Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

Pályi Krekk Zsuzsanna, Ph.D. IIIDE OEC Biofizikai és Sejtbiológiai IntézetERBB ÉS CD44 RECEPTOROK SEJTFELSZÍNI ASSZOCIÁCIÓINAKVIZSGÁLATA TUMOROS SEJTVONALAKONA tirozin kináz családba tartozó ErbB2 molekula egyes emlőkarcinómákközel 30%-ában fokozott expressziót mutat, mely a daganat rossz prognózisávaltársítható. Az ErbB2 jelentőségét fokozza, hogy a klinikumban alkalmazottHerceptin nevű specifikus humanizált monoklonális antitest terápia célpontja. ACD44 hialuronsav receptor egy transzmembrán glikoprotein, amely többekközött a sejtek adhéziójában és migrációjában játszik lényeges szerepet. AzErbB2 és CD44 receptorok túlzott expresszióját figyelték meg emlő- éspetefészek tumorokban. Kísérleti eredmények alapján feltételezhető a kétreceptor esetleges kapcsolata a receptoraktiváció során, azonban a pontosmechanizmus még nem ismert.Vizsgálataink során az ErbB receptorok és a CD44 molekulakolokalizációs viszonyait valamint homo- és heteroasszociációjáttanulmányoztuk. Kísérleteinket hialuronsavval ( a CD44 receptor elsődlegesligandja) kezelt és kezeletlen sejtkultúrákban végeztük. A vizsgált receptorokkolokalizációját konfokális mikroszkóppal vizsgáltuk. Az ErbB és CD44molekulák homo- és heteroasszociációját a fluoreszcencia rezonancia energiatranszfer (FRET) áramlási citométerre kifejlesztett változatával (FCET) mértük,mely egy statisztikailag pontos elemzést tesz lehetővé. Az ErbB és CD44molekulák asszociációjának heterogenitását konfokális mikroszkópon, akceptorfotokioltáson alapuló pixelenkénti FRET méréssel elemeztük.Áramlási citometriás mérési eredményeink a CD44 molekula fokozottexpressziójára utaltak JIMT emlőtumor és MKN7 gyomortomor Herceptinrezisztens sejteken. A konfokális felvételek alapján a vizsgált tumorossejtvonalakon a CD44 hialuronsav receptor nagy mértékű együttállást mutatottaz ErbB2 molekulával. A vizsgált molekulák között detektált energia transzferhatékonyság az erbB2 és CD44 molekulák együttállásán túl a tanulmányozottreceptorok asszociációjára utal. A hialuronsav kezelés hatással volt az általunkvizsgált sejtfelszíni receptor molekulák asszociációjára. A hialuronsav fokozta aCD44 és ErbB2 molekulák heteroasszociációjat SKBR3 és JIMT sejtvonalakon.Ugyanakkor a hialuronsav feltételezett maszkírozó szerepét a Herceptinrezisztencia kapcsán mérési eredményeink nem támasztották alá.A receptoraktiváció során az asszociációs mintázatban bekövetkezőváltozások vizsgálata hozzásegíthet a ligand kötődése révén aktivált folyamatokjobb megismeréséhez és értelmezéséhez.Témavezető: Prof.Dr. Szöllősi János