Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

Tóth István Balázs, Ph.D. IIDE OEC Élettani IntézetJELÁTVITELI RENDSZEREK HUMÁN SEBOCYTÁKONA faggyúmirigyet alkotó sebocyták működését csak napjainkban kezdjüksejt és molekuláris szinten is megérteni. A primer izolált tenyészetek, mintmodellek, korlátozott fenntarhatóságából eredő hátrányokat sikerültkiküszöbölni különféle sejtvonalak létrehozásával. Ezek egyike a humánsebocyta eredetű SZ95 sejtvonal, amely bizonyítottan megtartotta a humánprimer sebocyták fenotípusos sajátságait, és mint ilyen, a sebocytákra jellemzőjelátviteli folyamatok tanulmányozásának kiváló alanya.Az SZ95 sebocyták komplex jelátviteli folyamatainak vizsgálatát háromirányban kezdtük meg: egyrészt egy sejtfelszíni ioncsatorna, a vanilloidreceptor-1 (TRPV1); másrészt egy plazmamembránban lokalizálódó, G-proteinkapcsolt receptor, a cannabinoid receptor-1 (CB1); harmadrészt egy, aszignáltranszdukciós folyamatokban központi szerepet játszó enzimcsalád, aprotein kináz C (PKC) izoenzimek képezik vizsgálataink tárgyát. Előadásombana fentiekkel kapcsolatos eredményeinket szeretném áttekinteni.Humán bőrből készült fagyasztott metszetek vizsgálata során leírtuk aTRPV1 jelenlétét a bőr faggyúmirigy sejtjein. Ezzel összhangban az SZ95sebocytákon is kimutattuk a receptort RT-PCR, valamint Western immunoblotmódszerek felhasználásával, és leírtuk a receptor expressziós szintjénekváltozását a tenyésztés folyamán. Funkcionális vizsgálataink során kimutattuk,hogy alacsony (nanomoláris) koncentrációban alkalmazott kapszaicin serkentiaz SZ95 sebocyták proliferációját, míg nagy koncentráció gátolja azt, ésapoptózist indukál. Jelenleg zajló kísérleteinkben a receptor-aktivációdifferenciálódásra (lipidtermelés) gyakorolt hatását vizsgáljuk.Mind Western immunoblot, mind quantitatív „real-time” Q-PCRmódszerek alkalmazásával leírtuk az SZ95 sebocyták PKC izoenzimmintázatátés annak változását a tenyésztés folyamán. Jelenleg folyó kísérleteinkben a PKCrendszer PMA-val történő aktivációjának és down-regulációjának hátásátvizsgáljuk a differenciálódás és a proliferáció folyamataira.Végezetül immuncitokémiai és RT-PCR módszer segítségével kimutattuka CB1 jelenlétét is SZ95 sebocytákon, mely receptor sejtproliferációban ésdifferenciálódásban játszott szerepét jelenleg próbáljuk tisztázni.Témavezető: Dr. Bíró Tamás