értekezés - Állatorvostudományi Doktori Iskola
értekezés - Állatorvostudományi Doktori Iskola
értekezés - Állatorvostudományi Doktori Iskola
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
XIII. táblázat A védőhatás vizsgálatának kísérleti elrendezése és a fertőzési csíraszámok<br />
Vakcina törzs Challenge törzs<br />
Csoport<br />
Név Fertőzés<br />
[CFU/csibe]<br />
Név Fertőzés<br />
[CFU/csibe]<br />
1. Vakcina kontroll 1 SE11 Spc R 10 8 - -<br />
2. Principális 1 SE11 Spc R 10 8 SE 147 Nal R 10 5<br />
3. Challenge kontroll - - SE 147 Nal R 10 5<br />
4. Principális 2 SE ∆155 Cm R 10 8 SE 147 Nal R 10 5<br />
5. Vakcina kontroll 2 SE ∆155 Cm R 10 8 - -<br />
A kísérleti minták feldolgozása a szerv inváziós és kolonizációs vizsgálatokhoz képest néhány<br />
kisebb módosítással történt. A vakbéltartalom feldolgozása a korábbiakhoz hasonlóan zajlott;<br />
a vakcina kontroll csoportoknál spektinomicin és kloramfenikol tartalmú, míg a ráfertőzött<br />
(„challengelt”) csoportok esetében nalidixinsav tartalmú RV dúsítót és BTK táptalajt<br />
használtunk a hígítás illetve kioltás során, hogy mind a „vakcina”, mind a „challenge” törzs<br />
csíraszámát meghatározhassuk. Hasonlóan jártunk el a máj mintákkal is, melyeket egy<br />
homogenizálási lépés után a vakbéltartalomhoz hasonlóan hígítottunk és titráltunk. A máj<br />
homogenizálását steril műanyag tasakban, 50-szeres mennyiségű RV dúsítóban, Stomacher<br />
(Seward Stomacher 80 Biomaster) homogenizátorral végeztük. A lép minták feldolgozás az<br />
előkísérletekben leírtaknak megfelelően zajlott, kivéve a 48 órás kioltásokat, amelyet ezúttal<br />
elhagytunk.<br />
A bakteriológiai mintavételi eljárást kiegészítettük a kloákatamponok gyűjtésével, melyet a<br />
többi vizsgálattal egyidőben végeztünk úgy, hogy a feldolgozásra került állatoknak mindig<br />
legyen kloákatampon eredménye is. A mintavételre kereskedelmi forgalomban kapható, steril<br />
fültisztítót használtunk, melyet mintavétel után RV dúsítóban inkubáltunk 24 órán át, majd<br />
ebből antibiotikumos BTK-ra szélesztettünk, így vizsgálva a madarak Salmonella ürítését.<br />
A kísérleti állatok első hatos csoportját a fertőzést követő ötödik napon dolgoztuk fel. Ezt<br />
követően minden újabb hét elteltével megismételtük a feldolgozást a fenti séma szerint,<br />
mindig 6-6 állatot felhasználva csoportonként, egészen a negyedik hétig.<br />
A negyedik hét végén, az utolsó feldolgozás alkalmával a Vakcina kontroll csoportokban vért<br />
vettünk, az állatok Salmonella flagellin specifikus immunválaszát tesztelendő. A savókat<br />
szendvics blokkoló ELISA-val (DAS ELISA) (van Zijderveld és mtsai., 1993), a S. Enteritidis<br />
83