Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

Pap Pál, Mol.Biol. IVÉlettani IntézetTASK-CSATORNÁK IMMUNHISZTOKÉMIAI VIZSGÁLATAEGÉSZSÉGES ÉS KÓROS SZÖVETEKBEN: MÉGSEM UNALMASAK A„SZIVÁRGÓ” K+-CSATORNÁK?A TASK-csatornák (TWIK-related acid-sensitive K+ channels) az ún.„ikerpórusú” K+-csatornák csoportjába tartoznak. A csoport közösjellegzetessége, hogy a funkcióképes struktúra kialakulása dimerizációt igényel,az egyes alegységek négy transzmembráns domént és két pórusformáló hurkottartalmaznak. A TASK-csatornák jelentős szerepet tölthetnek be a sejteknyugalmi membránpotenciáljának és ingerlékenységének szabályozásában,egyes gáznemű altatószerek célpontjául szolgálhatnak, és jelentőségük lehet alégzés és az aldoszteronszekréció szabályozásában. Újabb adatok szerint aTASK-3-csatornákat kódoló gén overexpressziója összefüggésben állhat egyesszövetek rosszindulatú elfajulásával. Mindezek ellenére nagyon kevésinformáció áll rendelkezésre pontos szöveti megoszlásukra vonatkozólag,különösen ami a humán szövetmintákat illeti. A jelen munkában TASK-3- ésTASK-5-specifikus ellenanyagokat alkalmazva kíséreltük meg a csatornáklokalizációjának feltérképezését. A kísérletek során elvégeztük a felhasználtantitestek reakciókörülményeinek optimalizálását is.Megállapítottuk, hogy formalin-fixált szövettani metszetek alkalmazásasorán elengedhetetlen a megfelelő antitigénfeltárási technika alkalmazása; ennekhiányában vagy nem megfelelő technika alkalmazása után gyenge vagyálnegatív reakciót tapasztaltunk. Megfelelő feltárási technika után erőteljesTASK-3 expressziót láttunk a vastagbél-nyálkahártya hámsejtjeiben, valamint abélfal neuronális struktúráiban. Ettől eltérően gyenge, jórészt a sejtmagokravagy azok környékére lokalizálódó festődést láttunk a simaizomrétegben.Hasonló megoszlást észleltünk a gyomorszövet esetében is, ahol arosszindulatúan elfajult részekben is kimutattunk TASK-3 pozitivitást. Apancreas exocrin és endocrin állománya is erős TASK-3-specifikus festődéstmutatott. A munka során elvégeztük egy, a SIGMA által újonnan kifejlesztetthTASK-3 ellenes monoklonális ellenanyag tesztelését, valamint angolkollaborációs partnerünk által létrehozott, hTASK-5 ellenes antitest kezdetivizsgálatát is.Kísérleteink eredményei a technikailag jelentős részletek mellett azt issugallják, hogy a TASK-3-csatornák lényeges szerepet tölthetnek be agastrointestinalis rendszer hámsejtjeinek szekréciós működésben és a pancreashormontermelésének szabályozásában.Témavezető: Dr. Rusznák Zoltán