értekezés - Állatorvostudományi Doktori Iskola
értekezés - Állatorvostudományi Doktori Iskola
értekezés - Állatorvostudományi Doktori Iskola
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
3.2. Anyagok és módszerek<br />
3.2.1. Baktériumtörzsek<br />
TG1: Escherichi coli K-12 supE hsdD5 thi∆(lac-proAB) F’(traD36 proAB + lacI q lacZ∆M15)<br />
(Gibson, 1984)<br />
S17-1 λ pir: Escherichi coli K-12 konjugatív törzs, pro thi recA λpir hsdR (r - m + ) Tp R Sm R [Ω<br />
RP4-2-Tc::Mu-Km::Tn7] (Simon és mtsai, 1983)<br />
SE11: Salmonella Enteritidis 11, 1-es fágtípusú, baromfi eredetű vad törzs<br />
3.2.2. Táptalajok, antibiotikumok<br />
Bakteriális táptalajként LB tápfolyadékot és agart (Sambrook és mtsai., 1989) használtunk.<br />
Elektroporálás után a sejtek regenerálásához SOC médiumot (Sambrook és mtsai., 1989)<br />
használtunk. Az antibiotikumokat (Sigma) minden esetben az alábbi koncentrációban<br />
használtuk: ampicillin (Ap): 150 µg/ml, kloramfenikol (Cm): 20 µg/ml.<br />
3.2.3. Plazmidok<br />
A munkánk során felhasznált és előállított plazmidok leírását az Eredmények fejezetben<br />
közöljük.<br />
3.2.4. Standard mikrobiológiai és molekuláris biológiai eljárások<br />
A külön nem részletezett molekuláris biológiai módszereket és a szükséges oldatokat<br />
Sambrook és mtsai. (1989) szerint alkalmaztuk.<br />
Enzimek<br />
A polimeráz láncreakcióhoz Pwo polimerázt (Roche), vagy Taq polimerázt (MBI Fermentas)<br />
használtunk.<br />
A kisérletek során használt restrikciós endonukleázok (BamHI, BglI, BglII, ClaI, EcoRI,<br />
EcoRV, HindIII, PstI, SalI, XbaI, XhoI) az MBI Fermentas valamint a Boehringer-Mannheim<br />
35
Change language