értekezés - Állatorvostudományi Doktori Iskola
értekezés - Állatorvostudományi Doktori Iskola
értekezés - Állatorvostudományi Doktori Iskola
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
XII. táblázat A real-time PCR-ek során használt primerek szekvenciái<br />
Primer Szekvencia Forrás<br />
IL-8 F CTGCGGTGCC AGTGCATTAG Sadeyen és mtsai., 2004<br />
IL-8 R AGTACACCTC TCTTCCATCC Sadeyen és mtsai., 2004<br />
GAPDH F TCTACACACG GACACTTCAA GGGC Szmolka, nem publikált<br />
GAPDH F TGGACTCCAC AACATACTCA GCAC Szmolka, nem publikált<br />
5.2.5. Kísérleti állatok és állatkísérleti modell<br />
Az állatkísérletek során hím ivarú Ross típusú naposcsibéket használtunk, melyek a Bábolna<br />
Keltető Kft–től, nagyszülői SPF (Salmonella és más kórokozóktól mentes)<br />
tenyészállományból és vegyes ivarú White Leghorn fajtájú SPF naposcsibéket, melyek a<br />
CEVA Rt-től származtak. A naposcsibéket a keltetés napján szállítottuk intézetünkbe, ahol<br />
érkezésük után véletlenszerűen, azonos számú egyedből álló csoportokba osztottuk őket. A<br />
szerv inváziós vizsgálatokhoz 44 x 40 cm-es alapterületű műanyag dobozokban hat egyedes<br />
csoportokban tartottuk a madarakat hat napos korukig, míg a védőhatás vizsgálata során<br />
elkülönített termekben, negyvenes induló létszámmal dolgoztunk. A kísérlet során<br />
antibiotikum mentes baromfi befejező tápot (Rákoskeverő Kft) kaptak ad libitum.<br />
Szerv inváziós és kolonizációs képességek vizsgálata<br />
A naposcsibék a kikelésük napján, érkezésüktől számított egy órán belül lettek fertőzve a<br />
megfelelő baktérium szuszpenziójával. A fertőzéshez a vizsgálandó baktérium törzs stacioner,<br />
antibiotikum mentes leves tenyészetét (37 C°, O/N) kétszeresére vagy húszszorosára<br />
(kísérlettől függően) hígítottuk LB levessel. Az így nyert hígított tenyészet 0,5 ml-ével, steril<br />
begyszonda segítségével egyedileg fertőztünk minden kísérleti állatot. A fertőzés során<br />
körülbelül 1-2 x 10 7 CFU vagy 1-2 x 10 8 CFU mennyiségű baktérium került az állatok<br />
emésztőrendszerébe, attól függően, hogy milyen dózisú fertőzést tartottunk célszerűnek<br />
vizsgálni. A csibék a fertőzés előtt csak vizet kaptak, takarmányhoz (melyet Salmonella és<br />
antimikrobiális anyag mentességre akkreditált laboratóriumban ellenőriztettünk) először a<br />
fertőzés után egy órával jutottak.<br />
81
Change language