Programfüzet (PDF) - DE OEC Tudományos Diákköri Tanács

E1.8. Jenei Ágnes FOK IV., Hollós Enik FOK IV.Élettani IntézetA TERMOSZENZITÍV TRANZIENS RECEPTOR POTENCIÁLCSATORNÁK FUNKCIONÁLIS VIZSGÁLATA CAL27 HUMÁN LAPHÁMCARCINOMA SEJTEKENA múlt évi TDK Konferencián bemutattuk, hogy a “kapszaicin-receptor”tranziens receptor potenciál vanilloid-1 (TRPV1) ioncsatorna kifejezdik humánlaphám carcinomában, valamint az abból származó sejtvonalon (Cal27). Jelenkísérleteinkben a többi hérzékeny TRP csatorna funkcionális jelenlététvizsgáltuk Cal27 sejteken.Kvantitatív “real-time” PCR (Q-PCR) technikával, valamint immuncitokémiaieljárással a melegérzékeny TRPV1, V3 és V4 jelenlétét azonosítottukegyértelmen. Ezzel szemben a melegérzékeny TRPV2 és a hidegérzékenyTRPA1 expresszióját csak immuncitokémiai festéssel sikerült igazolni (a másik”hidegreceptor” TRPM8 egyáltalán nem volt kimutatható). Megállapítottuktovábbá, hogy míg a TRPV1 és V4 kifejezdése jelentsen fokozódott, addig aTRPV3 szintje szignifikánsan csökkent a sejtek tenyésztésének (proliferáció)elrehaladtával. Ezt követen a csatornák funkcionalitását vizsgálvafluorimetriás Ca-méréseket végeztünk, kihasználva a receptor-csatornák Capermeabilitását.Kimutattuk, hogy különféle TRPV3 agonisták (a növényieredet eugenol, thymol és carvacrol, valamint a szintetikus 2-APB) hatásáraegyaránt nagy mérték, magas dózisoknál már irreverzibilis Ca-beáramláskövetkezett be. Érdekes módon a TRPV1-aktivátor kapszaicin nem módosítottaa sejtek Ca-szintjét (még az igen magas, 0,3 mM-os koncentráció sem).Kolorimetriás MTT-assay segítségével megállapítottuk ugyanakkor azt is, hogymind a kapszaicin, valamint a vizsgált összes TRPV3 aktivátor egyarántjelentsen és dózisfügg módon csökkentette a sejtek életképességét.Eredményeink szerint a Cal27 laphám carcinoma sejtek számos hérzékenyTRP-csatornával rendelkeznek, melyek aktivitása szerepet játszhat a sejteknövekedésének és túlélésének szabályozásában. Mindezen adataink felvetik acsatornák potenciális jelentségét a fenti daganatok esetleges terápiájában.Témavezet: Dobrosi Nóra, Dr. Bíró Tamás104