Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

B2.8. Lázár Nóra Gabriella ÁOK VI.Biofizikai és Sejtbiológiai Intézet, és Heidelbergi Egyetem Sebészeti KlinikaA 4-FENILBUTIRÁT NÖVELI A CONNEXIN 43 EXPRESSZIÓT, DECSÖKKENTI A PROLIFERÁCIÓT ÉS A GAP JUNCTIONÁLISKOMMUNIKÁCIÓT PANCREAS CARCINOMA SEJTEKBENA gap junctiók által közvetített sejtek közötti kommunikáció (GJIC) fontos asejtnövekedés kontrolljában, a differenciációban és az apoptózisban. A 4-fenilbutirát (4-PB) egy hiszton deacetiláz inhibítor, melynek mind tumorelleneságensként, mind a GJIC regulátoraként történ alkalmazási lehetségefelmerült. Utóbbi minségéban a 4-PB a GJIC helyreállításával potencírozhatjamás tumor ellenes kemoterápiák hatását. A 4-PB connexin 43 (Cx43)expresszióra és lokalizációra, a sejtek közötti GJIC-ra és a sejtproliferációragyakorolt hatását három pancreas carcinoma sejtvonalon (T3M4, PANC-1,ASPC) vizsgáltuk. A Cx43 expressziót western blottal és immuncitokémiávalvizsgáltuk, a GJIC mértékét festék transzfer alapján áramlási citométerrel ésfluoreszcens mikroszkóppal határoztuk meg, a sejtproliferáció mérésére MTTtesztet alkalmaztunk. Eredményeink azt mutatják, hogy 1 és 2 mM, de nemnagyobb koncentrációjú 4-PB hatására a T3M4 sejtek Cx43 expressziójaszignifikánsan növekedett, viszont minden koncentráció dózisfügg módoncsökkentette a GJIC-t és a sejtek szaporodási rátáját mindhárom sejtvonalesetében. A proliferációgátlás EC50-e a 2-5mM tartományban volt. A westernblot analízis szerint, a Cx43 nem expresszálódott PANC-1 és ASPC sejtekben.Érdekes módon T3M4 sejtekben a 4-PB nem befolyásolta a Cx43 lokalizációját,amely fleg citoplazmatikusan, a perinukleáris régióra koncentráltanhelyezkedett el. A 4-PB antiproliferatív és GJIC-t csökkent hatása egymássalarányosnak mutatkozott, viszont carbenoxolonnal, egy ismert GJIC inhibítorral,történ kezelés a 4-PB-tal ekvivalens GJIC csökkenést fele akkora proliferációgátlás mellett hozta létre. Feltehet, hogy 4-PB specifikusan szabályozza aCx43 expressziót, de más útvonalakon keresztül antiproliferatív hatása is van,ami károsan befolyásolja a GJIC-t. Továbbá a GJIC-nek talán nem a Cx43 a feszköze T3M4 sejtekben. Mindazonáltal a növekedés gátlás, amit a 4-PB okozpancreas carcinoma sejtvonalakban, megersítést nyert és ezek a megfigyelésekfelhasználhatók további in vivo kísérleteink megtervezéséhez, melyekben a 4-PB tumor ellenes hatását egér xenograft modelleken kívánjuk vizsgálni.Témavezet: Dr. Dmitry Dovzhanskiy, Dr. Vereb György139