Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

B1.9. Erdei Sára TTK V.Biokémiai és Molekuláris Biológiai IntézetAZ APOPTOTIKUS SEJTEK FELVÉTELÉRE KÉPES MONONUKLEÁRISFAGOCITÁK ELVÁLASZTÁSÁRA ALKALMAS MÓDSZERAz állatokat, így az embert is nagyszámú, összhangban mköd sejt építi fel. Asejtek élettartama jellemzen rövidebb, mint az egyedé, ezért a sejteknek,szöveteknek, szerveknek állandóan meg kell újulniuk. Sejtjeink jelents részeprogramozott sejthalállal hal el. Az elhaló sejteket a környez sejtek, illetve aszöveti mononukleáris fagociták, kóros esetekben a szövetekbe beszrdmononukleáris fagociták veszik fel. Az elhaló sejtek gyors és nagyhatékonyságú felvétele megakadályozza, hogy az apoptotizáló sejtekmásodlagosan nekrotizálódjanak és gyulladással járó folyamatokat indítsanakel.Az izolált mononukleáris fagociták morfológiai szempontok alapján nemkönnyen különíthetk el. Emiatt azt gondolhatnánk, hogy viszonylag egységessejttípusról van szó, mégsem ismert egyetlen olyan marker sem, amelyegyértelmen meghatározná ket. Az eddig vizsgált mononukleáris fagocitákszinte kivétel nélkül funkcionális szempontból is heterogének. Igaz ez afagocitózisra való képesség tekintetében is.Korábbi kísérletek alapján ismert volt, hogy a makrofágoknak csak egy részeveszi fel az apoptotizáló sejteket. A jelenség molekuláris szint megismeréseérdekében célunk egy, az apoptotikus sejtek felvételére képes és képtelenmakrofágpopulációk elválasztását lehetvé tév módszer kidolgozása.Nagy mennyiség sejt gyors és hatékony elkülönítése magnetikus elválasztássaloldható meg, tehát magnetikusan jelölt apoptotikus sejteket kellett elállítanunk.Ismert volt, hogy a neutrofil granulociták képesek polisztirol alapú gyöngyöketfelvenni, és az is, hogy ezek a sejtek rövid élettartamuk végén spontánapoptotizálnak. Kísérleteink során nagy mennyiség mágnesesen jelöltapoptotikus neutrofil granulocitát hoztunk létre, melyeket fagocitózisszubsztrátként használva az apoptotikus sejteket felvenni képes makrofágokjelölhetk voltak. Az így jelölt és jelöletlen makrofágokat az utolsó lépésbenegymástól elválasztjuk. Az egyes elválasztási lépések hatékonyságát amagnetikus jelölés mellett alkalmazott fluoreszcens jelöléssel követjük.Az apoptotikus sejteket felvenni képes és képtelen makrofág populációkat ajövben szeretnénk immunkémiai és genomikai módszerekkel jellemezni.Témavezet: Dr. Keresztes Gábor75