okuler adalah memperbesar objek setelah sebelumnya 

diperbesar oleh lensa objektif. 

Di bagian pangkal kedua lensa okuler terdapat cincin diopter yang dapat 

mengatur jarak kedua lensa okuler sesuai jarak kedua pupil mata. 

b) Tabung mikroskop 

Tabung penghubung lensa okuler dan lensa objektif yang merupakan jalan 

cahaya. Pada mikroskop berprisma terdapat lensa prisma di antara tabung 

mikroskop dan lempeng objektif. 

c) Lensa objektif 

Tepat berada di bawah tabung mikroskop, melekat pada lempeng objektif. 

Terdapat lensa objektif dengan kekuatan pembesaran 10x (pembesaran 

kecil), 40x/45x (pembesaran sedang) dan 100x (pembesaran besar). 

Fungsinya untuk memberi pembesaran pertama pada benda. 

Kita dapat memilih ukuran lensa dengan memutar lempeng objektif, bila 

kedudukan sudah tepat akan terdengar bunyi “klik” 

Bila memakai lensa objektif 100x, sediaan harus ditetesi minyak emersi 

sebagai media cahaya. 

d) Meja sediaan 

Meja ini dapat digerakan untuk mengatur lapang pandang sediaan yang 

diletakkan di atasnya. 

Fungsinya untuk meletakkan kaca sediaan 

e) Kondensor 

Bagian ini dapat digerakkan naik dan turun dengan memutar tangkainya, 


d. Cara Penulisan identitas pada Pot Dahak 

F. REFERENSI 

Buku Pedoman Laboratorium Mikroskopis TB 

G. LATIHAN 

1. Dimana tempat yang terbaik untuk pengumpulan dahak 

2. Bagaimana cara menilai kualitas dahak dan tampilan makroskopis dahak 

yang baik ? 

3. Kapan sebaiknya laporan hasil pemeriksaan dikirimkan ? 


MATERI INTI 3 

PENGGUNAAN DAN PERAWATAN MIKROSKOP 


Pemeriksaan mikroskopis dahak merupakan pemeriksaan yang penting untuk 

diagnosis tuberkulosis dan memantau hasil pengobatan. Pemeriksaan ini dapat 

secara luas dilakukan di laboratorium yang sederhana dengan cara yang mudah 

dan hasilnya dapat dipercaya. 

Pemeriksaan mikroskopis harus dilaksanakan menggunakan mikroskop 

binokuler yang sesuai standar. Agar hasil pemeriksaan mikrosopis bermutu harus 

menggunakan mikroskop dengan kondisi dan fungsi yang baik. 

Petugas mikroskopis harus melakukan perawatan mikroskop secara teratur dan 

dengan cara yang benar, karena itu petugas harus mengenal bagian-bagian 

mikroskopis dan fungsinya, serta cara perawatannya. 



Setelah mempelajari materi ini peserta latih mengenal bagian – bagian mikroskop, 

memahami fungsinya dan mampu melaksanakan perawatan. 

34 


Setelah mempelajari materi ini peserta latih mampu : 

1. Menjelaskan bagian-bagian mikroskop 

2. Menjelaskan fungsi masing-masing bagian mikroskop 

3. Menggunakan mikroskop dengan benar 

4. Menjelaskan dan mempraktekan perawatan mikroskop 


1. Prinsip kerja mikroskop 

2. Bagian-bagian mikroskop dan fungsinya 

3. Penggunaan mikroskop 

4. Perawatan mikroskop. 





1. Prinsip Kerja Mikroskop 

Cahaya yang berasal dari sumber cahaya diteruskan ke diafragma, kondensor 

dan kaca sediaan. Bayangan benda diperbesar oleh lensa objektif, diteruskan 

melalui tabung mikroskop ke lensa okuler yang memperbesar bayangan benda 

untuk kedua kalinya selanjutnya diterima oleh mata sehingga objek dapat dilihat. 

2. Bagian-Bagian Mikroskop dan Fungsinya 


MATERI INTI 4 

PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS TB 


Pemeriksaan dahak secara mikroskopis langsung yang bermutu merupakan 

komponen penting dalam penerapan strategi DOTS, baik untuk penegakan 

diagnosis maupun follow up. Hasil pemeriksaan dahak yang bermutu merupakan 

hal yang penting untuk menetapkan klasifi kasi penderita, keputusan untuk memulai 

pengobatan dan menyatakan kesembuhan penderita. Mutu hasil pemeriksaan 

laboratorium merupakan inti keberhasilan penanggulangan tuberkulosis. Setiap 

laboratorium yang melakukan pemeriksaan TB harus melakukan kegiatan 

pemantapan mutu, termasuk pemeriksaan BTA secara mikroskopis 



Setelah menyelesaikan materi ini peserta mampu melaksanakan pemeriksaan 

mikroskopis TB. 

