Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

Barok Márk, Ph.D. IIIDE OEC Biofizikai és Sejtbiológiai IntézetKORAI TRASTUZUMAB TERÁPIA HERCEPTIN® REZISZTENSEMLŐRÁK XENOGRAFTOKBANA trastuzumab (Herceptin®) – egy erbB2 ellenes egér monoklonálisellenanyag humanizált változata – önmagában is hatásos rákellenes készítmény,de kemoterápiával kombinálva különösen hatékony. Sajnos, a kezelt esetek egyrészében – a daganat erbB2 pozitivitása ellenére – a trastuzumab hatástalan,vagy a kezelés folyamán hatástalanná válik.Hogy vizsgálhassuk a trastuzumab rezisztencia kialakulását, és arezisztencia lehetséges molekuláris hátterét, fiatal nőstény SCID egerek bőre aláoltottunk erbB2 pozitív emlőrák sejteket (JIMT-1). Az első egércsoporttrastuzumab kezelését a daganatok észlelésekor indítottuk (a JIMT-1 sejtekkelvaló oltás utáni kilencedik napon). A második csoportba tartozó egerek az elsőtrastuzumab kezelést a daganatos sejtek oltásával egyidőben kapták. Mindenkezelt egér hetente egyszer kapott 5mg/kg trastuzumabot. Az első csoportbatartozó egerek xenograftjai lassabban növekedtek, mint a kontroll egerekxenograftjai. A második csoport egereinek tumora is növekedni kezdett, de anövekedés egy hét múlva megállt, sőt, a daganatok nagysága csökkenni kezdett,majd 4 hét elteltével ismét megindult; ettől kezdve a xenograftok méreteexponenciálisan nőtt.9-15 hét múlva a SCID egereket kivéreztettük, csontvelőt vettünk tőlük,és kivettük a daganatot. A vérből és a csontvelőből sűrűség grádienscentrifugálással izolált sejteket inkubáltuk humán HLA-I, erbB2 és erbB1ellenes antitestek Fab fragmentumaival. A mintákat konfokális mikroszkóppalvizsgálva vérben, ill. csontvelőben keringő daganatsejteket mutattunk ki,valamit sikerült 5-10 tumorsejtből álló, valódi mikrometasztázisokat találnunk.Vizsgáltuk egy új paraméter (keringő daganatos sejtek száma) bevezetéséneklehetőségét a trastuzumab kezelés hatásosságának megítélésében. Az egerekbőlkivett daganatokat immunhisztokémiai és citogenetikai módszerekkeljellemeztük. A xenograftokból két sejtvonalat alapítottunk: az egyiket egykontroll egér, a másikat egy trastuzumabbal kezelt egér daganatából (ez utóbbisejtvonal 10µg/ml trastuzumab koncentráció mellett nő). Összehasonlítottuk ekét sejtvonal MHC-I, erbB1, erbB2, erbB3, erbB4, CD44 és β1-integrinexpressziós szintjét a kiindulási JIMT-1 sejtvonaléval.Témavezető: Prof.Dr. Szöllősi János