Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

Erdős Erika, Ph.D. IIIDE OEC Immunológiai IntézetA SAP CSALÁDBA TARTOZÓ ADAPTOR MOLEKULÁK SRCKINÁZOKKAL VALÓ INTERAKCIÓINAK VIZSGÁLATA SAP (SLAM-Associated Protein) egy kisméretű, egyetlen SH2doménból álló, limfocita specifikus adaptor molekula, melynek mutációi az XLP(X-linked lymphoproliferative syndrome) betegséget okozzák. Ez a fehérje igennagy affinitással képes kötődni a SLAM (Signaling Lymphocytic-ActivationMolecule) család receptoraihoz és azok homoasszociációját követően aktiválni aSrc családba tartozó Fyn kinázt. Szerkezeti adatok szerint, a SAP kölcsönhatásaaz enzimmel, annak SH3 doménjén keresztül történik, stabilizálva ezzel a Fynkináz nyitott, aktív konformációját, így indítva el a SLAM által kiváltottjelátviteli folyamatokat. Ezen adaptor molekula nemcsak az SH3, hanem a kinázdoménen keresztül is képes kötődni az enzimhez, mely interakció funkcionálisjelentősége máig ismeretlen.A közelmúltban a SAP molekulával rokon, azzal egy családba sorolt,további adaptor proteineket írtak le: az EAT-2A-t és az EAT-2B-t (Ewingsarcoma-Associated Transcript-2), melyek elsősorban antigén prezentálósejtekben fejeződnek ki. Kísérleteink során arra kerestük a választ, hogy aSLAM receptorral együtt expresszálódó Src kinázok közül melyek képesekezekkel az EAT-2 molekulákkal kölcsönhatásba lépni. Korábban, élesztő kettőshibrid rendszerben bizonyítottuk, hogy valamennyi általunk vizsgált enzim (Fyn,Lyn, Hck, Lck, mFgr) a kináz doménjén keresztül köti az adaptor proteineket,míg a funkcióvesztéssel járó pontmutációkat hordozó kinázok (Lyn K275D, HckK269E) nem lépnek kölcsönhatásba az EAT-2 molekulákkal. Tehát a SAP-FynSH3 kötéshez hasonló interakciót ezidáig nem sikerült kimutatnunk. Jelenkísérleteinkkel, melyek során emlős fibroblaszt sejtek (293T) kotranszfekcióját,majd western blot analízisét végezzük, ezen eredményeinket kívánjukalátámasztani.Témavezető: Dr. Lányi Árpád