40 


Setelah mempelajari materi ini, peserta mampu: 

1. Menyiapkan peralatan pembuatan sediaan dahak 

2. Memilih spesimen dahak yang berkualitas 

3. Membuat sediaan dahak sesuai standar 

4. Melaksanakan pewarnaan dengan metode Ziehl Neelsen 

5. Membaca sediaan dahak 

6. Melaporkan hasil pembacaan BTA dengan skala IUATLD 


1. Pembuatan Sediaan Dahak 

a. Peralatan pemeriksaan sediaan dahak 

b. Pemberian identitas sediaan 

c. Pemilihan bagian contoh uji yang purulen/ kental 


pada kondensor terdapat fi lter yang menyaring cahaya. Bila tidak memerlukan 

cahaya yang terlalu kuat,maka kondensor diturunkan. Pada pemeriksaan 

dahak, kondensor dinaikkan maksimal dan tanpa menggunakan fi lter. 

Fungsinya untuk memfokuskan cahaya agar jatuh sebagai titik cahaya diatas 

sediaan. 

f) Iris/ diafragma 

Letak iris/diafragma pada kondensor, dapat diatur sesuai jumlah cahaya yang 

dibutuhkan. Pada pemeriksaan BTA iris/ diafragma harus dibuka maksimal. 

Fungsi untuk mengatur jumlah cahaya yang masuk kedalam tabung 

mikroskop. 

g) Sumber cahaya 

Terletak di bawah kondensor, sumber cahaya dapat berupa cermin atau 

lampu. 

Untuk cahaya jauh (sinar matahari) digunakan cermin datar, sedangkan 

untuk cahaya dekat (lampu meja) digunakan cermin cekung. 

h) Makrometer 

Dapat mengatur fokus untuk mendapatkan lapang pandang. 

i) Mikrometer 

Dapat mengatur fokus secara halus untuk memperjelas pandangan yang 

sudah dapat terlihat setelah makrometer diatur. 

3. Penggunaan Mikroskop 

Gunakan mikroskop sesuai prosedur tetap : 

a) Hubungkan mikroskop dengan sumber listrik, hidupkan dengan menekan 

tombol ON 

b) Atur kekuatan cahaya berangsur sampai dirasakan nyaman 

c) Naikkan kondensor maksimal dan buka diafragma sampai dirasakan cahaya 

cukup. 

d) Letakkan sediaan diatas meja mikroskop tepat dibawah lensa objektif dengan 


38 

mengatur letak sediaan. 

e) Sediaan ditetesi minyak immersi lihat dengan lensa objektif 100x, perjelas 

dengan mengatur mikrometer. Pada saat meneteskan minyak immersi, 

jangan menyentuhkan ujung pipet ke kaca sediaan. 

f) Dengan mengatur makrometer dapatkan lapang pandang kemudian fokuskan 

dengan mengatur mikrometer (lensa okuler 10 x, lensa objektif 10 x). 

g) Setelah selesai pemeriksaan redupkan cahaya dengan memutar pengatur 

cahaya ke angka 0, matikan dengan menekan tombol OFF. Turunkan meja 

mikroskop dan kondensor sampai ke bawah. Atur lensa objektif sedemikian 

rupa sampai lensa yang terpendek berada di atas meja. 

4. Perawatan Mikroskop 

Mikroskop harus berfungsi baik untuk melakukan pemeriksaan, karena itu harus 

dilakukan perawatan dengan teratur dan benar oleh petugas laboratorium atau 

teknisi khusus. 

Jangan membongkar sendiri 

bagian-bagian dalam mikroskop 


a) Pembersihan lensa 

Lensa dibersihkan dengan pembersih yang sesuai dengan bahan lensa 

mikroskop, sesuai dengan ketentuan dari pabrik, menggunakan kertas lensa 

dan sikat halus atau peniup udara (blower) 

b) Penggantian bola lampu 

Ketahui batas waktu pemakaian bola lampu dan sediakan lampu cadangan 

dengan tegangan/ voltage yang sesuai. 

Cara penggantian dan pengaturan regulator harus dilakukan sesuai prosedur 

tetap. 

c) Penyimpanan 

Mikroskop harus disimpan dalam kotak/ lemari yang tidak lembab dengan 

cara pemasangan lampu 5 watt terus menerus, walaupun mikroskop sedang 

dipakai, atau dengan menempatkan silika gel dalam kantung kain. 

Kotak/ lemari mikroskop harus memiliki lubang untuk pertukaran udara dan 

harus tertutup sehingga mikroskop bebas dari debu. 

Debu dapat tertimbun pada bagian saluran dan roda gigi yang dapat 

menyebabkan bagian-bagian mekanik mikroskop akan susah digerakkan. 

