Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

Petrás Miklós, ÁOK IIIIdegsebészeti Klinika, Biofizikai és Sejtbiológiai IntézetERBB2, BETA-1 INTEGRIN ÉS LIPID TUTAJOK ASSZOCIÁCIÓJAHERCEPTIN SZENZITÍV ÉS REZISZTENS TUMORSEJTEKENA Herceptin egyik kulcsfontosságú támadáspontja az ErbB2 receptor általmediált transzmembrán jelátviteli útvonal, mely fontos szerepet játszik számosmalignus folyamat (pl. emlő-, gyomorrák) kialakulásában. A Herceptin egyErbB2 ellenes antitest humanizált változata, amelynek alkalmazása az ErbB2down-regulációjához ill. a MAPK, PI3K jelátviteli útvonalak inaktivációjáhozvezet, de hatásának pontos mechanizmusa még nem teljesen tisztázott. AzErbB2 fehérjét overexpresszáló emlőrákos betegek kezelésére rutinszerűenalkalmazzák a Herceptint, azonban sajnos gyakran megfigyelhető, hogy adaganat rezisztens, ill. a kezelés alatt rezisztenssé válik a Herceptinnel szemben.A rezisztencia kialakulásának vizsgálatára Herceptin rezisztens (JIMT-1, MKN-7) és szenzitív (SKBR-3, N-87) sejtvonalak összehasonlító vizsgálatát végeztükel. Konfokális mikroszkópos vizsgálatokkal az ErbB2 és beta-1 integrinkolokalizációját, valamint lipid tutajokkal képzett asszociációját mutattuk ki.Áramlási citometriás energia transzfer mérések alapján megállapítottuk, hogy azErbB2 és beta-1 integrin szubmikronos kolokalizációjukon túl molekulárisasszociátumokat is képeznek. A Herceptin szenzitív sejteken mért magasabbErbB2 expressziós szint pozitív korrelációt mutatott az ErbB2 homoasszociációmértékével, azonban a vizsgált sejtek beta-1 integrin homoasszociációjafüggetlen volt annak expressziós szintjétől, bár a Herceptin rezisztens sejteken abeta-1 integrin expresszió mértéke jóval magasabb volt, mint a szenzitívsejteken. A lipid tutajok keresztbe kötése nagymértékben csökkentettekolokalizációjukat az ErbB2 fehérjékkel, ill. beta-1 integrinnel. Emellett akár azErbB2, akár az integrin keresztkötése megszüntette a másik fehérjével mérhetőheteroasszociációt. Mindez azt sugallja, hogy funkcionális szempontból azErbB2 és a beta-1 integrin két különálló molekuláris asszociátumot alkot, ésezek kevésbé kötődnek a lipid tutajokhoz, mint a GPI-horgonyzott fehérjék.Vizsgálataink megerősítették az ErbB2 és a beta-1 integrin közötti molekuláriskölcsönhatások létezését, valamint, hogy a membránfehérjék korlátozott számúasszociációs felülettel rendelkeznek, amelyért a potenciális partnerekversengenek. Eredményeink azt is mutatják, hogy az onkogenezisben szerepetjátszó fehérjék expressziós profiljának csak a molekuláris interakciókmeghatározásával együtt van jelentősége.Témavezető: Prof.Dr. Csécsei György, Prof.Dr. Szöllősi János