Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

Szokol Karolina, Ph.D. IIIDE OEC, Anatómia, Szövet- és Fejlődéstani IntézetNEUROPEPTIDEK ELOSZLÁSA GABAERG INTERNEURONOKBANGAD65-GFP TRANSZGENIKUS EGEREK LUMBÁLIS GERINCVELŐSZAKASZÁNA neuropeptidek morfológiai markerként fontos szerepet töltenek be gátlóinterneuronok csoportosításában a rágcsálók agyának számos területén (pl.cortex, hippocampus). A gerincvelő esetében a neuropeptidek hasonlóklasszifikációra való használata kevésbé elterjedt. Kísérleteink során GAD65-GFP transzgenikus egérből származó lumbális gerincvelő szakaszonimmunhisztokémiai módszerrel vizsgáltuk különböző neuroaktív peptidekeloszlását GABA-erg, azaz a GAD65 enzimet GFP-vel együtt expresszálóneuronokban.A neuropeptidek közül a Somatostatin (SOM), a Neuropeptid Y (NPY), aCholecystokinin-like peptide (CCK) és a Met-Enkephalin (Met-Enk) eloszlásimintázatát vizsgáltuk. A SOM és a CCK rágcsálók agyának más területein jóldefiniált gátló neuroncsoportokban szelektíven fordul elő, míg az NPY és a Met-Enk feltételezések szerint szerepet játszhat a primer afferenseken keresztül agerincvelő hátsó szarvába beérkező nociceptív információk továbbításánakmodulálásában.Felnőtt GAD65-GFP egerek lumbális gerincvelőszakaszaiból készített 60mikrométer vastagságú metszeteket a neuropeptidek és GFP ellen termeltetettantitestekkel kezeltük. Primer antitestjeinket Alexa555- és Alexa488fluorokromokkal vizualizáltuk konfokális mikrószkópos vizsgálat céljára.Mind a négy vizsgált neuropeptid esetében nagyszámú immunopozitívaxon figyelhető meg az I-II laminákban. NPY pozitív axonok ésaxonterminálisok kisebb mennyiségben az V-VII-es és a X-es laminákban,CCK-t tartalmazó axonok az V-ös és a X-es laminákban, Met-Enkimmunopozitív terminálisok pedig a gerincvelő szürkeállományában diffúzan,mindenhol megfigyelhetők voltak. Sejttestek immunopozitivitását egyik vizsgáltesetben sem tapasztaltuk, ezért ezen neuropeptidek klasszikus morfológiaimarkerként való felhasználása helyett a gerincvelőben valószínűleg a peptidekaxonterminálisokban való lokalozációja jelenthet segítséget a gátló neuronokcsoportosításában.Témavezető: Prof. Dr. Antal Miklós, Dr. Szűcs Péter