F. REFERENSI 

Pedoman Pemeriksaan Mikroskopis TB 

G. LATIHAN: 

Praktikum 


44 

Untuk fasyankes yang tidak melakukan pewarnaan dan pembacaan mikroskopis 

kirimkan sediaan yang telah difi ksasi ke PRM dengan cara : 

Bungkus sediaan dengan kertas tissue kemudian digulung beberapa kali agar 

tidak pecah atau kirimkan dalam kotak sediaan bersama Form TB 05. 

e. Perwarnaan Metode Ziehl Neelsen 

Sebelum memulai melakukan pewarnaan sediaan, siapkan peralatan dan reagen 

yang dibutuhkan agar proses perwarnaan tidak terhambat. Peralatan, reagen yang 

bermutu dan proses pengadaan yang efi sien harus dilaksanakan untuk menjamin 

ketersediaannya 

Prinsip pewarnaan ZN 

a) M. tuberculosis mempunyai lapisan dinding lipid (Mycolic acid) yang tahan 

terhadap asam. 

b) Proses pemanasan mempermudah masuknya Carbol Fuchsin ke dalam dinding 

sel. 

c) Dinding sel tetap mengikat zat warna Carbol Fuchsin walaupun didekolorisasi 

dengan asam alkohol. 

Reagensia yang diperlukan untuk pewarnaan metode ZN 

a) Karbol fuchsin 0,3 % 

b) Asam Alkohol 3 % 

c) Metilen biru 0,3 % 

Peralatan yang diperlukan untuk pewarnaan Ziehl Neelsen 

a) Rak pewarnaan 

b) Pinset/ Penjepit kayu 

c) Air mengalir/ botol semprot air 

d) Lampu spritus/ sulut api 

e) Rak pengering 

f) Pengatur waktu/ timer 

g) Pipet tetes 


d. Pembuatan sediaan dahak sesuai standar 

e. Prinsip pewarnaan Ziehl Neelsen 

2. Pembacaan Mikroskopis Sediaan Dahak 

3. Kualitas Sediaan Dahak 




1. Pembuatan Sediaan Dahak 

a. Peralatan Pemeriksaan Sediaan Dahak 

Untuk pembuatan sediaan apus dibutuhkan peralatan sebagai berikut : 

1) Kaca sediaan yang baru dan bersih, sebaiknya frosted end slide. 

2) Bambu/lidi 

3) Lampu spritus/ bunsen 

4) Wadah pembuangan lidi bekas 

5) Desinfektan (lisol 5%, Alkohol 70%, Hipoklorit 0,5%) 

b. Pemberian identitas sediaan 

Sebelum melaksanakan pembuatan sediaan dahak, terlebih dulu kaca sediaan 

yang diberi identitas dengan menuliskan pada bagian frosted atau diberi 

label dengan nomor identitas sesuai dengan Form TB 05 . 

c. Pemilihan contoh uji dahak yang berkualitas 

Pilih dahak yang kental berwarna kuning kehijauan, ambil dengan lidi yang 

ujungnya berserabut (rough end) kira-kira sebesar biji kacang hijau. Kemudian 

letakkan pada kaca objek yang sudah disiapkan. 

Untuk mendapatkan ujung yang beserabut lidi dipipihkan 

d. Pembuatan sediaan dahak sesuai standar 


42 

1. Cara Pembuatan Sediaan Dahak 

a) Ambil contoh uji dahak pada 

bagian yang purulen dengan lidi 

b) Sebarkan diatas kaca sediaan 

dengan bentuk oval ukuran 

2x3 kemudian ratakan dengan 

gerakan spiral kecil-kecil. Jangan 

membuat gerakan spiral bila 

sediaan dahak sudah kering 

karena 

aerosol. 

akan menyebabkan 

2. Pengeringan 

a. Keringkan pada suhu kamar 

b. Masukkan lidi bekas ke dalam 

wadah berisi desinfektan 


3. Fiksasi 

Fiksasi dilakukan dengan memegang 

kaca sediaan dengan pinset, pastikan 

kaca sediaan menghadap ke atas. 

Lewatkan sediaan di atas api bunsen 

yang berwarna biru 2- 3 kali selama 

1-2 detik 

Penilaian Ketebalan Sediaan Apus 

Untuk menilai ketebalan sediaan sebelum dilakukan pewarnaan dapat dilakukan 

dengan meletakkan sediaan yg kering 4-5 cm di atas kertas koran. Sediaan 

yang baik apabila kita masih dapat melihat tulisan secara samar. 

Contoh sediaan yang benar, tulisan di 

koran masih terbaca secara samar 

Contoh sediaan yang terlalu tebal, 

tulisan di koran tidak terbaca 

Contoh sediaan yang terlalu tipis, 

tulisan di koran terbaca dengan 

mudah 

Catatan : 


Kualitas pewarnaan Ziehl Neelsen 

Pada pewarnaan yang baik, apabila diperiksa di bawah mikroskopis akan tampak 

kuman M.Tb berwarna merah baik sendiri atau bergerombol dengan warna latar biru 

dan terlihat jelas gambaran leukosit 

Pada pewarnaan yang jelek, apabila diperiksa di bawah mikroskop masih tampak 

adanya sisa zat warna, endapan kristal sehingga kuman M.Tb tidak tampak dengan jelas 

2. Pembacaan Mikroskopis Sediaan Dahak 

a. Pemindaian 100 lapangan pandang 

48 

Pembacaan sediaan dahak menggunakan mikroskop dengan lensa objektif 10x 

untuk menentukan fokus kemudian pada lensa objektif 100x dilakukan pembacaan di 

sepanjang garis horisontal terpanjang dari ujung kiri ke ujung kanan atau sebaliknya. 

