2002 ODLA - Orvosi laboratóriumi és képalkotó diagnosztikai ...

Hisztokémiai diagnosztikai módszerek előadások és gyakorlatok tematikája1. Előadás: A histochemia definiciója. A histochemiai- és histologiai festések különbsége. a histochemia rövidtörténete, különös tekintettel a magyar tudósok szerepére a tudományág kifejlesztésében (Gömöri Gy., Barka T.,von Kossa). Az elektronmikroszkópos histochemia definitioja, módszertani alapelve.2. Előadás: A histochemiai módszereket diagnostikus célra alkalmazó human pathologia definiciója, kifejlődésénekrövid története. (megemlítendő: Krompecher Ödön, Kaposi Mór, Baló József, Kovács Kálmán). Miértszükséges az élő betegekből eltávolított szövetek kórszövettani vizsgálata? A kórszövettani lelet. A kórboncoláslényege, haszna. A boncjegyzőkönyv. A boncolást kiegészítő kórszövettani vizsgálat.3. és 4. Előadás: A nucleinsavak histochemiája. DNS kimutatás. Feulgen reakció.RNS kimutatás. Methylzöldpyroninmódszer. Etidium bromid festés.DNA-ase és RNA-ase alkalmazása. DNS ploiditás meghatározása szövetimetszetekben és parafinos metszetekből nyert sejtmagokon.Pathologia:“Sejtmag pathologia”: A sejtelhalás fénymikroszkópos jelei karyo pyknosis, - rhexis,-lysis. Apoptosis. A szövetelhalásfogalma. Necrosisok. A sejtmag fénymikroszkópos elváltozásai daganatokban. A ploiditás meghatározásjelentősége a daganatok diagnosztikájában.Gyakorlat: Fleugen festés, Etidium bromid festés, Sejmagok preparálása szövettani metszetből, Ploiditás meghatározása5. Előadás: Szénhydrátok histochemiai kimutatása I.Glycogen. PAS reactio. Diastase emésztés. Best Carmin festés.Pathologia: Intracellularis glycogen felhalmozódás. Glycogenosisok, Gierke kór, stb.Galactosaemia.6. Előadás: Szénhydrátok histochemiai kimutatása II. Neutralis mucinok. Phenylhydrazin PAS módszer.Pathologia: Neutralis mucinok intracellularis és extracellularis felhalmozódása gyulladásokban, daganatokban,mucocelek. Mucoviscidosis.Gyakorlat: PAS festés, diastase emésztésBest carmin festés. 120 percSzámonkérés, konzultáció7. Előadás: Szénhydrátok histochemiai kimutatása III. Savanyú mucinok. Az Alcian festékek. Alciánkéktechnika, a pH változtatása. Kritikus electrolyt concentratio. Kombinált Alciánkék-PAS technika.Pathologia: Mucopolysaccharidosisok.8. Előadás: Szénhydrátok histochemiai kimutatása IV. A savanyú mucinok (folytatás). Hale dialysalt vastechnikája. Metachromasias festések. A sulfatalt mucinok elkülönítése a carboxylalt mucinoktól.Spicer-Meyerkombinált aldehyd fuchsin-Alcián kék módszer. A methylatio szerepe. Spicer "high iron diamine" módszer. Azacetylatio, hyaluronidase, sialidase alkalmazása.Pathologia: Savanyú mucinok felhalmozódása, megjelenése mesenchymalis és epithelialis daganatokban(myxoid tumorok, porc daganatok, gyomor metaplasia, prostata cc.,stb.).Gyakorlat: Alciánkék festés a pH függvényében.Metachromasias festés toluidinkékkel.Hyaluronidase emésztésMethylatio9. Előadás: A lectinek jelentősége a szénhydrat histochemiában. Példák a pathologiai felhasználásra.10. Elődás A szénhydratok elektronmikroszkópos histochemiájának fontosabb módszerei. felhasználásuk apathologiai diagnosticában és utalás experimentalis pathologiai jelentőségükre.Gyakorlat: A PAS és az alciánkék festés adaptálása elektronmikroszkópos vizsgálatra.Számonkérés, konzultáció. 90 perc11. Előadás: Lipid kimutató histochemiai eljárások I. A lipidek felosztása histochemiai szempontból. Nonpolaris,-polaris-,hydrophil-,hydrophob lipidek. A fixálás jelentősége. A metszés módjai. Lipid kioldás.Kettőstörés. Sudan fekete B és Olajvörös O módszerek.Pathologia: Intracellularis zsírfelhalmozódás (máj,vese,szív). A zsírszövet daganatai. Lipophag granuloma.12. Előadás: Lipid kimutató histochemiai eljárások.II. Holczinger réz-rubeansavas módszere szabadzsírsavakra.Adams perchlorsavas-naphthoquinon módszere (a digitonin jelentősége is) cholesterinre.Telítetlenlipidek kimutatása, ultraibolya Schiff, OsO4 módszerek. Triglyceridek:Calcium lipase módszer.Phosphoglyceridek:arany-hydroxamin sav módszer. Sphingomyelinek:natrium hydroxyd-dichromsavashaematoxylin módszer. Phospholipidek:ferri haematoxylin módszer. Cerebrosidok:módosított PAS módszer.Sulfatidok:Acriflavin DMAB és metachromasia. Gangliosidok:borohydrid PAS. Lipid immunohistochemia.Gyakorlat: Olajvörös-O festés. Sudan III festés. 120 percLipid kettőstörés kioldás előtt, után. Pathologia itt nincs.Számonkérés, konzutáció. 90 perc129