2005 BSc - Orvosi laboratóriumi és képalkotó diagnosztikai ...

HétÉlettani vizsgáló módszerek tematikaElektrofiziológiai vizsgálómódszerek alkalmazása a sejtek elektromos tevékenységének kutatásában.A klasszikus membrán biofizika megteremtése. Az első membránmodellek. Az akciós potenciálionfüggése. A voltage-clamp módszer megszületése. Current-clamp, Voltage-clamp. Hogyan csináljunkvoltage-clamp rendszert? A feedback amplifier. A technika fejlődése. Az ionáramok mérése. Az ionáramokszeparált mérése. Az ionáramok feszültség-áramerősség függése. A patch-clamp megszületése.1. hétÚjabb technikák: AP-clamp, oocyte-clamp, macro (giant) patch, perforated patch, kombinált patchrövidülés,kombinált patch-fluo (Szigeti Gyula)Ajánlott irodalom: Fonyó: Az orvosi élettan tankönyve (Medicina, Budapest, 2003) idevonatkozó fejezeteiMérőmódszerek a kalciumhomeosztázis vizsgálatában. A fluoreszcens módszerek alapjai. A fluoreszcensspektrum és a detektálása alkalmas műszerek. A mérésekhez használható festékek kiválasztásának2. hét kritériumai. A leggyakrabban használt fluoreszcens festékek tulajdonságai. Fluoreszcens módszerek alkalmazásakülönbőző preparátumokon: Izolált szívizomsejt, izolált vázizomrost, izolált, dobogó szív. Amérőrendszerek bemutatása. A mérhető kalcium felszabadulások fajtái és tulajdonságai. (Szentesi Péter)Áramjelek analízise I (Csernoch László) A felszíni membránon átfolyó áramok áram-feszültség karakterisztikájának3. hét meghatározása és értelmezése. A membránok idõ-független leírása. ANerst-Plank egyenlet. Ionok mozgása folyadékokban: a diffúzió és a driftelektromos térben.Áramjelek analízise II Az ionáramok kinetikájának meghatározása és leírása a csatornák kapuzó4. hét mechanizmusa alapján. A csatorna-alegységek szerepének kísérletesmegközelítése. A Boltzmann-eloszlás.Biostatisztika I A valószínűség fogalma. Alapdefiníciók: esemény, gyakoriság, relatív gyakoriság, valószínűség.Valószínűségi algebra. Eseményalgebra. Valószínűségi változó. Nevezetes diszkrét eloszlások.5. hétVárható érték. Szórásnégyzet. Korrelációs együttható. Nagy számok törvénye. Eloszlás függvény. Sűrűségfüggvény. Nevezetes folytonos eloszlások.Normális eloszlás. t-eloszlás.Biostatisztika II Statisztikailag fontos értékek: számtani átlag, median, standard deviation (SD),variancia, standard error (SE). Statisztikai módszerek alkalmazása az orvostudományban. Munkahipotézisfelállítása és ellenőrzése statisztikai módszerekkel. A véletlen szerepének megítélése, a szignifikancia. Alegfontosabb egyszerű szignifikanciapróbák. Student-féle t-próba. A varianciaanalízis alapjai. (Szentesi6. hét Péter)Szakirodalom: Hajtman Béla: Bevezetés a matematikai statisztikába. Akadémiai Kiadó Budapest, 1971.Juvancz Iréneusz, Paksy András: Orvosi biometria. Medicina Könyvkiadó Budapest. 1982. Dinya Elek:Biometria az orvosi gyakorlatban. Medicina Könyviadó Rt. Budapest, 2001. Vargha András: Matematikaistatisztika- Pszichológiai, nyelvészeti és biológiai alkalmazásokkal. Pólya Kiadó Budapest, 2000.A neuronok által expresszált ioncsatornák áttekintése. Az ioncsatornák általános szerkezete, csoportosításuk,alegységösszetételük vizsgálatának gyakorlati lehetőségei. A feszültségvezérelt ioncsatornákklasszikus és modern szerkezeti modellje. A feszültségvezérelt ioncsatornákat felépítõ alegységek molekuláris7. hétstruktúrája. Az ioncsatornák csoportosítása, elkülönítésük módjai; alegységspecifikusgátlószerek és helyük a neurobiológiai arzenálban. (Rusznák Zoltán)Neuronok előkészítése funkcionális vizsgálatokra. Az alkalmazható technikák előnyei és hátrányai. A8. hét neurobiológiai kutatások lehetséges metodikai irányai: izolált sejtek, szövettenyészetek, szeletpreparátum.A központi idegrendszer neuronjainak funkcionális és immunhisztokémiai vizsgálata. (Rusznák Zoltán)Kalcium-transzporter fehérjék izolálása és azonosítása. Kalcium-transzport rendszerek különbözőizomszövetekben. Tisztítási eljárások (sejtfeltárás, differenciálcentrifugálás, lépcsős és folyamatos9. hétsűrűséggrádiensen történő elválasztás, izotóppal történő jelölés). Izolált fehérjék tisztaságának ellenőrzéseSDS-PAGE segítségével. Ioncsatornák szolubilzálása detergens használatával. (Jóna István)Mérések izolált ioncsatornákon: a bilayer technika A bilayer technika története. A mesterséges lipidkettősréteg alkotóelemei, fizikai-kémiai jellemzői, kialakulása. Elektrostrikció. Az oldaterek összetétele,10. hétcsatorna beépítési eljárások (vezikula, szolubilizált csatorna). Single channel áramrekordok és analízisük.(Jóna István)11. hét Sejt- és szövettenyésztés (primer kultúrák, sejtvonalak, szervkultúrák) (Bíró Tamás)A jelátviteli folyamatok molekuláinak protein és RNS szintű vizsgálata (immunocito- és hisztokémia,12. hétkonfokális mikroszkópia, Western blot, kvantitatív „real-time” PCR) (Bíró Tamás)Az in vitro és in vivo proliferáció (radioaktív és non-radioaktív assay-k), differenciálódás (Western blot,13. hétáramlási citometria), valamint mediátortermelés (ELISA) vizsgálata (Bíró Tamás)Molekuláris biológiai technikák a jelátvitel vizsgálatában (vektorok, expressziós rendszerek) (Bíró Tamás)14. hét215