Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

Lontay Beáta, Ph.D. IIIDE-OEC Orvosi Vegytani IntézetA MIOZIN FOSZFATÁZ SZABÁLYOZÓ ALEGYSÉGÉNEKOKADAINSAV ÁLTAL INDUKÁLT FOSZFORILÁCIÓJA ÉSTRANSZLOKÁCIÓJA HEPG2 SEJTEKBENA miozin foszfatáz (MP) a protein foszfatáz-1 (PP1) enzimek családjábatartozik, amelyben a katalitikus alegységhez (PP1c) egy miozinhoz is kötődő,130/133 kDa molekulatömegű regulátor alegység (MYPT1) is kapcsolódik. AzMP a miozint és más kontraktilis/citoszkeletális fehérjéket defoszforilál, ígyrészt vesz a kontraktilitás, citokinezis, sejtvándorlás stb. folyamatainakszabályozásában.Humán hepatokarcinóma sejtek (HepG2) szubcelluláris frakcióiban a MPaktivitás és a MYPT1 mennyisége között mutattunk ki korrelációt. Konfokálismikroszkópiával végzett vizsgálatok alapján a kontroll sejtekben a MYPT1 acitoplazmában és a sejtmagban lokalizálódott. A HepG2 sejtek 50 nMokadainsavval (OA), sejtpermeábilis foszfatáz inhibitor toxinnal, kezelve azalábbi változásokat figyeltük meg: (1) a MYPT1 transzlokálódott a citoszolból aplazmamembránhoz, amit a MYPT1 Thr695 oldalláncának megnövekedettfoszforilációja kísért.. Y-27632, egy specifikus Rho-kináz (ROK) inhibitorezeket a változásokat csak kismértékben befolyásolta; (2) a MYPT1 Thr850oldalláncának foszforilációja is növekedett és a MYPT1pThr850 a sejtmagibanés a perinukleáris régióban akkumulálódott. Ezeket a hatásokat az Y-27632nagymértékben gátolta; (3) a 20 kDa miozin II könnyű láncának foszforilációjaa Ser19 oldalláncon megnövekedett, különösen a sejt központi részében. Ezt ahatást az Y-27632 részben ellensúlyozta; 4) A stresszrostok képződése fokozottávált és a sejtek migrációs készsége csökkent. Y-27632 mindkét OA-általkiváltott hatást gátolta. HepG2 sejtlizátumban az OA (5-100 nM) nem volthatással a MP aktivitásra, de gátolta a PP2A aktivitást.Eredményeink arra utalnak, hogy az OA a MYPT1 transzlokációját,valamint ROK és PP2A függő foszforilációját indukálja, amely a miozin IIfoszforilációját és az MP gátlását fokozva a HepG2 sejtek motilis sajátságaitszabályozza.Témavezető: Prof. Erdődi Ferenc