Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

Szalmás Anita, Ph.D. IIOrvosi Mikrobiológiai IntézetINTERLEUKIN-10 PROMÓTER METILÁCIÓ ÉS HUMÁNPAPILLOMAVÍRUS INFEKCIÓ KERATINOCITA SEJTVONALAKBANA 16-os és 18-as típusú humán papillomavírusokkal történő infekciógyakran vezet méhnyakrák kialakulásához. A nem megfelelő citokin szintéziscsökkentheti a helyi 1-es típusú (sejtes) immunválasz hatékonyságát és ezzel akésőbbiekben elősegítheti a rákmegelőző elváltozások kifejlődését. A 2-estípusú citokinek, mint például a humán interleukin 6 (hIL-6) és a humáninterleukin 10 (hIL-10) fokozott termelése kapcsolatba hozható ezenfolyamatokkal. A hIL-6-tól eltérően a hIL-10 gén inaktív keratinocitákban.A promóter metiláció az egyik lehetséges epigenetikai mechanizmus azemlősök génexpressziójának szabályozásában. Azok a citozin bázisok, melyeketközvetlenül guanin követ (ún. CpG dinukleotidok) általában metiláltak azemlősgenomban. A génpromóterekben ezen dinukleotidok metilációjafordítottan arányos az adott lókusz transzkripciós aktivitásával.Kísérleteink során a hIL-10 promóter metilációs mintázatát vizsgáltukNa-biszulfitos DNS-modifikálást követő szekvenálással. Kezdeti kísérleteinkbenkeratinocita eredetű sejtvonalakat hasonlítottunk össze hIL-10 termelésére képesperifériális mononukleális sejekkel (PBMC).Hat CpG dinukleotid található a hIL-10 gén promóterében, atranszkripciós startpontot megelőző 0,5 kb hosszúságú szakaszon a -373, -352, -350, -320, -185, -110 nukleotid pozíciókban. Mind a PHA-stimulált, mind astimulálatlan PBMC sejtekben mind a hat CpG dinukleotid metilálatlannakbizonyult (0-25% metiláció), ezzel szemben a HPV-genomot nem hordozókeratinocita sejtvonalakban ezek a CpG dinukleotidok általában metiláltakvoltak (75-100% metiláció).HPV-16 E6-tal stabilan transzfektált HaCaTsejtekben a CpG(-320), HPV-16 E7-tel stabilan transzfektált HaCaT sejtekben aCpG(-320) és (-185), és a teljes HPV-16 genommal stabilan transzfektált C-33Asejtekben a CpG(-373) és (-185) demetilálódtak.Eredményeink alapján mondhatjuk, hogy a hIL-10 promóter metilációsminázata összefüggésben lehet a transzkripciós aktivitással. Azonban a hIL-10promóter metilációját méhnyakrák kialakulása során a HPV onkoproteinekenkívül más tényezők is befolyásolhatják.Témavezető: Dr. Kónya József, Prof. Gergely Lajos