Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

Szarvas Mariann, Ph.D. III, Friedländer Elza, MD-Ph.D. IIIDE OEC Klinikai Kutató Központ, DE OEC Biofizikai és Sejtbiológai IntézetA VON WILLEBRAND FAKTOR SZINT ÉS A THROMBUSKÉPZŐDÉSÖSSZEFÜGGÉSÉNEK IN VITRO VIZSGÁLATAA von Willebrand faktor (VWF) a thrombocyták adhéziójához és athrombus képződéshez elengedhetetlen protein, mely különösen magasnyíróaránnyal jellemezhető áramlási körülmények között fejti ki hatását.Klinikai megfigyelések alapján a plazma VWF szintjének emelkedése fokozottthrombosis-készséget jelenthet. Ezen feltételezés in vitro kimutatása érdekébenvéráramlást modellező rendszerben, párhuzamos lemezű áramlási kamrávalvégeztünk dinamikus thrombocyta adhéziós kísérleteket humán III. típusúkollagén felszínen, magas nyíróarány létrehozásával. A VWF szint thrombocytaadhéziót befolyásoló hatásának vizsgálatát egészséges egyének vérénekfelhasználásával, tisztított és FITC jelölt VWF vagy Haemate P hozzáadásávalvégeztük.Az adhézió jellemzésére meghatároztuk a felszínfedettséget, a felszínenkeletkezett thrombusok átlagos alapterületét és magasságát. A thrombusképződése során bekövetkező thrombocyta aggregáció mértékét az egyedithrombocyták eltűnésével határoztuk meg. A VWF beépülését a thrombusbakonfokális lézer pásztázó mikroszkóppal detektáltuk.A felszínfedettség, valamint az átlagos thrombus méret szignifikánsan éspozitívan korrelált az áramoltatott vér VWFAg szintjével. Nem befolyásoltaazonban szignifikánsan a keletkezett thrombusok magasságát a VWF szintemelése, annak ellenére, hogy néhány magasabb thrombus keletkezését isindukálta. Az adhézió során bekövetkező egyedi thrombocyta eltűnés szinténnem mutatott összefüggést a VWFAg szinttel. Konfokális lézer pásztázómikroszkópos eredményeink szerint a VWF a thrombus teljes térfogatábaegyenletesen épült be, jellegzetes maximumot adva a kollagén felszínközelében. A VWF szint emelése beépülésének jellegét, valamint a kollagénfelszín közeli maximumhelyet nem vagy csak kis mértékben befolyásolta,azonban – a keletkezett thrombusok magasságával korrelálva – a VWFdetektálhatósági magasságát növelte.In vitro modellrendszerünkben végzett kísérleteink eredményei aztmutatják, hogy a vér VWF mennyiségét növelve a thrombocyták adhéziójafokozódik, valamint azt a feltételezést erősítik, mely szerint a magas VWF szintfokozhatja a thrombosis rizikóját.Témavezető: Dr. Hársfalvi Jolán