Dengan demikian akan dibaca minimal 100 lapang pandang. 


Cara melakukan pewarnaan metode ZN 

Pewarnaan 

Letakkan sediaan diatas rak dengan 

jarak minimal 1 jari telunjuk 

Tuangkan Carbol Fuchsin 0,3% menutupi 

seluruh permukaan sediaan 

Pemanasan 

Panaskan sediaan dengan sulut api sampai 

keluar uap (jangan sampai mendidih), 

kemudian dinginkan selama lima 

menit. Sulut api dibuat dari kawat baja 

yang ujungnya dililit kain kasa yang diikat 

kawat halus celupkan kedalam spiritus 

sebelum dinyalakan. 


Pencucian 

Buang CF perlahan-lahan satu per 

satu 

Bilas dengan air mengalir mulai dari 

frosted 

Dekolorisasi 

Tuangkan asam alcohol 3% pada 

sediaan biarkan beberapa saat lalu 

bilas dengan air sampai bersih, tidak 

tampak sisa zat warna merah. Bila 

masih tampak warna merah lakukan 

decolorisasi beberapa kali. 

Bilas dengan air mengalir 

46 


Pewarnaan Latar ( counter staining) 

Tuangkan 0.3% methylene blue 

hingga menutupi seluruh sediaan dan 

biarkan 10-20 detik 

Buang Metilen Blue satu per satu 

sediaan 

Bilas dengan air mengalir 

Keringkan sediaan pada rak pengering 


52 

e. Pewarnaan 

Pada sediaan yang baik tampak jelas kontras antara BTA dan warna latar, bersih 

dan tidak tampak sisa zat warna. Pada waktu dilihat di bawah mikroskop 

akan terlihat seperti di bawah ini: 

Sediaan yang baik Dekolorisasi kurang Latar belakang gelap, terlalu 

lama pemberian Metilen Blue 

f. Kebersihan 

Penilaian kebersihan dilakukan secara makroskopis dan mikroskopis. Sediaan 

yang baik terlihat bersih, tidak tampak sisa zat warna, endapan kristal . sediaan 

yang kurang bersih akan mengganggu pembacaan secara mikroskopis 

Sediaan yang baik, tampak bersih 

Sediaan tampak kurang bersih, terlihat 

endapan kristal atau sisa zat warna 


BTA akan tampak sebagai kuman berwarna merah baik sendiri maupun bergerombol. 

BTA harus dibedakan dengan artefak yang mirip dengan BTA dan BTA lingkungan 

yang sering mencemari air keran. 

b. Pelaporan hasil pemeriksaan mikroskopis dengan mengacu kepada skala International 

Union Against To Lung Disease (IUATLD) 

Negatif : tidak ditemukan BTA dalam 100 lapang pandang 

Scanty : ditemukan 1-9 BTA dalam 100 lapang pandang 

(tuliskan jml BTA yang ditemukan) 

1+ : ditemukan 10 – 99 BTA dlm 100 lapang pandang 

2+ : ditemukan 1 – 10 BTA setiap 1 lapang pandang 

(periksa minimal 50 lapang pandang) 

3+ : ditemukan ≥ 10 BTA dalam 1 lapang pandang 

(periksa minimal 20 lapang pandang) 

c. Catat hasil pemeriksaan pada Register Lab (TB 04) dan bagian bawah Form TB 05 

Berikan tanggal dan tanda tangan pada form TB 05 


3. Penilaian kualitas sediaan dahak 

Sediaan dahak yang baik adalah sediaan yang memenuhi 6 syarat kualitas sediaan 

yang baik yaitu kualitas contoh uji, ukuran, ketebalan, kerataan, pewarnaan dan kebersihan. 

50 

a. Kualitas contoh uji ( spesimen) 

Spesimen dahak berkualitas baik apabila ditemukan: 

Lekosit PMN ≥ 25 per LP pada perbesaran 

10 x 10 

Makrofag pada perbesaran 10 x 100 

b. Ukuran sediaan dahak 

Sediaan dahak yang baik berbentuk oval berukuran panjang 3 cm dan lebar 2 cm 

Contoh sediaan dahak yang baik 

Contoh sediaan yang terlalu kecil, 

tidak rata 


Contoh sediaan yang terlalu besar, tidak 

rata 

c. Ketebalan 

Penilaian ketebalan dapat dilakukan sebelum pewarnaan dan pada saat 

pemeriksaan mikroskopis. 

Penilaian ketebalan sebelum pewarnaan dilakukan dengan meletakkan sediaan 

sekitar 4cm di atas kertas bertulis. 

