értekezés - Állatorvostudományi Doktori Iskola
értekezés - Állatorvostudományi Doktori Iskola
értekezés - Állatorvostudományi Doktori Iskola
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
levesbe átoltva passzáltuk, ezt a kísérletet összesen 40 lépésig folytattuk, így próbálva minél<br />
magasabb generációszámot elérni. Ezzel párhuzamosan stacioner fázisú levestenyészetben is<br />
passzáltuk a baktériumot, 2-3 naponta oltva át a törzset. A tenyészetekből minden ötödik<br />
passzálási lépés után vettünk mintát s az így nyert egyedi telepeket teszteltük a plazmid<br />
jelenlétére.<br />
A kiválasztott telepekben a plazmid jelenlétét, a Salmonella virulencia plazmidokon mindig<br />
megtalálható spvC virulencia génre specifikus primer pár segítségével, PCR-rel vizsgáltuk<br />
(VIII. táblázat). A kísérletek során összesen 920 egyedi telepet vizsgáltunk meg PCR-rel a<br />
virulencia plazmid jelenlétére, és azt tapasztaltuk, hogy ezek mindegyike hordozta azt (12.<br />
ábra). A különböző passzálási lépésekből izolált, plazmid jelenlétére megvizsgált telepek<br />
számát a IX. táblázat mutatja.<br />
IX. táblázat A hagyományos EtBr módszerekkel végzett virulencia plazmid űzési kísérletek<br />
eredményei a Salmonella Enteritidis 11/2102 törzsön. (A plazmid jelenlétét az spvC génre<br />
specifikus PCR-rel végeztük.)<br />
Passzázsok száma A tesztelt telepek<br />
száma<br />
Plazmid mentes Eliminálási gyakoriság<br />
1-10 470 -