Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

B1.6. Berényi Erika NEK I.Szemklinika, és Biokémiai és Molekuláris Biológiai IntézetELHALT SEJTEK IN VITRO FAGOCITÓZIS ÁLTALI ELTÁVOLÍTÁSA ARETINÁBANA szervezetben napi szinten a retina rendelkezik a legnagyobb fagocitózisforgalommal. A retina pigment epitel (RPE) sejtek, többi funkciói között, fontosszerepet játszanak a fotoreceptor küls szegmentumok és az elhalt epithel sejtekfagocitózisában. Ha a RPE sejtek nem megfelel módon távolítják el az elhaltsejteket, azok felhalmozódva drusenek képzdéséhez vezetnek, ami jellemz azidskori makuladegenerációra (AMD). Az AMD a nyugati világban az 50 évfölötti emberek súlyos látásromlás- és vaksághoz vezet oka. Normálisan aretinát a vér-retina gát elzárja és az elhalt sejtek eltávolítása a nemprofesszionális fagocita sejtek (RPE) által történik. Amikor a gát sérül (pl. anedves típusú AMD-ben), professzionális fagocita sejtek is (makrofágok,dendritikus sejtek) szerepet játszanak.A retina mködésének tanulmányozásához human immortalizált retina pigmentepitel sejteket (ARPE) használtunk. Az RPE sejtek elhalását kétféle módszerrelindukáltuk: UVB sugárzással (20 perc, 90mJ/cm2.min sugározás után 35%-a asejteknek apoptotikus módon halt meg) valamint azzal, hogy meggátoltuk ket aletapadásban polyHEMA-val, ami így a sejtek anoikis általi sejthalálát okozta(24 óra anoikis után 50%-a a sejteknek apoptozison keresztl halt meg). Azanoikis sejthalál indukálása jó modell az AMD (száraz típus) tanulmányozására.Ezen betegségben a Bruch membránról levált és elhalt epithel sejtekeltávolításában, fagocitózisában nagy szerepe van az egészséges RPE sejteknek.A modellünkben a fagocitózis mértékét FACS analízissel vizsgáltuk éseredményeink azt mutatják, hogy az anoikis módon elhaló sejteket a nemprofesszionális RPE sejtek fagocitálják: 8 óra koinkubációs id után meghaladjaaz 50%-ot. A fagocitózist fluorescens mikroszkóppal is vizsgáltuk, láthatóvátéve az aktin citoszkeletont, valamint a fagocitált, tehát intracellulárisanelhelyezked apoptotikus testeket.A beállított fagocitózis modellünkben az AMD-ben intravitrealisan alkalmazottgyógyszeres kezeléseket szeretnénk vizsgálni, milyen mértékben befolyásoljáka RPE sejtek fagocita képességét, milyen gének játszanak szerepet a fagocitózisfolyamatában in vitro körülmények között.Témavezet: Dr. Petrovski Goran54