Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

E1.7. Ambrus Lídia Mol.Biol. V., Lisztes Erika Mol.Biol. V.Élettani IntézetA TRANZIENS RECEPTOR POTENCIÁL VANILLOID-3 (TRPV3)JELENLÉTÉNEK ÉS FUNKCIÓJÁNAK VIZSGÁLATA HUMÁNEPIDERMÁLIS KERATINOCYTÁKONA tranziens receptor potenciál vanilloid (TRPV) család tagjai olyan hérzékenynem-szelektív kationcsatornák, melyek különböz környezeti tényezk (pl. ahmérséklet, a pH és az ozmolaritás változása) érzékelésére képesek. A TRPV3ezen csatornák közül a közepes, azaz a 31-39°C közötti hmérsékletitartományban aktiválódik. A receptor-csatorna emellett monoterpenoidvegyületekkel is stimulálható, mint pl. az eugenol, thymol és carvacrol (melyekrendre a szegfszeg, a kakukkf és az oregánó fenoljai).Rágcsálók brét vizsgálta kimutatták, hogy a TRPV3 kifejezdik a brkeratinocytáiban, valamint, hogy résztvesz a hajciklus szabályozásában. Nemrendelkezünk ugyanakkor adatokkal arról, hogy a csatorna megtalálható-e ahumán br különféle sejtjein, valamint, hogy milyen sejtfolyamatokban vehetrészt. Kísérleteink során ezért a TRPV3 kifejezdését és funkcionális szerepétvizsgáltuk humán epidermális keratinocytákon.Kísérleteink során elször sikerrel igazoltuk a TRPV3 protein(immuncitokémia, Western blot) és génszint (Q-PCR) jelenlétét humánimmortalizált epidermális HaCaT keratinocytákon. Fluorimetriás méréseinksorán kimutattuk, hogy az eugenol, a thymol és a carvacrol dózisfüggen éstranziensen növelte a sejtek intracelluláris Ca-szintjét, mely a csatornafunkcionális aktivitására utalt. MTT-alapú kolorimetriás assay segítségévelemellett megállapítottuk, hogy a fenti anyagokkal való több napos kezelésdózisfügg módon csökkentette a sejtek életképességét. Azéletképességcsökkenés hátterében álló lehetséges folyamatokat fluorimetriásmérésekkel vizsgálva kimutattuk, hogy a fenti növényi TRPV3-aktivátorokjelentsen fokozták az apoptotikus folyamatok intenzitását, ugyanakkor nemváltottak ki nekrotikus sejthalált.Eredményeink alapján a humán br epidermális keratinocytái funkcionálisanaktív TRPV3 csatornával rendelkeznek, melynek aktivációja – felteheten azCa-szint növelése révén – központi szereppel bír a sejtek túlélésénekszabályozásában. Ezek alapján felmerül a TRPV3 molekula terápiásalkalmazásának lehetsége különféle, a keratinocyták fokozott proliferációjávaljellemzett kórképek (pl. pikkelysömör, daganatok) esetleges kezelésében.Témavezet: Dr. Bíró Tamás46