értekezés - Állatorvostudományi Doktori Iskola

7. Konjugációs lépés: összekevertünk 100 µl donor és 100 µl recipiens tenyészetet steril
üvegbottal egy antibiotikum mentes LB agar felszínén. Kontrollként a donor és a recipiens
törzs színtenyészetét külön is szélesztettük.
8. Inkubáció, 37°C, 5 óra
9. Az öt óra alatt kinőtt baktérium pázsitot 3 ml steril fiziológiás sóoldattal lemostuk, majd
tízes léptékű hígítási sort készítettünk négy lépésig.
10. Az egyes (1., 2., 3. és 4.) hígítási lépésekből Ap, Cm tartalmú LB lemezekre100-100 µl-t
szélesztettünk.
11. Inkubáció, 37°C, O/N
12. A konjugáció eredményeként kinőtt izolált telepeket megszámoltuk, hogy meghatározzuk
az összes, a donor, a recipiens és a transzkonjugánsok csíraszámát, majd a transzkonjugáns
telepeket steril fogpiszkálóval átoltottuk Ap, Cm tartalmú LB lemezekre, hogy az esetleges
donor és recipiens maradványoktól biztosan megszabaduljunk.
3.2.7. Motilitás teszt
A transzpozon mutagenezis eredményeként kinőtt Ap R és Cm R Salmonella Enteritidis
mutánsok mozgásképességét lágyagaros teszttel vizsgáltuk. Az egyes mutánsokat az izolált
telepről levágott végű tűszerű oltókaccsal szelektív (Ap + Cm) LB 0,1% agart tartalmazó
csövek felső harmadába szúrtuk. 24 óra 37 o C-on történő inkubálás után a baktériumok
mozgásképességét vizsgáltuk.
39