2005 BSc - Orvosi laboratóriumi és képalkotó diagnosztikai ...

A tantárgy/kurzus címe:A tantárgy/kurzus száma: Félév:Immunológiai reagensek fejlesztése6. félévA kurzus típusa: gyakorlat Óraszám/félév: 14 Kreditek száma: 1Előadótanár: Dr. Katona ÉvaIntézet/Tanszék:DE-OEC Klinikai Kutató Központ4012 Debrecen, Nagyerdei krt. 98. Tel.: (52/431-956), Fax: (52/417-631)A kurzus státusa a tanulmányi programon belül:OKLA számára kötelező, ODLA számára kötelezően választhatóA kurzus célja:Laboratóriumi diagnosztikai és kutatási célokra alkalmas immunológiai reagensek kifejlesztésénekelsajátítása a gyakorlatban.A kurzus leírása:Immunizálási protokoll készítése, immunizált állat szérumából az antigénre specifikus antitest-titermegállapítása, poliklonális és monoklonális antitestek tisztítása, jelzése biotinnal ésenzimmel, a jelölt antitestek alkalmazása ELISA technikában.Követelmények:A hallgatók ismerjék meg az immunológiai reagensek, immundiagnosztikai módszerek fejlesztéséhezszükséges módszereket.Előfeltételek:Immunológiai reagensek fejlesztése tantárgy egyidejű felvétele.Oktatási segédeszközök:Gyakorlati protokollok írott formában.Értékelés:A gyakorlati jegy kialakítása: a jegyzőkönyvekre adott osztályzatok átlaga alapján történik.gyakorlatTéma (óraszám)1. Monoklonális antitest tisztítása hibridóma felülúszóból Protein-A affinitás kromatográfiával, a tisztítottantitest fehérje tartalmának meghatározása. A tisztított antitest biotinálása. (6 óra)2. Az előző gyakorlaton biotinált antitest működésének ellenőrzése (titrálása) direkt ELISA módszerrel. (4óra)3. Az antigén immunprecipitációja biológiai mintából a biotinált antitest és streptavidin agarózsegítségével. (4 óra)Aláírás feltétele:A gyakorlatokon való részvétel kötelező, pótlására nincs lehetőség.A gyakorlatokon végzett munkáról jegyzőkönyv készítése kötelező.Ajánlott irodalom:6. Klinikai Biokémiai Gyakorlatok (egyetemi jegyzet(DEOEC KBMPI-1999))7. Györgyi S., Krasznai I.: Orvosi Izotóptechnika; Medicina/Aesculap 19858. László F., Jánky T.: Radioimmunoassay; Medicina/Aesculap 19869. E. P. Diamandis, T.K. Christopoulos, eds.: Immunoassay; San Diego: Academic Press, 1996.10. Füst Gy., Merétey K., Rajnavölgyi É: Klinikai Immunológia/III. Módszerek; Tempus ITC 1993.11. Szegedi Gyula, Zeher Margit, Bakó Gyula: Klinikai Immunológia ; Springer 1999.12. Falus András: Az immunológia élettani és molekuláris alapjai ; Semmelweis Kiadó 1998.13. Tietz: Fundamentals of Clinical Chemistry ; Saunders, 2001. 88-90, 185. oldal14. John Bernard Henry: Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods; Saunders, 2001. 65-66,821-828 oldal15. L. Caponi, P. Migliorini: Antibody usage in the lab; Springer 1999.217