Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

Páyer Edit, ÁOK VDE OEC Élettani Intézet és BőrklinikaA PROTEIN KINÁZ C IZOENZIMEK DIFFERENCIÁLT SZEREPEKÜLÖNFÉLE SEJTFELSZÍNI ADHÉZIÓS MOLEKULÁKKIFEJEZŐDÉSÉNEK SZABÁLYOZÁSÁBAN HUMÁNKERATINOCYTÁKONA protein kináz C (PKC) rendszer fontos szerepet játszik humánepidermális keratinocyták proliferációjának és differenciálódásánakszabályozásában. Ugyancsak ismert, hogy a PKC család bizonyos izoenzimjeispecifikus módon képesek a fenti folyamatok befolyásolására. Munkacsoportunkkorábban egyes PKC izoenzimeket stabilan overexpresszáló humán HaCaTkeratinocytákat állított elő. Ezen sejtek vizsgálatakor bebizonyosodott, hogy akalcium-függő cPKC-alfa és kalcium-független nPKC-delta jelenléte serkenti asejtek differenciálódását, míg a cPKC-béta és nPKC-epszilon hatása aproliferáció fokozásában nyílvánul meg. Jelen kísérleteinkben ezen PKCoverexpresszorsejteken vizsgáltuk olyan sejtfelszíni adhéziós molekulákkifejeződésében bekövetkező módosulásokat, melyek jelenléte biztosítja azepidermisz rétegeinek szerkezeti egységét, beleértve az adherens junkciókat ésdezmoszómákat.Western blot technika alkalmazásával kimutattuk, hogy proliferáló HaCaTkeratinocytákban jelentős mértékben expresszálódnak a bazális és spinózus rétegmarkerei, a P-kadherin (P-cad, adherens junkció-specifikus kadherin) és adezmoglein-3 (Dsg, dezmoszomális kadherin), míg a differenciálódó sejtekben aDsg-1 kifejeződése dominált. Ezzel jó összhangban az nPKC-deltátoverexpresszáló differenciált sejtekben jelentősen megemelkedett a Dsg-1szintje, míg a P-cad és Dsg-3 expressziója lecsökkent. Ehhez hasonló adhéziósmolekula mintázatot tapasztaltunk a cPKC-alfát kifejező, ugyancsakdifferenciálódó sejtekben, de itt nem változott meg Dsg-1 szintje.Megállapítottuk továbbá, hogy az nPKC-delta szelektív gátlószere, a Rottlerindózis-függően csökkentette a Dsg-1, ugyanakkor jelentősen (>100 %-kal)megemelte a Dsg-3 és P-cad szintjét. Hiperproliferatív PKC-overexpresszorsejteket vizsgálva kimutattuk, hogy míg a nPKC-epszilont kifejező sejtekben aDsg-1 szintje csökkent, a Dsg3 szintje nőtt, de a P-cad kifejeződése nemváltozott; addig az ugyancsak gyorsabb növekedési rátát mutató cPKC-bétaoverexpresszorokban csak a P-cad emelkedett expresszióját tudtuk tetten érni.Mindezen adataink arra utalnak, hogy a különféle sejtfelszíni adhéziósmolekulák kifejeződésének szabályozásában – a differenciáltsági állapotegyértelmű hatásán túl – egyes PKC izoformák specifikus, ugyanakkoregymással ellentétes szereppel bírhatnak.Témavezető: Dr. Bíró Tamás, Dr. Szegedi Andrea