Penilaian ketebalan dapat juga dilakukan setelah sediaan dahak diwarnai. Pada 

sediaan yang baik sel leukosit tidak tampak bertumpuk (one layer cells) 

d. Kerataan 

Penilaian kerataan dilakukan secara makroskopis dan mikroskopis dengan tidak 

tampak adanya daerah yang kosong. Sediaan yang baik pada setiap lapang 

pandang akan terlihat apusan dahak yang tersebar rata secara mikroskopis. 

Sediaan yang baik adalah sediaan 

yang rata dan tidak terlihat daerah 

kosong. 

Sediaan terlalu tebal, dan ada bagian 

yang terkelupas kemungkinan 

karena difi ksasi sebelum kering 

atau pencucian dilakukan langsung 

di atas apusan 

Sediaan tidak rata. Tidak dilakukan 

perataan dengan membuat spiralspiral 

kecil 


56 

5) Uji fungsi reagen Ziehl Neelsen 

Uji ini diperlukan untuk memastikan reagen Ziehl Neelsen yang tersedia 

dapat mewarnai M.tb dengan baik. 

Petugas harus membuat sediaan dahak kontrol yaitu beberapa 

sediaan dahak dari dahak BTA negatif dan dahak BTA 1 + yang telah di 

fi ksasi. Ketika akan mempergunakan reagen Ziehl Neelsen kemasan 

baru yang tidak diketahui masa kadaluarsanya maka dilakuakan 

pewarnaan terhadap satu sediaan dahak BTA negatif dan satu sediaan 

dahak BTA 1+. Petugas harus melihat hasil pewarnaan sediaan yang 

baik yaitu yang memberikan kontras warna yang jelas dan khas pada 

warna latar, inti leukosit dan BTA. Hasil uji fungsi harus dicatat dalam 

buku khusus yang menuliskan tanggal pelaksanaan uji fungsi, nomor 

batch botol reagen dan hasil pewarnaan. Bila hasil pewarnaan dinilai 

baik maka reagen dapat dipakai sebaliknya bila memberikan hasil 

pewarnaan yang tidak baik : 

a) Endapan/ kristal metilen biru : reagen harus disaring langsung 

pada saat melakukan pewarnaan. 

b) Decolorisasi yang tidak sempurna : mengganti larutan asam 

alkohol dengan larutan yang baik 

Kumpulan sediaan dahak kontrol yang belum diwarnai harus disimpan 

dalam kotak khusus. 

b. Tahap analisis 

1) Memastikan prosedur tetap dilaksanakan dengan baik pada setiap 

pemeriksaan. Prosedur tetap yang harus tersedia adalah : 

a. Prosedur tetap pengumpulan dahak 

b. Prosedur tetap pembuatan sediaan 

c. Prosedur tetap fi ksasi 

d. Prosedur tetap pewarnaan. 

e. Prosedur tetap pembacaan mikroskopik 

f. Prosedur tetap pencatatan & pelaporan 

g. Prosedur tetap pengolahan limbah 


Penilaian kualitas sediaan dahak yang baik dilakukan dengan menggunakan diagram 

sarang laba-laba. 

4. Penyimpanan Sediaan Dahak 

Setelah dibaca bersihkan minyak immersi pada sediaan dengan xylol atau letakkan 

tissue di atas permukaan sediaan agar minyak immersi terserap. 

Simpan sediaan dalam kotak sediaan secara berurutan sesuai dengan nomor 

register lab TB 04 

F. REFERENSI 


G. LATIHAN 

1. Pembuatan, pewarnaan dan pembacaan sediaan dahak 

2. Penyimpanan sediaan dalam kotak sediaan. 


MATERI INTI 5 

PEMANTAPAN MUTU LABORATORIUM MIKROSKOPIS TB 


Hasil pemeriksaan laboratorium yang menentukan diagnosis dan pengelolaan 

klinis harus bermutu, artinya dapat dipercaya. Untuk dapat memberikan hasil yang 

demikian petugas laboratorium harus melakukan praktek laboratorium yang sesuai 

dengan standar dengan pengendalian mutu yang dilakukan secara sistematis dan 

terus menerus. 

54 

International Standard for TB Care (ISTC ) 2009 menyatakan bahwa diagnosis 

Tuberculosis ditegakkan melalui pemeriksaan laboratorium yang dilakukan di 

laboratorium yang menjalankan pemantapan mutu. 

Pemantapan mutu di laboratorium mikroskopis TB terdiri dari : 

1. Pemantapan mutu internal yaitu upaya pengendalian mutu yang dilakukan oleh 

internal laboratorium secara terus menerus pada setiap tahap pemeriksaan (pra 

analisis, analisis dan pasca analisis). 

2. Pemantapan mutu eksternal yaitu upaya pengendalian mutu yang dilakukan 

dengan membandingkan kinerja laboratorium melalui uji profi siensi atau uji 

banding hasil pemeriksaan dengan laboratorium rujukan. 

