értekezés - Állatorvostudományi Doktori Iskola

11. ábra A S. Enteritidis virulencia plazmidjának vázlatos genetikai térképe a fontosabb
funkcionális régiók feltüntetésével.
4.1.2. Plazmidűzési lehetőségek
Annak érdekében, hogy e natív plazmidok szerepét alaposabban tanulmányozhassuk, illetve
az általuk kódolt tulajdonságoktól mentes mutáns baktériumokat előállítsunk, célszerű a
virulencia plazmidot kiűzni. Erre számos módszert írtak le. Talán az egyik legismertebb és
legelterjedtebb technika az etídium-bromidos kezelés, melyet gyakran kombinálnak hősokkal,
magas hőmérsékleten való passzálással (Poppe és Gyles, 1988). Maga az eljárás igen
egyszerű és gyors, azonban egyes esetekben kevéssé hatékonynak bizonyult (Pickett és mtsai.,
2005).
Az alternatív plazmid eliminációs technikáknak több változata ismert. Talán leggyakrabban a
transzpozon közvetítette direkt szelekciós módszerek használatosak, így a Tn5-sacB (Hynes
és mtsai., 1989) vagy a Tn5-rpsL rendszer (Stojiljkovic és mtsai., 1991). Közös
alapkoncepciója e módszereknek, hogy transzpozon inszercióval olyan „öngyilkos”
tulajdonságokat (szukróz vagy streptomicin érzékenység) közvetítő géneket juttatnak az
57