Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

Törőcsik Dániel Dr., Ph.D. IIDE OEC Biokémiai és Molekuláris Biológiai IntézetPPARG MAGRECEPTOR ÁLTAL AKTIVÁLT ÚTVONALAK ÉSMYCOBACTERIUM BOVIS BACILLUS CALMETTE-GUÉRIN FERTŐZÉSKAPCSOLATA MAKROFÁG ÉS DENDRITKUS SEJT MODELLBENA zsíranyagcserében központi szerepet betöltő PPARg (PeroxisomeProliferator Activated Receptor gamma) receptor aktiválása a makrofágokban ésa dendritikus sejtekben morfológiai és funkcionális változásokat eredményez.Makrofágokban például az erek plakkjaiba bevándorló makrofágok jellemzőfenotipusának, dendritikus sejtekben pedig specifikus immunsajátságokkialakításában játszik szerepet a receptor. A PPARg célgénjei közé tartozik azLXRa (Liver X Receptor alpha) is, aminek szerepe van a sejtek koleszteroltranszportereinek szabályozásában.Kísérleteinkben arra kerestük a választ, hogy a PPARg útvonalaktiválásával átprogramozott makrofágok és dendritikus sejtek fertőzésselszembeni immunválaszkészsége, illetve a PPARg receptor által szabályozottgének kifejeződése miként változik meg egy fertőzéses modellben.Vizsgálatainkat emberi perifériás vérből CD14 felszíni marker alapjánszeparált, a dendritikus sejtek esetén további IL4 és GMCSF citokinekjelenlétében tenyésztett sejteken végeztük, melyekhez a differenciálódás ötödiknapján adtuk a fertőzés modelljeként szolgáló Mycobacterium bovis BacillusCalmette-Guérin baktériumot. A változásokat RT-Q-PCR-ral valamint áramlásicitométerrel követtük.Kísérleteink eredményeként megállapíthatjuk, hogy míg a baktérium amakrofágokban a PPARg receptor átmeneti csökkenését, addig a dendritikussejtekben annak azonnali indukcióját eredményezte, mely indukció azonbannem volt képes ellensúlyozni a vizsgált célgének (CD36, FABP4, ADRP)mRNS szintjének mindkét rendszerben megfigyelt, fertőzés hatásárabekövetkező csökkenését. A célgének közül érdekes kivételként szerepel aPGAR gén, mely expresszióját a baktérium önmagában is növelte, valamint azLXRa magreceptor. Megfigyeltük továbbá, hogy a célgének expressziójánakcsökkenését az INFg baktériummal történő együttes alkalmazása továbbfokozta, mely citokin önmagában is jelentősen növelte az LXRa magreceptorszintjét. Fontos eltérés továbbá, hogy a baktériummal történő fertőzés a PPARgútvonal aktiválásával átprogramozott dendritikus sejtekben nem eredményezettnövekedést a CD83 és CD86 markerek felszíni megjelenésében.Ezek az eredmények felvetik a PPARg és az LXRa magreceptorokszerepének megváltozását intracelluláris patogénekkel való fertőzés soránmakrofágokban és dendritikus sejtekben.Témavezető: Dr. Nagy László