3. Peningkatan mutu adalah upaya yang dilakukan secara terus menerus sebagai 

tindak lanjut dari hasil pemantapan mutu internal dan eksternal. 


Tujuan Pembelajaran Umum (TPU) : 

Setelah mempelajari modul ini, peserta latih mampu memahami dan terampil 

melakukan pemantapan mutu laboratorium mikroskopis TB 

Tujuan Pembelajaran Khusus (TPK) : 

1. Melakukan pemantapan mutu internal lab mikroskopis TB 

2. Mengikuti dan berperan aktif dalam pemantapan mutu eksternal 

3. Melakukan peningkatan mutu 



1. PMI Lab Mikroskopis TB 

2. PME Lab Mikroskopis TB 

3. Peningkatan Mutu 




1. Pemantapan Mutu Internal Laboratorium Mikroskopis TB 

a. Tahap Pra analisis 

1) Prosedur tetap cara pengumpulan dahak. 

2) Persiapan pasien 

Memberikan bimbingan kepada pasien tentang cara pengumpulan 

dahak, waktu pengumpulan dahak dan lokasi pengumpulan dahak. 

3) Persiapan alat dan bahan. 

a) Pot dahak sesuai standar : bermulut lebar (diameter minimal 3,5 

cm, transparan, bening, kuat tidak mudah pecah, tidak bocor, 

bertutup ulir minimal 5 ulir) 

b) Spidol dan label untuk pemberian identitas sesuai dengan nomor 

identitas yang tertera pada form TB 04, TB 05 , TB 06 dan kaca 

sediaan. 

4) Uji kualitas contoh uji dahak 

Dahak harus mukopurulen yaitu dahak yang mukoid berwarna kuning 

kehijauan. Petugas harus menolak contoh uji yang berupa saliva dan 

harus dapat memotivasi pasien agar dapat mengeluarkan dahak yang 

baik. 

Uji kualitas dahak dilakukan dengan cara melihat warna dan kekentalan 

dahak tanpa membuka tutup pot dahak, karena itu pot dahak harus 

terbuat dari bahan yang transparan dan bening. 


2) Persiapan alat 

a) Kaca sediaan frosted-end baru 

b) Pinsil HB untuk menulis identitas sediaan 

c) Lidi atau batang bambu dengan ujung berserabut (rough-end) 

untuk mengambil dahak 

d) Lidi atau batang bambu dengan ujung runcing untuk membuat ulir 

(coiling) 

e) Lampu spiritus 

f) Pinset atau klem penjepit untuk memegang sediaan saat fi ksasi 

g) Bak pewarnaan 

h) Rak pengering 

i) Pipet tetes. 

j) Air mengalir dengan volume kecil yang lancar. 

k) Pencatat waktu sampai satuan detik untuk memastikan waktu 

saat pendinginan dan pewarnaan. 

l) Mikroskop binokuler yang berfungsi dengan baik 

m) Minyak immersi dengan kualitas baik : bening dengan kekentalan 

n) Xylol yang baik untuk membersihkan sediaan dari minyak immersi. 

3) Pemberian identitas 

Identitas sediaan dituliskan pada sisi sediaan yang buram memakai 

pinsil dengan kode yang sesuai from TB05, TB04 dan wadah dahak. 

Tidak diperkenankan menuliskan nama pasien di atas kaca sediaan 

4) Pembuatan sediaan harus sesuai prosedur tetap dan dievaluasi melalui 

uji kualitas sediaan dahak dilakukan dengan penilaian terhadap 6 

unsur dengan mempergunakan skala sarang laba-laba. 

Sediaan yang baik harus memperlihatkan sarang laba-laba yang 

penuh. 

5) Pembacaan mikroskopis 

Pembacaan dilakukan sesuai prosedur tetap yaitu melihat melalui 

mikroskop sepanjang garis horisontal terpanjang pada tengah sediaan 


Modul Pela han Pemeriksaan Dahak Mikroskopis TB 60 57

58 

dimulai dari bagian paling tepi ke bagian di seberangnya. Petugas 

harus dapat mengenali dengan baik Mtb yang berbentuk batang 

langsing berwarna merah mengacu kepada sediaan kontrol dahak 

BTA positif. 

6) Penyimpanan sediaan 

Sediaan yang telah diperiksa harus disimpan untuk kepentingan 

pemantapan mutu eksternal yaitu uji silang. Penyimpanan dilakukan 

sesuai dengan metode uji silang yang dilaksanakan di wilayah terkait. 

Penyimpanan sediaan untuk uji silang metode konvensional dilakukan 

dengan memisahkan sediaan positif dan negatif dengan urutan sesuai 

form TB 04. 

Penyimpanan sediaan untuk uji silang metode LQAS dilakukan dengan 

menyusun seluruh sediaan dengan urutan sesuai form TB 04 tanpa 

memisahkan sediaan positif dan negatif. 

c. Tahap Pasca Analis 

1) Prosedur tetap 

a) Prosedur dekontaminasi alat dan bahan infeksius 

b) Prosedur tetap pengelolaan limbah infeksius dan non infeksius 

c) Prosedur tetap pemeliharaan mikroskop. 

2) Pelaporan 

Hasil pembacaan mikroskopis dilaporkan pada formulir jawaban 

pemeriksaan laboratorium sesuai dengan skala IUATLD. 

Petugas tidak diperkenankan menuliskan laporan dengan tanda atau 

simbol yang tidak sesuai skala IUATLD. 

Tidak diperbolehkan menuliskan hasil pemeriksaan diatas kaca 

sediaan. 

3) Pencatatan 

Hasil pemeriksaan harus segera dituliskan pada Form TB 04, sesuai 

kode dan kolom peruntukannya. Hasil positif dituliskan dengan tinta 

merah. 


2. Pemantapan Mutu Eksternal (PME) Laboratorium Mikroskopis TB 

Kinerja laboratorium mikroskopis TB dinilai oleh laboratorium rujukan dalam 

jejaring laboratorium TB melalui : 

a. Uji silang mikroskopis 

Prinsip uji silang mikroskopis pembacaan ulang oleh laboratorium rujukan 

tanpa mengetahui hasil pembacaan laboratorium sebelumnya. Saat ini 

terdapat dua metode PME yaitu : 

1) Metode konvensional : memeriksa ulang seluruh sediaan positif dan 

10% sediaan negatif. Satu pasien diwakili oleh 1 sediaan. 

2) Metode LQAS : memeriksa sediaan yang diambil secara lot yaitu 

melalui penghitungan statistik yang spesifi k untuk setiap laboratorium 

atau wilayah kerja terkait. 


MATERI INTI 6 

PENCATATAN KEGIATAN PEMERIKSAAN LAB TB 


64 

Pencatatan kegiatan pemeriksaan laboratorium TB sangat penting karena dapat 

digunakan untuk pengelolaan pasien dan menilai kegiatan program pengendalian TB. 

Pencatatan mengacu kepada format yang baku untuk menjamin akuntabilitas dan 

evaluasi program pengendalian TB. 


Tujuan Pembelajaran Umum: 

Setelah menyelesaikan materi ini peserta latih mampu melaksanakan pencatatan 

kegiatan pemeriksaan lab TB. 

Tujuan Pembelajaran Khusus: 

Setelah menyelesaikan materi ini peserta latih mampu 

a. Melaksanakan pengisian formulir TB-04 

b. Melaksanakan pengisian TB-05 

C. POKOK-POKOK BAHASAN 

a. Alur pencatatan 

b. Pengisian formulir TB-04 

c. Pengisian TB-05 


Pedoman Nasional Pengendalian Tuberkulosis 


1. Alur Pencatatan 

Gambar 1. Alur pencatatan dan pelaporan 

Keterangan: 

1. Form. TB. 06 berisi daftar tersangka penderita/ suspek TB di Poli/ Poli DOTS 

2. Form TB. 05 berisi permintaan dan laporan hasil pemeriksaan dahak 

3. Form TB. 04 merupakan register laboratorium TB di laboratorium 


Pelaksanaan PME harus sesuai dengan prosedur tetap : 

1) Prosedur tetap pemilihan dan pengambilan sediaan untuk uji silang 

dengan metode konvensional. 

2) Prosedur tetap penetapan jumlah sediaan, pemilihan dan pengambilan 

sediaan BTA untuk uji silang dengan metode LQAS. 

3) Prosedur tetap pengisian Form TB 12. 

4) Prosedur tetap analisis uji silang mikroskopis BTA. 

5) Prosedur tetap umpan balik uji silang BTA. 

b. Supervisi 

Supervisi dilakukan untuk : 

1) Melihat secara langsung praktek pemeriksaan mikroskopis BTA di 

laboratorium 

2) Menemukan masalah teknis dan operasional pemeriksaan mikroskopis 

BTA dan 

3) Melakukan bimbingan teknis dan membantu menyelesaikan masalah 

yang ada. 


62 

c. Tes Panel 

Tes panel/ uji profi siensi dilakukan apabila di wilayah kerja jejaring 

laboratorium TB pemeriksaan uji silang tidak berjalan dengan baik atau 

kegiatan pemeriksaan mikroskopis TB baru dilaksanakan di laboratorium 

wilayah terkait. 

Laboratorium rujukan dalam jejaring sebagai laboratorium yang memiliki 

kompetensi lebih tinggi bertindak sebagai penyelenggara tes panel dengan 

tugas: 

1) Menyiapkan sediaan kontrol tes panel. 

2) Menentukan nilai rujukan tes panel. 

3) Mengirimkan sediaan untuk diperiksa ke laboratorium peserta PME. 

4) Menganalisis dan memberikan umpan balik atas hasil pemeriksaan 

laboratorium peserta PME. 

5) Menindaklanjuti dengan tindakan supervisi kepada laboratorium 

peserta yang tidak lulus. 

Laboratorium peserta PME dengan tugas : 

1) Melakukan pemeriksaan sediaan tes panel. 

2) Mengirimkan laporan hasil pemeriksaan mikroksopis kepada 

laboratorium penyelenggara PME. 

3) Menindaklanjuti umpan balik dengan tindakan peningkatan mutu. 


3. Peningkatan Mutu 

Peningkatan mutu dilakukan secara terus menerus selama laboratorium 

melaksanakan kegiatan pemeriksaan. Pemantauan kinerja melalui PMI & 

PME akan menemukan temuan masalah yang ada dalam laboratorium. Upaya 

Perbaikan dilakukan dengan mengevaluasi implementasi prosedur tetap dan 

kinerja laboratorium. Apabila telah terjadi perbaikan kinerja maka ditetapkan 

prosedur tetap yang akan digunakan selanjutnya. Pemantauan implementasi 

prosedur tetap dilakukan secara terus menerus dan merupakan suatu kegiatan 

yang berkelanjutan. 

Siklus Peningkatan Mutu 

F. REFERENSI 

Pedoman Jejaring dan Pemantapan Mutu Laboratorium TB 

G. LATIHAN 

1. Tindakan apa saja yang dilakukan pada PMI 

2. PME dilaksanakan dengan kegiatan apa saja 

3. Kapan supervisi dilaksanakan 


Prinsip Pencatatan dan Pelaporan: 

1. Pencatatan pemeriksaan laboratorium TB merupakan bagian dari dokumentasi 

pelayanan suspek dan pasien TB 

2. Pencatatan harus dilakukan sesuai dengan urutan dan format yang tersedia, 

lengkap dan akurat 

- Form TB.04 : hasil pemeriksaan positif dituliskan dengan tinta merah, 

hasil negatif harus dituliskan NEG bukan dengan tanda − 

TB 04 dituliskan berurutan sesuai kedatangan pasien 

- Form TB 05 : hasil pemeriksaan ditulis dengan tanda rumput pada kolom yang 

sesuai 

Pengembalian laporan hasil pemeriksaan laboratorium pada form TB.05 harus 

dijaga kerahasiaannya (secara tertutup) dan tidak dibenarkan menyobek 

bagian bawah form TB 05 

- Pada TB 01 dituliskan hasil pemeriksaan dengan gradasi paling tinggi 

- Buku TB 06 tidak digunakan untuk mencatat hasil pemeriksaan ulang dahak/ 

Follow up pengobatan, hasil ini dicatat pada kartu penderita TB.01, TB.04 dan 

TB.05 

3. Arsipkan semua dokumentasi dengan baik 

2. Pengisian Form TB 06 

Form. TB. 06 berisi daftar tersangka/ suspek TB. Form ini terletak di Poli/ Poli 

DOTS 


Form TB. 05 berisi permintaan dan laporan hasil pemeriksaan dahak 


Form TB. 04 merupakan register laboratorium TB, terletak di laboratorium 

F. REFERENSI 

Buku Pedoman Nasional Pengendalian TB 

G. LATIHAN 

1. Latihan Mengisi form TB 05 

2. Latihan mengisi form TB 04 

3. Latihan memindahkan hasil pemeriksaan ke form TB 01 



PROGRAM TB NASIONAL 


Modul Pela han Pemeriksaan Dahak Mikroskopis TB 66 67 

TB.05 

FORMULIR PERMOHONAN LABORATORIUM TB UNTUK PEMERIKSAAN DAHAK 

Nama UPK : No.Telp.: 

Nama tersangka/pasien : Umur tahun 

Jenis kelamin : L P 

Alamat lengkap : 

Kab/Kota : 

Propinsi : Alasan pemeriksaan: 

Diagnosa 

Klasifikasi penyakit Follow up 

Paru 1. Akhir tahap awal 

Ekstraparu Lokasi : 2. Akhir sisipan 

3. 1 bulan sebelum AP 

No. identitas sediaan 4. Akhir pengobatan (AP) 

(sesuai dengan TB.06) No.Reg.TB kab/kota: 

/ / 

Secara visual dahak tampak: 

Tgl.pengambilan dahak terakhir: 

Tgl.pengiriman sediaan 

Tanda tangan pengambil sediaan 

Nanah lendir : S Bercak darah : S Air liur : S 

P P P 

S S S 

HASIL PEMERIKSAAN LABORATORIUM 

No. Register Lab. (sesuai dengan TB.04) : 

Tanggal Pemeriksaan Spesimen dahak * Hasil ** 

A (Sewaktu) 

B (Pagi) 

C (Sewaktu) 

+++ ++ + 1-9 *** Neg 

*) Diisi sesuai kode huruf sesuai identitas sediaan Diperiksa oleh 

**) Beri tanda rumput pd hasil yg sesuai Tanda tangan pemeriksa, 

***) Isi dengan jumlah BTA yang ditemukan

72

Modul Mikroskopis TB.indd - TB Indonesia

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?